含葡聚糖酶牙膏对牙菌斑模型的分解和去除研究

３ 结论
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｍｕｔａｎｓ［Ｊ］ＰｈａｒｍＳｃｉ，１９８５，７４（１）：７９－８１ ［５］谢松梅，崔慧斐 甘草 酸的研究进展 ［Ｊ］食品与药品，
甘草酸二钾对牙龈卟啉单胞菌具有抑制作用， 最小抑菌浓度为 １８７５ｇ／Ｌ；含 ０２％甘草酸二钾的 牙膏具有抑制牙龈卟啉单胞菌的作用，并且在二甲
面，ＧＴＦｓ分解蔗糖并合成能够附着在牙齿表面的细 胞外多糖；另一方面，变形链球菌产生的酸会促使牙
能够分解变形链球菌产生的葡聚糖，这种酶可以预 防龋齿和牙菌斑的形成［４～７］。
齿脱矿化。这 些 作 用 会 由 于 糖 的 存 在 而 加 剧。 因
本次研究旨在确认含有葡聚糖酶的牙膏对牙菌
此，为保护牙齿，阻止葡聚糖的合成和酸的产生至关 斑的分解和去除作用。
２００６（３）：１－５ ［６］吉秋霞，陈西广，赵庆生 可注射氯已定温度敏感水凝胶
的体外释放及对牙周常见致病菌的抑制作用［Ｊ］中国海洋药物杂 志，２００９（４）：２６－３０
苯致小鼠耳廓肿胀的抗炎模型上，其具有超过阳性 对照品醋酸氟轻松软膏的效果。
参考文献
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关键词：葡聚糖酶；牙膏；去除牙菌斑；分解牙菌斑；预防龋齿 中图分类号：ＴＳ 文献标识码：Ａ 文章编号：２０９５－３６０７（２０１８）０３－１２－０３
引言
重要。变形链球菌可产生三种葡糖基转移酶：一种 合成富含 α－１，６糖苷链的葡聚糖，一种合成富含 α
口腔细菌，特别是变形链球菌，已经被广泛认为 －１，３糖苷链的葡聚糖，还有一种合成水溶性葡聚
青木優子，等：含葡聚糖酶牙膏对牙菌斑模型的分解和去除研究
１３
１ 材料和方法
１１ 牙膏 试验组牙膏：含葡聚糖酶（１７５单位 ／克）的牙 膏，对照组牙膏：不含葡聚糖酶的牙膏。除葡聚糖酶 外，两种牙膏在其他特征值方面没有差异。 １１１ 待评价牙膏样品试液准备 待评价牙膏用 ＰＢＳ缓冲液［氯化钠（日本大阪， 和光试剂公司）８０克 ／升，氯化钾（日本大阪，和光 试剂公司）０２０克 ／升，磷酸二氢钾 ０２０克 ／升，十 二水磷酸氢二钠 ２９０克 ／升，并用 １Ｍ 氢氧化钾试 液调整 ｐＨ值至 ７４］稀释 ３倍，样品均匀分散后，离 心分离（１０，０００ｒｐｍ，１０分钟，２０℃）并取上清液用于 试验。 １２ 分解牙菌斑 １２１ 葡聚糖酶溶液准备 用蒸馏水溶解葡聚糖酶制成浓度为 ０１２％的 溶液，再用 ＰＢＳ缓冲液将此溶液稀释 ３倍。溶液中 所用的葡聚糖酶为添加在牙膏中的葡聚糖酶原料。 １２２ 葡聚糖溶液准备 用 ０１Ｍ 的 醋 酸 缓 冲 液 溶 解 ２５克 的 葡 聚 糖 （来 自 肠 系 膜 明 串 珠 菌，摩 尔 质 量 １５０００００ ～ ２８０００００，ＣＡＳ号：９００４－５４－０，生产商：西格玛 －奥 德里奇），并定容至 １００毫升。 １２３ 观察分解葡聚糖的颜色反应 我们评价了以下 ５种样品：①蒸馏水；②ＰＢＳ缓 冲液；③试验组牙膏；④对照组牙膏；⑤葡聚糖酶溶 液。 ３７℃水浴加热各样品 １０分钟。各取 １毫升检 测溶液至试管中，再向各试管中分别加入 １毫升葡 聚糖溶液，涡流充分混合后，于 ３７℃水浴中加热 ３ 分钟。再往各试管中分别加入 ０５毫升费林试液， 将各溶液水浴加热至沸腾 ５分钟，取出后冷却，观察 溶液的变化。 １３ 去除牙菌斑 １３１ 牙菌斑模型准备 用大豆琼脂平板培养基（ＴＳＡ，ＤｉｆｃｏＴＭ）将变异 链球菌（ＡＴＣＣＲ２５１７５ＴＭ）于 ３７℃，厌氧条件（８０％ 氮气，１０％二氧化碳，１０％氢气）下培养 ３天。用接 种环挑取培养后的菌种并接种到 ４００毫升的预培 养基（托德休伊特肉汤培养基，ＢａｃｔｏＴＭ）中，同样条 件下培养 １７小时后，取 ２０微升该培养液，并混合到 盛有 ２００毫升主培养基（含 １％蔗糖的托德休伊特 肉汤培养基，ＢａｃｔｏＴＭ）的试管中。 将试管保持斜放（４５°角），并于 ３７℃，厌氧条件 下培养 ６小时后，试管内壁生成菌膜。从试管中移
（１狮王株式会社 研究开发本部 口腔研究所，日本 东京 １３０－８６４４；２中国科学院理化技术研究所抗菌材料检测中心，北京 １００１９０； ３狮王日用化工（青岛）有限公司 研发本部 山东省 青岛 ２６６５１０）
摘 要：目的：本研究旨在论证含葡聚糖酶的牙膏对牙菌斑的分解和去除作用。方 法：在分解作用试验中，将牙膏三倍稀释液的上清液作用于葡聚糖溶液（作为牙菌斑模 型），评价其与费林试液的比色反应。在去除作用试验中，将牙膏三倍稀释液的上清液 作用于由变形链球菌制备的牙菌斑模型，并检查残留菌斑的吸光度（５５０ｎｍ）。结果：在 含有葡聚糖酶牙 膏 的 试 液 中，观 察 到 红 棕 色 沉 淀。同 时，在 对 照 组 牙 膏 （不 含 葡 聚 糖 酶）的试液中，没有观察到沉淀。试验组牙膏的牙菌斑去除效果是对照组的 ２７倍。结 论：研究结果显示，含有葡聚糖酶的牙膏通过切断牙菌斑中葡聚糖的 α－１，６糖苷链而 具有较强牙菌斑去除作用。因此，试验组牙膏有助于预防龋齿。
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（收稿日期：２０１８年 ４月 １日）
２０１８年第 ３期
是引起龋齿的主要病原体。其导致龋齿形成的机理 主要有两种。
糖。这些葡聚糖都同粘附在牙齿表面的细菌细胞存 在联系 。 ［１～３］
变形链球菌中的葡糖基转移酶（简称 ＧＴＦｓ）在
在牙科领域，很多研究者都对葡聚糖酶的功对葡聚糖的分解作用作过相关论述。葡聚糖酶
口腔护理用品工业
第二十八卷第三册
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ＯＲＡＬＣＡＲＥＩＮＤＵＳＴＲＹ
２０１８年 ６月

含葡聚糖酶牙膏对牙菌斑模型的分解和去除研究
青木優子１ 郑苏江２ 野村安雄１ 柴崎顕一郞１ 飯泉剛太郎３ 刘 婧３ 李德豹３ 安丰宝３
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