半抗原和蛋白质偶联技术课件
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其次，载体应具备一定的容量，可以 偶联足够的分子；
载体还应该是惰性的，不应干扰偶联 分子的功能；
而且载体应具有足够的稳定性，且应 该是廉价易得的。
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人工抗原合成方法
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腺病毒 口蹄疫病毒
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常见的其他天然抗原
真菌
白色念珠菌 (1,000X oil) 疟原虫
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常见的其他天然抗原
异种动物血清 异嗜性抗原 血型抗原 主要组织相容性抗原 肿瘤抗原 超抗原
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抗原的性质
1.免疫原性： 抗原刺激机体产生特异性免疫应答，
诱生相应抗体和效应淋巴细胞的能力。 2.抗原性:
抗原可在体内、外与相应的抗体/效应 淋巴细胞发生特异性结合，产生免疫应答 的特性。
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常见的偶联蛋白
常用来作为合成人工抗原的载体蛋白质有： 牛血清白蛋白(BSA)、 卵清蛋白(OA)、 钥孔血蓝蛋白(KLH)、 人血清白蛋白(HSA) 人工合成的多聚赖氨酸(PLL)等。
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常见的偶联蛋白
牛血清白蛋白（BSA）
包含583个氨基酸残基， 分子量为66.43kDa， 等电点为4.7。
BSA结构
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常见的偶联蛋白
卵清蛋ovalbvmin
是一种糖蛋白。 含有微量的磷。
是卵清中蛋白质 的主要成分，约 占65％。
鸡的卵清蛋白分 子量约45kDa。
抗原
——能与淋巴细胞抗原受体（TCR/BCR） 特异性结合，刺激机体产生特异性免疫应 答，并与相应免疫应答产物（指抗体或致 敏淋巴细胞）在体内、外发生特异性结合 反应的物质。
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抗原的分类
天然抗原 如：细菌、病毒、真菌、寄生虫等。
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常见的偶联蛋白
人血清白蛋白 （简称HSA），是 人血浆中的蛋白 质，其非糖基化 的单链多肽包含 585个氨基酸，分 子量为66kD。在 血浆中其浓度为 42g/L，约占血浆 总蛋白的60%。
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半抗原+载体 完全抗原
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半抗原 载体
完全抗原Βιβλιοθήκη Baidu
+
B B
B
BT T
抗体
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常见的偶联蛋白
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常见的偶联蛋白
ε-多聚赖氨酸是 目前天然防腐剂中 具有优良防腐性能 的微生物类食品防 腐剂。它是由25～ 30赖氨酸残基聚合 而成，具有强烈的 抑菌能力，可以作 为防腐剂用于食品 的保鲜。
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偶联蛋白的性质
载体表面应首先应具有化学活性基团， 这些基团可以直接与抗生素或农药分子偶 联，这是化学偶联制备抗原的前提；
a.牛血清白蛋白 b.磷酸酪氨酸血清白蛋白 c.卵清蛋白 d.磷酸酪氨酸卵清蛋白
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常见的偶联蛋白
钥孔血蓝蛋白(KLH) 由于KLH质量大，
复杂性高，与其他载 体蛋白相比KLH会引起 更强的免疫应答。
来源于软体动物， 它在系统发生上远离 哺乳动物物种，在测 定过程中产生会与典 型靶点样品发生交叉 反应的抗体的可能性 较小。
人工抗原
人工合成抗原 ——用化学方法将活化氨基酸聚合，
使之成为合成多肽。（应用这种人工合成 多肽可研究氨基酸种类、序列与蛋白质抗 原性及免疫原性的关系。）
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人工抗原
基因工程抗原 ——通过基因重组、再表达制备的抗原物质。
如：目的基因（编码抗原）+ 载体（质粒等） 重组DNA 细胞（真核或原核） 表 达 纯化 基因工程疫苗
人工抗原 如：人工结合抗原、人工合成抗原、 基因工程抗原
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常见的天然抗原-细菌
链球菌
痢疾杆菌
伤寒杆菌
霍乱弧菌
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常见的天然抗原-病毒
流感病毒 狂犬病病毒
抗原（按照免疫原性及免疫反应性）分类
1、完全抗原 : 既有免疫原性又有抗原性的 物质，如多数蛋白质分子。
2、半抗原:又称不完全抗原，单独存在时只 具有抗原性而无免疫原性的物质，如二硝 基酚、青霉素。
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完全抗原
半抗原与载体结合后可使其具有免疫原性。
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人工抗原
人工结合抗原 ——将无免疫原性的简单化学基团与
蛋白质载体偶联，或将无免疫原性的有机 分子与蛋白质载体结合，形成载体-半抗原 结合物，均属人工结合抗原。
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目录
抗原与半抗原 偶联蛋白 人工抗原合成的方法 影响人工抗原质量的因素 人工抗原的质量评定
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抗原与半抗原
