实验四、血球凝集和交叉配血实验

凝集反应的特点
颗粒性抗原 致敏颗粒
（可溶性抗原或抗体与载体颗粒结合）
电解质的存在 肉眼可见的凝集现象
凝集反应的类型
玻片凝集试验：ABO血型 直接凝集试验 试管凝集试验：外斐试验，肥达试验 正向间接凝集试验 反向间接凝集试验 间接凝集抑制试验 协同凝集试验 间接血凝试验 胶乳凝集试验 明胶凝集试验
小。
4、加样方法
兔1红细胞 兔2红细胞 豚鼠1红细胞 豚鼠2红细胞 兔1血清 ◆ ◆ ◆
兔2血清
豚鼠1血清 豚鼠2血清
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实验作业
1、什么叫直接凝集反应，什么叫间接凝集 反应？它们之间有何异同？ 2、交叉配血的结果填入下表。
兔1红细胞 兔1血清 兔2血清 豚鼠1血清 豚鼠2血清 兔2红细胞 豚鼠1红细胞 豚鼠2红细胞
间接凝集试验
实验原理
直接凝集反应： 是颗粒性抗原又称凝集原与相应抗体 直接结合所呈现的凝集现象，如红细胞和细菌凝集试
验。主要有玻片法、试管法。
玻片法为定性试验，方法简便快速，常用已知抗体检
测未知抗原，应用于菌种鉴定，分型及人红细胞ABO
血型测定等； 试管法通常为半定量试验，常用已知抗原检测待检血 清中有无相应抗体及其相对含量，以帮助临床诊断和 分析病情。常有肥达试验，外-斐试验，交叉配血试
普通吸管、尖吸管、1ml刻度吸管 血球凝集板
实验步骤
1、分别制备兔血清、兔红细胞、豚鼠血清、豚鼠红细胞
2、分别制备5％兔红细胞悬液、 5％豚鼠红细胞悬液
3、交叉配血与玻片凝集观察
取血清0.1ml 放于玻片上，取5％红细胞生理盐水
悬液0.1ml ，加于血清中混匀并涂成直径约1cm的圆形，
立即记时3 分钟。观察出现凝集的时间和凝集块的大
验等
血型抗原
K D C
存在于红细胞表面 化学结构： 蛋白质 蛋白质上的糖类抗原 糖蛋白或脂类（糖脂）
A
D
B
K
C
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ABO血型系统
RBC ABO 血型 上的抗原
O A B H A B
血清 中的抗体
Anti-A,B Anti-B Anti-A
基因型
O/O A/A or A/O B/B来自百度文库or B/O
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ABO血型的鉴定方法。
原理 将标准抗A和抗B血型抗体分别与待测红细 胞混合。如果抗原与抗体相对应，则引起红细 胞凝集，反之则不凝集，据其凝集现象可判断 血型。
结果判读： 1、如混合液由均匀红色混浊状逐渐变为透明，
并出现大小不等的红色凝集块者，即为红细胞 凝集； 2、如混合液仍呈均匀混浊状，则为不凝集。 注：肉眼观察难于判定是否凝集，可在显微镜下 用低倍镜观察予以确认。
交叉配血试验
1.交叉配血实验
在输血过程中，要先分别将供血者的RBC与 受血者的血清及供血者的血清与受血者的 RBC进行的配合试验，以免发生溶血。
2.交叉配血实验的意义
（1）检验血型鉴定是否有误。
（2）检验血清中是否有不规则抗体。
3.交叉配血的方法
供血者的红细胞 供血者血清 （主侧） （次侧）
受血者的红细胞 均不凝集：配血相合
实验四 血球凝集反应和交叉配血实验
指导老师：程 燕
实验目的
1、掌握凝集反应和交叉配血实验的原理
2、掌握玻片凝集试验的操作方法，了解其特
点和用途
3、学习玻片凝集试验结果的观察方法
实验原理
凝集反应：
颗粒性抗原(细菌、细胞等)与其特异性抗体[直接凝集] 或是可溶性抗原(亦可用抗体)吸附于与免疫无关的载体 形成致敏颗粒(免疫微球)与相应的抗体(或抗原)[间接 凝集] 在有适量电解质存在下，形成肉眼可见的凝集小块。 注：颗粒性抗原称为凝集原，特异性抗体称为凝集素
AB
A&B
None
A/B
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ABO以外 重要的血型系统及其抗体
P Lewis Duffy Kidd Mur Dia Tja
MNS
Rh
2005年，29个红细胞血型系统274个抗原
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Rh血型系统
• 除ABO外与输血有关的最重要的血型系统之一
• 最重要的五种抗原
C 、 c 、 D 、 E 、e
• 根据D抗原是否存在，一般将Rh系统定义为 Rh阳性：D抗原阳性 Rh阴性：D抗原阴性 （熊猫血型：AB型、 Rh阴性）
受血者血清
主侧凝集：绝对不可以有凝集或溶血现象
主侧不凝，次侧凝集：供血者血清加受血者红细胞在 允许范围内，可以有凝集现象，但不可以有溶血。只 在应激情况下少量缓慢，或使用洗涤RBC。
实验器材
实验动物：豚鼠、兔
实验试剂：血液抗凝剂
（1:500u肝素钠注射液）
实验器材：注射器、 一次性离心管