实验六 蛋白质的透析

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三.装样 取一段透析袋,将其一端用透析袋夹 (或打一死结),由开口端加入约5ml待 透析的样品溶液,用透析袋夹住袋口 (或打一死结)。
四.透析 取一大烧杯,加入10倍以上样品体积 的去离子水或缓冲液,将装好样品的透 析袋悬于大烧杯中部,底部放一搅拌子 (磁棒),用磁力搅拌器搅拌促进溶液 交换。透析过程中需要更换洗脱溶液数 次(约30min一次),至达到透析平衡为 止(洗出液中无Cl-),约需2h.
五.检查透析效果 每次更换洗脱溶液时,同时检查洗出 液中是否有Cl-。检查方法为:取试管1支, 加入洗出液约2ml,加10%HNO3溶液 1~2滴至酸性,然后加1%AgNO32~3滴, 观察是否有白色沉淀。 实验结果:1、记录换水的次数和每次透析的时间 并计算出总的透析时间。 2、记录每次的检测结果。
实验六
蛋白质的透析
原理: 透析膜是半透膜,蛋白质是大分子物质, 它不能透过透析膜,而小分子物质可以 自由通过透析膜与周围的缓冲溶液进行 溶质交换,进入到透析液中。
一.蛋白质的检查 取待透析的蛋白质溶液,用源自文库gNO3溶 液检测,可观察到白沉淀。
二.准备透析袋 用10mmol/LNaHCO3-1mmol/LEDTANa2溶液煮沸30min,然后用双蒸水充分 洗涤透析袋,贮存于1mmol/LEDTA-Na2 溶液中,40C保存备用。
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