茶多酚对结直肠癌作用机理的研究进展

5 抗肿瘤多药耐药性
［7］ Boris Zhivotovsky，Sten Orrenius． Carcinogenesis and apoptosis： para-
抗多药性（ MDR） 是指肿瘤细胞一旦对某一抗癌药物产生抗
digms and paradoxes［J］． Carcinogenesis，2006，27（ 10） ： 1939．
时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 3 期
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 3
茶多酚对结直肠癌作用机理的研究进展
王水明，金黑鹰*
（ 南京中医药大学第一临床医学院，江苏 南京 210029）
摘要： 茶多酚是一种从茶叶中提取的混合物，近年来的研究表明，茶多酚对体内的多种肿瘤都有一定的抑制作用。这
研究表明茶多酚可以抑制多种与结直肠肿瘤相关蛋白的活 性。Shimizu 等［13］通过研究 EGCG 对人结肠癌细胞中 IGF / IGF － 1R 系统活性的作用，发现结肠癌细胞系 Caco2，HT － 29，SW837 和 SW480 高表达 IGF － 1R 的受体，且 SW837 和 SW480 显示出这种受 体的激活。IGF / IGF － 1R 系统包括 IGF，IGF － 1R 和 IGFBPs 蛋白 质，它们在结肠癌的发生与发展过程中起重要作用，IGF － 1R 也是 一个受体酪氨酸激酶。EGCG 的活性与抑制多重下游信号途径有 关。用 EGCG 处理 SW837 细胞，可使 IGF － 1R 蛋白的磷酸纤维素 形式（ 即激活形式） 下降 6 h； 12 h 后，IGF － 1 蛋白和 mRNA 的水平 都下降，在 3 ～ 6 h IGFBP － 3 和 mRNA 的水平升高。当 SW837 细 胞用 EGCG 处理更长时间，极低浓度的 EGCG 也可以抑制 IGF －
茶多酚是茶叶中含有的一类多羟基酚类化合物的总称，含量 约占茶叶干物质总量的 20% ～ 30% 。茶多酚的主体成分为儿茶 素类化合物，约占茶多酚总量的 65% ～ 80% 。儿茶素类化合物 一般又分为 4 种主要的儿茶素，包括表没食子儿茶素没食子酸酯 （ EGCG） 、表没食子儿茶素（ EGC） 、表儿茶素没食子酸酯（ ECG） 和表儿茶素（ EC） ，其中以表没食子儿茶素没食子酸酯 （ EGCG） 含量最高，占到儿茶素类化合物的 50% 左右［2］。茶多酚具有调 节免疫功能、抗氧化、抑制炎症反应、抗肿瘤等多种作用［3，4］。茶 多酚抗肿瘤作用是目前众多实验研究的热点，其作用机制正在不 断明确。这对于结直肠癌的预防和治疗是一个新的方向，现综述 茶多酚对结直肠癌作用机理的一些研究进展。 1 影响肿瘤细胞生长周期，抑制肿瘤细胞增殖
SW1116，建立了抗多药性细胞株 SW1116 / DOX，在此基础上筛选
351．
［9］ Jung YD，Kim MS，Shin BA，et al． EGCG，a major component of green
MDR 逆转剂，证实了茶多酚复合体对 SW1116 / DOX 细胞株的抗
tea，inhibits tumour growth by inhibiting VEGF induction in human co-
结直肠癌是目前导致人死亡的主要恶性肿瘤之一，其发病率 占所有肿瘤的第 3 位，而且其发病率呈逐渐上升的趋势。结直肠 癌的治疗是以手术为主的综合治疗，尽管近年来在结直肠癌治疗 方面取得了重要的进展，但是结直肠癌的 5 年生存率仍然徘徊在 50% 左右［1］，因此探索结直肠癌治疗的新途径是结直肠癌研究 中非常重要的课题。
