血清补体C4测定

血清补体C4测定

1检验目的

指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2原理

样品中补体C4与试剂中相应的抗体在溶液中相结合，立即形成抗原-抗体复合物，并形成一定浊度。该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。通过与同样处理的校准液比较，计算未知样品中的补体C4浓度。

3标本要求

3.1使用新鲜血清,不使用血浆.

3.2在采集血液后2h分离血清.

3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.

3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.

4试剂

4.1试剂：本科使用浙江伊利康生物技术限公司的试剂盒. （浙食药监械（准）字2014第2400384号YZB/浙2314-40-2014）

4.1.1试剂盒组成如下:

R1三羟甲基氨基甲烷缓冲液100mmol/L，聚乙二醇40g/L R2抗体试剂：羊抗人补体C3抗体适量，叠氮钠0.95g/L 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项：试剂中含有稳定剂，可能存在一定的刺激作用和毒性，请勿直接接触皮肤及眼睛。一旦接触，即用大量清水冲洗。请勿吞服。

4.2 校准品：使用浙江伊利康生物技术限公司提供的C4校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器

AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪

6 操作步骤

6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。

7 质量控制

在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

8 计算方法

以C4复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/L报告。

9 参考值

0.2—0.4g/L我室的参考值0.2-0.4/L

10临床意义:

10.1 C4升高:常见于风湿热的急性期，结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗塞和各种类型的关节炎等。

10.2 C4降低：常见于自身免疫性慢性活动性肝炎、SLE、多发性硬化症、类风湿性关节炎、IgA肾病、亚急性硬化性全脑炎等。

11操作性能

11.1分析灵敏度：样本中的C4浓度为0.28 g/L时，其吸光度值应≥0.1000

11.2线性范围：试剂（盒）线性范围应覆盖[0.05～0.80]g/L。

a) 线性相关系数（r）应不小于0.990；b) C4浓度<0.25g/L，线性偏差应≤0.05g/L；C4浓度>0.25g/L，线性偏差应≤10％。

11.3准确度：相对偏差（B）应≤8%。

11.4精密度：(1)重复性：变异系数（CV）应不大于4%；(2)批间差：相对极差（R）应不大于8%。

12 超出范围结果处理

当测定样本中C4>0.8g/L时，应对样本进行稀释后再进行测。应将样品用0.9g/L氯化钠溶液作1：9稀释，重新测定，结果乘以10。

13 病危报警值的处理

无警告/危急值。

14 方法局限性

14.1 当样品中甘油三酯浓度>20 mmol/L，抗坏血酸浓度>2540umol/L,胆红素浓度>342umol/L，血红蛋白浓度>5.0g/L时对测定结果有影响。

14.2 C4测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，还应根据患者的体征、病史以及其它的诊断项目、诊断手段进行综合判断。

15 补救措施

当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。

16 参考文献：

16.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编·全国临床检验操作规程·中华人民共和国卫生部医政司编·(第四版)

16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版

16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版

16.4试剂说明书