第10章弧菌属弧菌属细菌是一大群菌体短小,弯曲弧形的革兰

三、微生物学检查法
霍乱是烈性传染病，对首例病人应快速 、准确作出诊断，并及时作出疫情报告，迅 速采取防治措施，扑灭疫情。流行期间一般 可凭临床症状对大量病人做出诊断。但在条 件许可时仍需进行微生物学检查
1．直接镜检 取米泔水样粪便作悬滴法检查，可见运 动高度活泼的细菌，染色后为 G－ 弧菌，鱼 群状排列 2．分离培养 将粪便或呕吐物接种于 pH8.8-9.0 的碱 性蛋白胨水或琼脂平板上培养。霍乱弧菌 较其他细菌繁殖快，直接取可疑培养物涂 片镜检、做生化反应及血清学凝集试验 3．快速诊断 可用荧光菌球检查法或 SPA 协同凝集试 验检测霍乱弧菌
4、一般治疗用抗生素四环素、红霉素等
二 产气荚膜梭菌
产气荚膜梭菌在自然界分布广泛，土壤人 和动物肠道中，能引起人和动物多种疾病。其 中A型是人类气性坏疽和食物中毒的主要病原菌
(一) 生物学性状 * G＋粗大杆菌，散在排列。卵圆形芽胞位 于菌体中央或近极端。在机体组织中菌体周围 可形成荚膜，无鞭毛 * 厌氧培养中生长繁殖极快，8min可分裂1 次，最适温度45℃。在牛乳培养基中生长，分 解乳糖产酸，可凝固酪蛋白，发酵糖类产生酸 和大量气体，将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状，把 培养基表层的凡士林向上推开，称为汹涌发酵 试验，可用作快速诊断
(三) 微生物学检查法 破伤风的临床诊断主要结合创伤史和观察 特有的体征。微生物学检查对早期诊断意义不 大，一般不做。必要时可取伤口渗出物或坏死 组织涂片染色镜检及厌氧菌培养，并以培养物 滤液做动物试验，以确定有无毒素产生
(四) 1、正确处理创口及清创扩创 2、人工自动免疫 注射精制破伤风类毒素 一般第一年内注射 2 次作基础免疫。 1 年后加强免疫 1 次。以后每 隔 5-10 年加强免疫 1 次。对于这种严格按程序 免疫的个体如有外伤并污染严重时可注射类毒 素，几天内便可迅速产生抗毒素。 对满3-6个月岁儿童可采用白-百-破(DPT)3 联疫苗，3、4、5、个月共接种 3次，2、7岁各 加强一次， 可同时获得白喉、百日咳、破伤 风3种常见病的免疫力
第二节 副溶血性弧菌
副溶血性弧菌是一种嗜盐性细菌，存 在于近海岸的海水和鱼、贝类海产品中，具 有致病性的菌株能引起人类食物中毒，是我 国沿海地区最常见的一种食物中毒
1 、 G－ 菌，常呈弧状、杆状、丝状 等多形性，菌体一端有单鞭毛，营养要 求不高，故在外界可长期生存。本菌特 点嗜盐，在含 3.5%-4.5%NaCl 的培养基中 最易生长，在无盐蛋白胨水中生长很差， 甚至不生长。生长的pH范围是7.0-9.5， 最适pH为7.7
第10章 弧 菌 属
弧菌属细菌是一大群菌体短小，弯曲弧形 的革兰阴性菌。菌体一端有单鞭毛，运动活泼， 无芽胞，需氧或兼性厌氧，生长于碱性培养基 上。本菌属共有100余种细菌，广泛分布于自然 界中，以水中最多。其中对人类有致病性的主 要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌。霍乱弧菌是本 属的模式种细菌
第1节 霍乱弧菌
3、人工被动免疫 (1)紧急预防 当伤口较深可能混有泥土杂物 时，应作紧急预防，外科手术严格清创十分必要 。肌肉注射Fra Baidu bibliotek1 500-3 000 单位精制破伤风抗毒素 (TAT)。注射前应作皮肤过敏试验，防止发生血 清过敏反应，必要时采取脱敏疗法，国外已制备 人源的破伤风抗毒素，