茶多酚可能通过抑制基质金属蛋白酶 － 9（ Matrix metalloproteinase 9，MMP － 9） 发挥抑制结直肠癌转移的作用。MMP － 9 是 一种与肿瘤的转移密切相关的物质，在肿瘤细胞的浸润和转移中 发挥了重要的作用。MMP － 9 具有降解细胞外基质主要成分Ⅳ 型胶原，从而降 解 基 底 膜，导 致 肿 瘤 细 胞 的 浸 润 和 转 移 的 功 能。 高表达 MMP － 9 的肿瘤细胞在浸润和转移过程中突破各种屏障 的能力较高，具有转移倾向的癌细胞可自身合成或诱导其他细胞 大量分泌 MMP － 9，从而破坏基底膜完整性，导致癌细胞向其他 部位转移。国内外的研究均表明，MMP － 9 的基因与蛋白表达水 平与结肠癌的临床分期、淋巴结而转移及肿瘤浸润深度等密切相 关归［10，11］。张淳等［12］ 应用 RT － PCR 法 和 Western blot 法 检 测 EGCG 干预前后 HT － 29 结肠癌细胞中 MMP － 9 mRNA 及 MMP － 9 蛋白表达。结果显示 EGCG 在 25，50，100 μg / ml 作用于结肠 癌 HT － 29 细胞株 48 h 后，MMP － 9 mRNA 及 MMP － 9 蛋白的表 达量随 着 EGCG 浓 度 的 增 加 而 下 降，结 果 有 统 计 学 差 异 （ P ＜ 0． 05） 。EGCG 可显著抑制 HT － 29 细胞中 MMP － 9 mRNA 及 MMP － 9 蛋白的表达，呈剂量依赖性，提示了 EGCG 可能有抑 制结直肠癌转移的作用。 4 抑制肿瘤相关蛋白的活性
多药性具有逆转作用，并建立了裸鼠 SW1116 / DOX 移植癌模型，
lon carcinoma cells［J］． The British Journal of Cancer，2001，84 （ 6 ） ：
lence － Nrf2 － B 质粒转染可显著抑制 Nrf2 基因的表达，在 Caco －
1094．
2 及 HT － 29 细 胞 中 抑 制 率 分 别 为 （ 81． 46% ± 1． 68% ） 及 ［5］ 谭晓华，周殿元，张亚历，等． 儿茶素对 LoVo 细胞生长周期的影响
（ 84． 72% ± 2． 08% ） ； 稳定筛选建立的 Nrf2 低表达的细胞系 Caco
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时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 3 期
1R 的活化，降低 IGF － 1 蛋白，升高 IGFBP － 3 蛋白。
京： 人民卫生出版社，2009： 763．
对于结直肠癌的预防和治疗是一个新的方向。该文综述茶多酚对结直肠癌作用机理的一些研究进展。
关键词： 茶多酚； 结直肠癌； 化学预防 DOI 标识： doi： 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 03． 087 中图分类号： R284． 2 文献标识码： B 文章编号： 1008-0805（ 2011） 03-0704-02
［J］． Am J Clin Nutr，2005，81： 223S．
及 HT － 29 细胞后，Nrf2、UGT1A、1A8、1A10 表达升高 1． 8 倍 ～ ［3］ Yang CS，Lambert JD，Sang S． Antioxidative and anti － carcinogenic ac-
杨晓云等［14］应用茶多酚的主要成分 EGCG，分别作用 Caco ［2］ Cheynier V． PolyBiblioteka Baiduhenols in foods are more complex than often thought
－ 2 及 HT － 29 结肠癌细胞 12 h。实验发现 EGCG 作用 Caco － 2
收稿日期： 2010-05-21； 修订日期： 2010-06-30 基金项目： 国家自然科学基金（ No． 30973837） 作者简介： 王水明（ 1985-） ，男（ 汉族） ，江苏南通人，现为南京中医药大学 硕士研究生，学士学位，主要从事结直肠肿瘤中西医结合治疗研究工作． * 通讯作者简介： 金黑鹰（ 1970-） ，男（ 汉族） ，甘肃庄浪人，现任南京中医 药大学第三附属医院副主任医师，博士学位，主要从事肛肠外科中西医结 合治疗研究工作．