抗原
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而且载体应具有足够的稳定性，且应 该是廉价易得的。
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人工抗原合成方法
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腺病毒 口蹄疫病毒
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常见的其他天然抗原
真菌
白色念珠菌 (1,000X oil) 疟原虫
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常见的其他天然抗原
异种动物血清 异嗜性抗原 血型抗原 主要组织相容性抗原 肿瘤抗原 超抗原
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抗原的性质
1.免疫原性： 抗原刺激机体产生特异性免疫应答，
诱生相应抗体和效应淋巴细胞的能力。 2.抗原性:
抗原可在体内、外与相应的抗体/效应 淋巴细胞发生特异性结合，产生免疫应答 的特性。
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常见的偶联蛋白
常用来作为合成人工抗原的载体蛋白质有： 牛血清白蛋白(BSA)、 卵清蛋白(OA)、 钥孔血蓝蛋白(KLH)、 人血清白蛋白(HSA) 人工合成的多聚赖氨酸(PLL)等。
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常见的偶联蛋白
牛血清白蛋白（BSA）
包含583个氨基酸残基， 分子量为66.43kDa， 等电点为4.7。
BSA结构
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常见的偶联蛋白
卵清蛋ovalbvmin
是一种糖蛋白。 含有微量的磷。
是卵清中蛋白质 的主要成分，约 占65％。
鸡的卵清蛋白分 子量约45kDa。
抗原
——能与淋巴细胞抗原受体（TCR/BCR） 特异性结合，刺激机体产生特异性免疫应 答，并与相应免疫应答产物（指抗体或致 敏淋巴细胞）在体内、外发生特异性结合 反应的物质。
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抗原的分类
天然抗原 如：细菌、病毒、真菌、寄生虫等。
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常见的偶联蛋白
人血清白蛋白 （简称HSA），是 人血浆中的蛋白 质，其非糖基化 的单链多肽包含 585个氨基酸，分 子量为66kD。在 血浆中其浓度为 42g/L，约占血浆 总蛋白的60%。
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半抗原+载体 完全抗原
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半抗原 载体
完全抗原Βιβλιοθήκη Baidu
+
B B
B
BT T
抗体
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常见的偶联蛋白
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常见的偶联蛋白
ε-多聚赖氨酸是 目前天然防腐剂中 具有优良防腐性能 的微生物类食品防 腐剂。它是由25～ 30赖氨酸残基聚合 而成，具有强烈的 抑菌能力，可以作 为防腐剂用于食品 的保鲜。
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偶联蛋白的性质
载体表面应首先应具有化学活性基团， 这些基团可以直接与抗生素或农药分子偶 联，这是化学偶联制备抗原的前提；
a.牛血清白蛋白 b.磷酸酪氨酸血清白蛋白 c.卵清蛋白 d.磷酸酪氨酸卵清蛋白
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常见的偶联蛋白
钥孔血蓝蛋白(KLH) 由于KLH质量大，
复杂性高，与其他载 体蛋白相比KLH会引起 更强的免疫应答。
来源于软体动物， 它在系统发生上远离 哺乳动物物种，在测 定过程中产生会与典 型靶点样品发生交叉 反应的抗体的可能性 较小。
人工抗原
人工合成抗原 ——用化学方法将活化氨基酸聚合，
使之成为合成多肽。（应用这种人工合成 多肽可研究氨基酸种类、序列与蛋白质抗 原性及免疫原性的关系。）
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人工抗原
基因工程抗原 ——通过基因重组、再表达制备的抗原物质。
如：目的基因（编码抗原）+ 载体（质粒等） 重组DNA 细胞（真核或原核） 表 达 纯化 基因工程疫苗
人工抗原 如：人工结合抗原、人工合成抗原、 基因工程抗原
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常见的天然抗原-细菌
链球菌
痢疾杆菌
伤寒杆菌
霍乱弧菌
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常见的天然抗原-病毒
流感病毒 狂犬病病毒
抗原（按照免疫原性及免疫反应性）分类
1、完全抗原 : 既有免疫原性又有抗原性的 物质，如多数蛋白质分子。
2、半抗原:又称不完全抗原，单独存在时只 具有抗原性而无免疫原性的物质，如二硝 基酚、青霉素。
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完全抗原
半抗原与载体结合后可使其具有免疫原性。
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人工抗原
人工结合抗原 ——将无免疫原性的简单化学基团与
蛋白质载体偶联，或将无免疫原性的有机 分子与蛋白质载体结合，形成载体-半抗原 结合物，均属人工结合抗原。
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抗原与半抗原 偶联蛋白 人工抗原合成的方法 影响人工抗原质量的因素 人工抗原的质量评定
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抗原与半抗原
抗原
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