(3) 特异治疗 对破伤风患者应早期足量用 TAT治疗。因毒素一旦与神经细胞结合抗毒素 就不能中和毒性作用,剂量为10-20万单位（包 括静注、肌注和伤口局部注射）
4、诊断取粪便、肛拭或剩余食物，直接 分离培养与SS琼脂平板或嗜盐选择平板。然后 进行生化反应和血清学诊断也可用基因探针及 PCR快速诊断 治疗可用抗菌药物，如庆大霉素，或复方 SMZ-TMP，严重病例需给补充水和电解质
第11章 厌 氧 性 细 菌
厌氧性细菌是一大群种类繁多、专性厌氧， 必须在无氧环境中才能生长的细菌。厌氧菌广 泛分布于自然界和人及动物的体内。目前可将 厌氧菌分两大类：厌氧芽孢的梭菌属和无芽孢 厌氧菌
2、生化反应 该菌能发酵甘露醇及蔗 糖，缓慢发酵乳糖，产酸不产气，形成靛 基质，还原硝酸盐为亚硝酸盐，氧化酶阳 性、过氧化氢酶阳性，霍乱红反应阳性， 不同生物型霍乱弧菌生化反应不同，鉴别 可通过生化反应（古典生物型对多粘菌素B 敏感，能被Ⅳ型噬菌体裂解，鸡红细胞凝 集试验阴性，而ELTor生物型则相反）
霍乱弧菌形态
(二) 培养与生化反应 1 、培养 该菌营养要求不高，需氧或 兼性厌氧；耐碱不耐酸，在 pH8.8-9.0 的碱 性环境中生长迅速。因其他细菌在此高 pH 培养基中不易生长，故常用 pH8.4 的碱性蛋 白胨水作为选择培养基。在碱性琼脂平板 上培养 24h，形成圆形、透明或半透明、表 面光滑无色扁平的菌落。
(二) 所致疾病
自然情况下，人类是霍乱弧菌的唯一易 感者。摄入108-1010个细菌可造成感染，引起 霍乱，传染源为患者及带菌者，通过污染的 水源或食物经口摄入
霍乱弧菌的发病过程
细菌 细口 受 体 小肠粘膜上皮细胞 菌 腺甘环化酶 细 菌 ( ATP cAMP 二 促进细胞内一系 ) 列反应 所 肠分秘功能加强 致 疾 肠液分泌增加 病 103-105多至108致病，潜伏期1d左右 细菌少至 自
一、破伤风梭菌 破伤风梭菌(C.tetani)是破伤风的病原菌， 广泛存在于自然界的土壤及动物的粪便中。 当创口被污染，或分娩接生时使用不洁器械 剪脐带时，破伤风梭菌或芽胞可侵入伤口并 生长繁殖，释放外毒素，引起破伤风
(一) 生物学性状 G＋ 专性厌氧，菌体细长，周身鞭毛。芽 胞圆形位于菌体的顶端 ,宽于菌体的直径，使 细菌呈鼓槌状 37℃培养48h以后,在固体培养基上形成不 规则菌落。能产生溶血素，一般不发酵糖类。 繁殖体的抵抗力与一般细菌相似 , 但芽胞抵 抗力很强,煮沸1h完全破坏,5%石炭酸经15h才 能杀灭,芽胞在土壤中可存活数十年
霍乱弧菌是引起烈性传染病霍乱的病原体 ，曾在世界上引起多次大流行，死亡率甚高， 属于国际检疫传染病
一、生物学性状 (一) 形态与染色 新从病人分离出的菌株形态较典型，呈 弧形或逗点状，人工培养后，常呈杆状而不 易与肠道杆菌区别。该菌无荚膜，无芽胞， 菌体一端有一根较长的鞭毛，运动活泼。 细菌有周身菌毛，取病人的米泔水样粪便直 接涂片染色镜检，可见细菌相互排列如“鱼 群”状；悬滴观察，可见细菌呈穿梭运动
（3） 破伤风的发病机制 在于破伤风痉挛毒素对脑干神经和脊髓前 角细胞有高度亲合力。毒素可由末梢神经沿轴 索从神经纤维的间隙逆行向上，到达脊髓前角， 并可上行到达脑干。除神经途径外，毒素也可 通过淋巴液和血液到达中枢神经系统。毒素通 过重链与脊髓及脑干组织细胞表面的神经节苷 脂结合。毒素进入细胞后，通过轻链的毒性作 用封闭抑制性突触的介质释放 ,导致骨骼肌强 直性痉挛,引起一系列症状.