茶多酚可以通过影响肿瘤细胞的生长周期，使肿瘤细胞生长 阻滞在某一生长 周 期，从 而 抑 制 肿 瘤 细 胞 的 增 殖。 谭 晓 华 等［5］ 观察了茶多酚的 4 种成分 EGCG，EGC，ECG 和 EC 分别对结直肠 癌 Lovo 细胞生长周期的影响，发现 EGCG，EGC 和 ECG 可引起 Lovo 细胞生长阻滞在 G1 期，而 EC 则主要使 Lovo 细胞生长阻滞 在 S 期。在这 4 种成分诱导 Lovo 细胞凋亡时，EGCG 和 EGC 既 可引起 Lovo 细胞生长在阻滞 G1 期，又能诱导其凋亡； 而 ECG 只 使 Lovo 细胞生长阻滞在 G1 期，却不能诱导凋亡； 而 EC 则使 Lovo 细胞生长阻滞在 S 期。S 期和 M / G2 期分别为 DNA 合成期和合 成后期，与细胞的分裂、增殖有明显的关系。S 期和 M / G2 期的 比例高说明细胞分裂增殖旺盛。EGCG 和 EGC 可能正是通过降 低 S 期和 M / G2 期的比例使细胞阻滞在 G1 期而抑制 Lovo 细胞 的分裂和增殖。刘秀芳等［6］在用茶多酚处理 hMSH2 缺失结肠癌 细胞株 Lovo 细胞和错配修复基因正常的结肠癌细胞株 SW480 细胞后，采用 MTT 法观察细胞的增殖情况。也发现茶多酚对这 两种结肠癌细胞株都有抑制作用，且对 Lovo 细胞的抑制作用明 显高于对 SW480 细胞作用，特别在 50 mg / L 的浓度即达到 80% 左右的抑制率，而且其效果不随浓度的升高而升高。
9． 2 倍（ 均 P ＜ 0． 05） ，免疫细胞化学及激光共聚焦显微镜检测到
tivities of tea polyphenols［J］． Arch Toxicol，2009，83（ 1） ： 11．
Nrf2 蛋白向细胞核内聚集。构建的 RNA 干扰真核表达载体 pSi-
［4］
张 凤，杨桂文，张福淼，等． 绿茶提取物及表没食子儿茶素没食子 酸酯对免疫 细 胞 的 作 用 研 究［J］． 时 珍 国 医 国 药，2009，20 （ 5 ） ：
2 诱导肿瘤细胞凋亡，抗肿瘤血管生成 正常情况下，细胞凋亡是维持机体细胞增殖与死亡之间平衡
的重要过程。细胞凋亡调控的失调是导致肿瘤形成的一个重要 因素［7］。诱导肿瘤细胞凋亡是抗肿瘤生长的主要途径之一。朱 月蓉等［8］在体外用不同浓度的茶多酚诱导结肠癌 SW － 480 细胞 株，发现各种浓度的茶多酚均能诱导结肠癌细胞凋亡，并且在浓 度 350 mg / L，诱导时间 4 h 时效果最为明显。除了直接诱导肿瘤 细胞凋亡，茶多酚还能有效的抑制肿瘤细胞的血供，抗肿瘤血管 的生成。血管内皮生长因子（ VEGF） 在结直肠癌中与新生血管 的诱导和维持关系密切。Jung 等［9］用 EGCG 处理去血清的人结 肠癌 HT － 29 细胞株和裸鼠 HT － 29 细胞株，观察到 EGCG 能够 通过阻滞胞质蛋白 Erk － 1 和 Erk － 2 的激活，抑制 VEGF 的表达 来抗肿瘤新生血管的生成，从而产生抑制肿瘤的作用。 3 抑制肿瘤转移
和诱导凋亡的作用［J］． 中华预防医学杂志，2000，34（ 6） ： 333．
－ 2 － siNrf2、HT － 29 － siNrf2，不仅基础 UGT1A 酶的表达水平降 ［6］ 刘秀芳，金黑鹰，丁义江，等． 抗突变中药对错配修复基因缺失结直
低，而且 EGCG 作用后酶诱导表达的作用消失。
肠癌细胞的抑制作用［J］． 世界华人消化杂志，2007，15： 2201．
药性，往往同时对其它化学结构和作用机理不同的药物产生交叉 ［8］ 朱月蓉，邱 红，刘军权，等． 茶多酚对人 γδT 淋巴细胞和结肠癌细
抗药性。潘 宏 铭 等［15］ 用 阿 霉 素 （ DOX） 诱 导 人 大 肠 癌 细 胞 株
胞株 SW － 480 的影响［J］． 江苏大学学报（ 医学版） ，2008，18（ 4） ：