我对荧光检测器的认识

我对荧光检测器的认识

荧光检测器是高效液相色谱仪常用的一种检测器。其灵敏度在目前常用的HPLC检测器中最高，在HPLC中应用较多。能发射荧光的物质或能用柱前或柱后衍生法转变成荧光衍生物的物质均可以使用荧光检测器进行分析。极高灵敏度和良好选择性是它最大的优点，因而在某些领域如药物和生化分析中起着不可替代的作用。

一、工作原理

在实验条件固定时，荧光强度与样品浓度呈线性关系，因此可直接用于定量分析。它属于浓度型检测器，可用于梯度淋洗。

二、荧光检测器的光路

由激发光源发出的光通过透镜和滤光片得到特定波长的单色光，再经透镜聚焦在流通池上，组分吸收光能量后发射的荧光经过透镜和滤光片，光电倍增管在与激发光成90度的方向对特定波长的荧光进行检验。

三、优缺点

优点：○1选择性高，只对荧光物质有响应。○2灵敏度高，荧光检测器的灵敏度比紫外-可见光检测器的灵敏度约高两个数量级。最低检出限可达10-13g/ml，适合于多环芳烃及各种荧光物质的痕量分析，也可用于检测不发荧光但经化学反应后可发荧光的物质。○3线性范围较宽。虽然比紫外吸收检测器窄，但对大多数痕量分析，该线性范围已足够宽。○4受外界条件的影响较小。

缺点：○1与紫外-可见光检测器相比，应用范围较窄。因为不是所有的化合物在选择的条件下都能发生荧光，所以荧光检测器不属于通用型检测器。○2对通

常发生在荧光测量中的一些干扰非常敏感，如背景荧光和猝灭效应等。

四、应用

近年来，荧光衍生试剂衍生化后高效液相色谱分离以检测多种化学与生物分子的方法已经广泛应用于临床、医药、食品、环保、生物化学等方面。

例如：尿中单萜醇、苹果饮料中的氨基甲酸乙酯、中药中的赭曲霉毒素A、玉米中的玉米赤霉烯酮、咖啡中赭曲霉毒素A、血清中的芳香族氨基酸、食品残留的喹诺酮类药物、猪肌肉中的多巴胺、花生油中游离脂肪酸、动物肝脏中10种喹诺酮类药物残留、血浆中羧甲司坦、血浆中硫酸阿米卡星、黄酒中尿素含量、血清犬尿氨酸和色氨酸等等。

由此我们可以看出，检测器的选择是实验分析的重要环节之一，在以后的实验学习中，我们要统筹考虑检测器的工作原理，适用范围，优缺点等等，借鉴他人的经验以选择合适的检测器对待测物进行分析。