应用显色培养基检测沙门氏菌的初步研究

应用显色培养基检测沙门氏菌的初步研究

【摘要】目的：利用特异性酶法鉴定致病的特点，建立一种用来检测食物中毒和肠道腹泻中沙门氏菌的显色快速检测方法。方法：将带菌标本增菌后接种沙门氏菌显色培养基（简称“CAS”）。结果：沙门氏菌在CAS平板上呈现特定型的红色菌落，非沙门氏菌呈现无色菌落或蓝色菌落。结论：用CAS选择性平板分离沙门氏菌较易鉴别，不需通过任何仪器，仅通过观察菌落颜色既在24h用肉眼对沙门氏菌进行鉴定，缩短了检验周期，使用方便，提高了检出率。

【关键词】沙门氏菌；沙门氏菌显色培养基；快速检测

沙门氏菌是引起食物中毒和肠道腹泻的病原菌之中一种，是重要的肠道病原菌。目前传统的沙门氏菌检验主要采用传统的生化方法，包括亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液增菌，分离培养，生化鉴定，血清型鉴定等多个步骤，一般过程需要一周时间，操作复杂，已不能满足微生物快速检测的需要，因此使用快速检测准确的沙门氏菌显色培养基来鉴定非常重要。沙门氏菌显色培养基（CAS）是一种新型培养基，它添加了特异的显色底物组合能更加准确检测出样品中含有的沙门氏菌，大大提高了检出率。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1菌株、沙门氏菌、志贺氏菌、大肠杆菌等。标准株和分离株由通化市疾病预防控制中心微生物室提供。

1.1.2培养基及试剂

亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）、GN增菌液、沙门氏、志贺氏琼脂（SS、HE）、肠道增菌液。肠道综合双糖管及肠杆菌科鉴定编码等培养基试剂购自北京陆桥生物技术有限责任公司。沙门氏菌显色培养基（CAS）产自法国科马嘉公司，郑州博骞生物技术研究所分装。沙门氏菌、志贺氏菌、大肠埃希氏菌诊断血清购自兰州生物制品研究所。

以上试剂均在有效期内。

1.2主要仪器设备

生物安全柜、电热恒温培养箱、全自动高压灭菌锅、电子天平、显微镜。

1.3方法除培养基配制和显微镜观察外，其余操作过程均在100—1000级生物洁净室内。

1.3.1菌株检测方法按照GB/T4789—2008中相应操作规程进行。

1.3.2菌株的筛选和鉴定经过初筛在CAS、SS、HE分离平板上挑取相应的疑似菌落接种双糖鉴别生化管，初筛符合者，血清玻片凝集试验和镜检，系统生化鉴别实验。

2结果

显色培养基的特异性

在CAS平板上，沙门氏菌菌落显紫红色，大肠杆菌、宋内志贺氏菌菌落显蓝色。

3讨论

由于肠道门诊中采样及食物采样不规范，培养基的特异性有限等因素影响，使传统的分离方法的灵敏度有所降低。沙门氏菌在CAS显色平板上菌落颜色为较易辨认的紫色，而非沙门氏菌表现为蓝色或灰白色，说明CAS平板的沙门氏菌检出率高于SS、HE平板，而且节省时间，简化了程序。

由此可见，显色培养基是有价值的分离鉴定平板，可以作为传统平板的补充。

4 结论

综上所述CAS平板有易于鉴别，选择性好，它的优势远大于普通培养基的选择性，特别是突发公共卫生事件处理中，和有混合菌的沙门氏菌处理中，CAS 平板是首选的，并能取得较好的结果。将显色培养基与传统检测方法结合对食源泉性致病菌进行快速检验已成为微生物快速检测技术发展的重要方向。

参考文献

［1］何晓青卫生防疫细菌检验北京新华出版社1989