糖类物质分析测定

2012-12-25
9
（5）水果及其制品的提取掖应控制在中性。 因为水果中含有有机酸，在酸性条件下 加热会发生水解。 (6)为避免糖类被酶水解的现象发生，可加 入氯化汞。
2012-12-25
10
2．提取液的澄清
提取液除含有可溶性糖类外，还不同程度地 含有一些影响分析检测的杂质，如色素、蛋白 质、果胶、淀粉、有机酸、氨基酸、单宁等， 这些物质的存在常会使提取液带有颜色，或呈 现混浊，影响测定终点的观察；也可能在测定 过程中与被测成分或分析试剂发生化学反应， 影响分析结果的准确性；胶态杂质的存在还会 给过滤操作带来困难，因此必须把这些干扰物 质除去。常用的方法是加入澄清剂沉淀这些干 扰物质。
2012-12-25 17
(3)澄清剂的用量
通常避免使用过量的澄清剂。用量太 少，固然达不到澄清的目的，但用量太 多，则会使分析结果产生误差。另外， 不同的样品溶液因于扰物质的种类和含 量不同，所需加入澄清剂的量也不同。
2012-12-25
18

中性乙酸铅作为澄清剂 一般先向样品溶液中加入1—3m1乙酸铅饱 和溶液(约30％)，充分混合后静臵15min，向 上层清波中加入几滴中性乙酸铅溶液，上层清 液中没有新的沉淀形成，说明杂质已沉淀完全， 如有新的沉淀形成，就再混匀并静臵几分钟， 如此重复直至无沉淀形成为止。也可以用20％ 中性乙酸铅溶液。
糖类的定量测定有物理方法和化学方法 等多种。 物理方法又有折光法、旋光法、比重法 等。 化学方法主要利用还原糖的还原性， 用氧化还原法和比色法进行测定，应用较 普遍的有廉—爱农法、高锰酸钾容量法、 碘量法等。容量分析法目前仍是糖类测定 中普遍应用的方法。 还原糖的测定是测定的重点。 2012-12-25 3
2012-12-25
15
此外，可作为可溶性糖类提取液的澄清剂的还 有碱性乙酸铅、氢氧化铝溶液和活性炭。但碱 性乙酸铅与杂质作用生成体积甚大的沉淀，可 带走还原糖，特别是果糖，而且，过量的碱性 乙酸铅可因其碱度及铅糖的形成而改变糖类的 旋光性；氢氧化铝溶液只能除去胶态杂质，澄 清效果差；活性炭吸附能力较强，能吸附糖类 造成损失。这些缺点限制了它们在糖类分析上 的应用。
13
2012-12-25

乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液：它是利 用乙酸锌与亚铁氰化钾反应生成的亚铁 氰酸锌沉淀来挟走或吸附干扰物质。这 种澄清剂除蛋白质能力强，但脱色能力 差，适用于色泽较浅，蛋白质含量较高 的样液的澄清，如乳制品、豆制品等。
2012-12-25
14

硫酸铜和氢氧化钠溶液： 一般是用硫酸 铜溶液和氢氧化钠溶液组成的混合液进 行澄清，在碱性条件下，铜离子可使蛋 白质沉淀，适合于富含蛋白质的样品的 澄清。
2012-12-25
5
(1)含脂肪的原料
通常需鲜脱脂后再以水进行提取。一般 以石油醚处理一次或几次，必要时可加 热；每次处理后，倾去石油醚层(如分层 不好，可以进行离心分离)，然后用水提 取。
2012-12-25
6
（2）含有大量淀粉和糊精
通常使用70％一75％的乙醇溶液进行提取。因为 单独用水提取，会使样品中部分淀粉和糊精溶出 或吸水膨胀，影响分析测定，同时过滤也困难。 操作时，要求乙醇溶液的浓度应高到足以使淀粉 和糊精沉淀，若样品合水量较高，混合后的最终 浓度应控制在上述范围内。提取时，可加热回流， 然后冷却并离心，倾出上清液，如此提取2—3次， 合并提取液，蒸发除去乙醇。 在70％一75％的乙醇溶液中，蛋白质不会溶解 出来，因此，提取液不含除蛋白质。 2012-12-25 7
2012-12-25 16
澄清剂应根据样品溶液的种类、干扰成分的种 类及含量加以适当的选择，同时还必须考虑到 所采用的分析方法。 如用直接滴定法测定还原糖时不能用硫酸 铜—氢氧化钠溶液澄清样品，以免样品溶液中 引入铜离子； 用高锰酸钾滴定法测定还原糖时，不能用乙 酸锌—亚铁氰化钾溶液澄清样品溶液，以免样 品溶液中引入锌离子。
（3）含乙醇和二氧化碳的液体 样品
通常蒸发至原体积的1／3—1／4，以 除去乙醇和二氧化碳。但若样品为酸件 食品，在加热前应预先用氢氧化钠调节 样品溶液的pH值至中性，以防止低聚糖 在酸性条件下被部分水解。
2012-12-25
8
（4)提取固体样品
可采用加热的方法以提高提取效果， 加热温度一般控制在40一50℃，一般不 超过80℃，温度过高时可溶性多糖会随 之溶出，增加下步澄清工作的负担。用 乙醇做提取剂，加热时应安装回流装臵。
第一节、还原性糖的测定
一、可溶性糖类取和澄清 食品中的可溶性糖通常是指葡萄糖、果 糖及蔗糖。测定可溶性糖时一般须选择 适当的溶剂提取，并对提取液进行纯化， 排除干扰物质，然后才能测定。
2012-12-25
4
Fra Baidu bibliotek
1、提取
从样品中提取可溶性糖类常用水和乙 醇溶液做提取剂，制备提取液的方法要 根据样品的性状而定，通常可遵循以下 原则。
第六章、糖类的测定
2012-12-25
1
糖类是微生物的主要碳源。发酵生产中使 用的糖类形式很多，使用最多的单糖是葡萄 糖和果糖，是含有六个碳原子的多羟基醛或 多羟基酮类，具有还原性。 发酵工业中应用最多的双糖是蔗糖和麦芽 糖，发酵工业中应用最多的糖类原料是淀粉。 糖类的测定在生产中非常重要，通过糖类的 测定可以知道原料中淀粉的含量，了解发酵 过程糖类消耗的情况，以及测定某些成品如 淀粉酶、糖化酶的活力等。 。 2012-12-25 2
2012-12-25 11
(1)对澄清剂的要求
澄清剂的作用是沉淀一些干扰物质 能完全地除去干扰物质。 不吸附或沉淀被测糖分，也不改变被测 糖分的理化性质(如比旋光度等) 过剩的澄清剂应不干扰后面的分析操作， 或易于除掉。
2012-12-25
12
（2）常用的澄清剂

中性乙酸铅：铅离子能与很多离子结合，生成 难溶解的沉淀物，它能除去蛋白质、果胶、有 机酸、单宁等杂质，同时还能吸附除去部分胶 体杂质。不会沉淀样品溶液中的还原糖，在室 温下也不会形成可溶性的铅糖化合物，适用于 测定还原糖样品溶液的澄清。但它的脱色能力 较差，不能用于深色样液的澄清，它适用于植 物性样品、浅色的糖及糖浆制品、果蔬制品、 烘烤制品等。