分型 根据产气荚膜梭菌的 4 种主要毒素产 生情况可将其分为 A、B、C、D、E 5 个毒素型， 对人致病的主要为A型，A型属人和动物肠道正 常菌群
2.肠毒素(CT) 是致腹泻中最强烈的毒素是肠毒素的代表 CT 由 1 个 A 亚单位和 5 个 B 亚单位以共价键形 式结合。 A 亚单位为 CT 的毒性活性部分。 B 亚单 位可与小肠粘膜上皮细胞膜受体 ( 神经节苷脂 GMI)结合，结合后使A亚单位的A1多肽穿过细胞 ，刺激细胞内的腺苷酸环化酶的活性，使ATP转 化为 cAMP，于是细胞内 cAMP 浓度升高，肠液分 泌增加，产生严重的腹泻和呕吐
(三)抗原结构与分型 H 抗原 特异性低，为弧菌属所共有， H 抗体无保护作用 O抗原 特异性高，根据O抗原不同，可将 霍乱弧菌分为139个血清群 根据表型差异，O1血清群霍乱弧菌的每一 个血清型分两个生物型 ，即古典生物型 与 EI Tor 生物型 。前者为20世纪前6次霍乱大 流行的病原体；后者为 1905年在埃及西奈半 岛EI Tor地区发现而命名，是第7次霍乱大流 行的病原体。根据O抗原成分不同O1群霍乱弧 菌又分为3个血清型：原型（稻叶型）、异型 （小川型）、中间型（彦岛型）
四、防治原则 加强检疫，及时检出病人，尽早隔离治 疗，对患者及带菌者的粪便及呕吐物要进行 消毒处理， 皮下接种死菌苗，可增强人群的特异性免 疫力，但保护率仅为 50%左右，血清抗体持续 时间较短，仅为3-6个月 此外，B亚单位-全菌灭活口服疫苗、基因 工程疫减毒活疫苗某些国家已批准使用 治疗 补充液体和电解质，应用抗生素缩 短排菌期，常用的抗生素有链霉素、氯霉素 、庆大霉素、复方SMZ等
2 、绝大多数致病性副溶血性弧菌能产 生溶血毒素使人或家兔的红细胞溶解。其溶 血能力与该菌的致病力呈平行关系，而大多 数非致病性菌株则无此毒素。该毒素也具有 肠道毒性
3、副溶血性弧菌引起的食物中毒 经海产品及盐淹渍品传播，常见的为海 蜇、蟹类、鱼、毛蚶等。食用被污染的食 品后，经6-24h潜伏期后发病 主要症状是腹痛、腹泻，呕吐及发热， 粪便为水样或糊状，少数有血水样便或粘 液血便。多发于夏秋季，病程较短，一般 恢复较快 病后免疫力不强，可重复感染，治疗可 用抗菌药物，如庆大霉素或复方SMZ等
临床表现
病人产生严重的呕吐、腹泻。腹泻物呈米 泔水样。由于体内水和电解质大量丧失，临床 呈现严重的脱水、电解质紊乱和代谢性酸中 毒 .。病人可因肾功能衰竭、休克而死亡。病 后绝大多数患者可短期带菌，一般不超过2w。 EI Tor弧菌感染者，带菌时间可达数月
霍乱病人脱水貌—眼窝深陷、皮肤弹性消失
(三) 免疫性 霍乱弧菌感染后可获得牢固的免疫力，很 少再次感染，此种病后免疫力包括血流中抗 肠 毒 素 抗 体 ( IgM 和 IgG) 及 局 部 抗 菌 抗 体 (sIgA)。血清抗体一般在 7-14d滴度达高峰， 随后渐降，一般可持续3个月左右。肠道sIgA 可阻止弧菌的粘附，并抑制细菌的侵袭和产 生毒素。肠毒素抗体可阻断肠毒素与小肠上 皮细胞上的GM1受体结合。各群之间无交叉免 疫
（四）抵抗力 霍乱弧菌对热及消毒剂抵抗力弱， 55 ℃湿 热 15min即死亡。对酸的抵抗力更弱，在正常 胃酸中仅能存活4min。在河水中能存活1-3w。 对氯敏感，用漂白粉处理患者排泄物可达到消 毒目的。El Tor生物型比古典生物型的抵抗力 强
二、致病性和免疫性 (一) 致病物质 霍乱弧菌的致病作用主要是由细菌的 1.粘附作用 霍乱弧菌进入小肠后依靠活泼的鞭毛 运动，穿过肠粘膜表面的粘液层，通过普 通菌毛粘附于肠壁上皮细胞刷状缘的微绒 毛上
破伤风梭菌 伤口 毒素 脊髓 前脚和中枢 阻止抑制性神经介质释放 肌肉强直性痉挛
症状:早期 流口水、出汗、激动、有的心率不齐、 血压波动 典型症状 出现牙关紧闭、苦笑面容、角弓 反张，甚至膈机肌痉挛、呼吸困难窒 息而死亡
破伤风的临床表现
2．免疫性 破伤风免疫是典型的抗毒素免疫。每毫升 血清中抗毒素含量达0.01-0.1单位时即有保 护作用。但由于破伤风毒素毒性极强，微量 毒素即可致病，而此量却不足以引起免疫， 并且毒素迅速与神经组织牢固结合，不能有 效地刺激免疫系统引起免疫应答。所以有效 地获得抗毒素的途径是通过类毒素的预防注 射而获得的自动免疫，或通过注入大剂量抗 毒素而获得的被动免疫，病后不能获的牢固 的免疫力
（二） 致病性与免疫性 1．致病性 （1）致病条件：伤口的厌氧微环境是细 菌生长繁殖的重要条件
厌氧伤口的条件
伤口窄、而深 混有泥土.异物或异物 局部 坏死组织较多伴 有需菌混合感染
（2）.破伤风梭菌致病物质 破伤风痉挛毒素, 蛋白质，MW15万dal，不 耐热，可被肠道蛋白酶破坏。 该毒素由两条肽链借二硫键联结而成。从菌 体内释出后，即被细菌蛋白酶作用而切割成α 轻链(5万)和β重链(10万)。β重链能与神经节 苷脂结合；α轻链具有毒性作用。 破伤风痉挛毒素由细菌质粒编码产生 ,毒 性极强，每毫克纯化的结晶可杀死2000万只小 鼠。该毒素具有免疫原性，可脱毒成为类毒素