黄柏中黄连素的提取

黄柏中黄连素的提取

摘要：报道了黄柏中黄连素的提取方法，用川黄柏中的荥经6年生的优质黄柏皮作

为材料。通过乙醇回流提取、减压回收溶剂、结晶得出黄连素的粗品，重结晶得

黄连素的精品。收率7.42%,含量为98.4%。

关键词：黄柏; 黄连素; 提取; 含量测定

Abstract:CorkwerereportedBerberineextractionmethod,thePhellodendronofYingjingsix-

year-old Huang Baipi quality as a material. By ethanol extraction and solvent recovery decompression, drawn berberine crystallization of crude goods, recrystallization in berberine excellent. Yield of 7.42%, the content of 98.4%。

Key words：Cork，Berberine，Extraction，Determination

1. 前言

1.1 天然药用植物

植物中含有很多次生代谢物，是药物天然宝库。世界有75%的人依赖从植物中获得的药物，除化学合成之外，人类大量依赖植物次生代谢物作为药物。药用植物是中药的主要来源，我国的传统中草药已有数千年的历史，是世界上首屈一指的中草药生产和应用大国。可用于治疗疾病的药用植物有11146种，其中有280种可以通过人工栽培获得原料，其余种类全部来源于野生资源。

与化学合成相比，植物药具有低毒性.天然性.成本低等特点，植物产生的药物在微生物中很少发现，且结构复杂.多样，合成难度大.耗时长。并且天然的植物药在药用等方面比较安全，比化学合成药物的副作用要小。

1.2 黄柏药用价值

黄柏别名黄薜、薜木、黄坡椤，为芸香科植物。据有关资料介绍，黄柏内皮性味苦寒，含有黄柏酮、甾醇类化合物，是清热解毒、燥湿泻火的良药，可治疗阴虚火旺、骨蒸盗汗、风湿性关节炎、细菌性痢疾、黄疸等疾病。我国利用黄柏皮治病已有千年的历史，因此，黄柏从古至今就为患者和医家所宠爱。距今2000余年的我国第一部医学典籍《神农本草经》将其列为上品，《名医别录》则有“根主心腹百病，安魂魄，不饥渴，久服轻身，延年通神”的说法。《龙城录》则称黄蘖是“神药”，能“治三虫”。

1.3 黄连素的药理[4]

黄连素抗菌作用强，性质稳定，对脑膜炎球菌、伤寒杆菌、白喉杆菌、等有较强的抑制和杀菌作用，对流感病毒、阿米巴原虫.钩端螺旋体及某些皮肤真菌也有一定的抑制作用，可用于眼结膜炎，百日咳、肺结核(与其它抗结核药配伍)的治疗；研碎和香油外抹还可治疗化脓性中耳炎、皮肤“黄水疮”等。

黄连素对多种革兰氏阳性菌和阴性菌有抑菌作用，临床上主要用于清热解毒和治疗肠道感染。近年来在其药理作用和临床研究中发现，黄连素具有多种非抗菌作用，动物实验及临床疗效观察发现，黄连素还具有抗心律失常、抗心力衰竭以及降低血压、降低血粘度的作用。

1.4 黄连素化学结构式

黄连素(又名小檗碱)是从黄柏等植物中提取出的一种异喹啉类生物碱，黄连素是黄色针状体，微溶于水和乙醇，较易溶于热水和热乙醇中，几乎不溶于乙醚。黄连素的结构式以较稳定的季铵碱为主，其结构式为：

在自然界黄连素多以季铵盐的形式存在，其盐酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、酸盐均难溶于水，易溶于热水，且各种盐的纯化都比较容易。

2. 材料及试剂仪器

2.1本次实验所用原材料为；荥经6年生的优质黄柏皮

黄连素的对照品由指导老师蒲老师提供。

2.2实验仪器及试剂：由学校生物技术实验室提供。

试剂：80%乙醇，丙酮(A. R) ，30%HCl,1%醋酸

仪器: 粉碎机、电热恒温浴锅、SHB - 3 行循环水式多用真空泵、旋转蒸发器RE-52A、

紫外分光光度计、移液器、圆底烧瓶、三角瓶、电子天平等。

3. 方法、步骤

3.1 黄连素的提取

称取50g 中药黄柏切碎，研磨成粉状，放入250ml 圆底烧瓶中。加入乙醇的总量为500ml ，重复三次提取，每次加入的量的比例为4：3：3，每次提取时间的比例为2：2：1。

第一次在装有黄柏粉末的250ml 圆底烧瓶中加入80%乙醇200ml 装上回流冷凝管，80℃热水浴加热回流2h ，抽滤得滤液。

第二次加入80%乙醇150ml 装上回流冷凝管，80℃热水浴加热回流2h ，抽滤得滤液。 第三次加入80%乙醇150ml 装上回流冷凝管，80℃热水浴加热回流1h ，抽滤得滤液。 合并三次所得滤液，在减压下情况下蒸出乙醇(回收)直到棕红色糖浆状。

3.2 结晶

再加入1%醋酸(约30～40m1)加热溶解，抽滤以除去不溶物，然后于溶液中滴加浓盐酸至溶液浑浊为止，放置冷却，即有黄色针状体的黄连素盐酸盐析出，抽滤，结晶用冰水洗涤两次，再用丙酮洗涤一次，得粗品称重。

3.3 黄连素的重结晶

将黄连素粗品加蒸馏水加热煮沸至刚好溶解， 用石灰乳调节PH 为8.5～9.8，稍冷后滤去杂质， 并继续将滤液放置冷却酸化， 即有针状晶体黄连素即析出， 过滤，将结晶体在50～60℃下烘干。即得到黄连素的精品。

3.4 工艺流程

回流提取 黄连粉末

抽滤 减压蒸馏 洗涤 滤渣 结晶 黄连素 （精品） 抽滤 重结晶 回流乙醇

3.5 黄连素的鉴定反应[9]

取所得黄连素约50mg，加蒸馏水5ml，缓慢加热使之溶解，加NaOH溶液2滴，显橙色，溶液经放冷后，过滤，滤液中加丙酮数滴，即产生黄色的浑浊或沉淀。与对照品相同。

取所得黄连素少许，加硫酸2ml温热至溶解，再加漂白粉少许，振荡后即产生樱桃红色。与对照品相同。

于所得黄连素的水溶液中，滴加浓硝酸数滴，溶液产生黄绿色硝酸小蘖碱沉淀。与对照品相同。

3.6 黄连素含量的测定

3.6.1 黄连素标准溶液的配制[8]

精密称取黄连素对照品20.00mg于10Oml容量瓶中，加量无水乙醇在水浴上加热溶解。放冷至室温，用无水乙醇定容至刻度．再精密吸取1.OOmL上述溶液加入10mL容量瓶中用无水乙醇定容至刻度。摇匀，备用。其溶液浓度为0.020mg/mL。

3.6.2 标准曲线的绘制

分别精密量取浓度为0.020mg/mL的黄连素标准溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL，置于5个10mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，混匀．标准溶液的浓度分别为2.0、4.0、6.0、8.0、l0.0 X 10-3mg/mL，以乙醇为空白，用紫外可见分光光度计进行扫描，测得在350nm为最大吸光度。以吸光度对浓度进行回归计算，得回归方程(y=0.055x+0.096，r=0.9987)．测定结果见表一,黄连素标准曲线图如图1示。

表一黄连素对照品浓度吸光度对照表

编号浓度（1 X 10-3mg／ml）（n=2）吸光度

1 0 0.000

2 2 0.126

3 4 0.225

4 6 0.327

5 8 0.438

6 10 0.551