细胞工程复习资料

细胞工程复习提纲

第一章

1.，细胞工程：以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，

有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种是

一门综合性科学技术。

2，细胞工程的应用：动植物快速繁殖、新品种培育、细胞工程生物制品、细

胞疗法与组织修复。

第二章

1，细胞全能性：指分化细胞保留着全部的核基因组，具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息，具有发育成完整个体的潜能。

2，细胞分化：是指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程，分化也可以说是相同基因型的细胞所具有的各个不同的表现型。

3，细胞分化实质：基因选择性表达的结果；持家基因（Housing-keeping gene）与奢侈基因(Luxury gene).

4，脱分化：在一定营养和刺激因素作用下,具有特定结构与功能的植物组织的细胞被诱导而改变原来的发育途径,逐步失去原来的分化状态,细胞特性消失,

转变为具有分生机能的细胞,并进行活跃的细胞分裂,这一过程称为去分化。

5，再分化定义：离体条件下，无序生长的脱分化细胞在适当条件下重新进入有序生长和分化状态的过程。

实质：基因选择性表达与修饰的人工调控过程。

第三章

1，实验室基本组成：准备室、无菌间、操作间、培养室、分析室

2，细胞保存方法：传代培养保存法、低温冷冻保存法、液体固化方式、玻璃化、,冷冻保护剂、冷冻方法（缓慢、快速、预冷冻法）

第四章

1，细胞培养的操作方式：1、分批式培养2、流加式培养3、半连续式培养

4、连续式培养

5、灌流式培养；

2，分批式培养：特点：1.操作简单、培养周期短；

2.直接反映细胞生长代谢情况；

3.可直接放大；

不足：不能控制底物浓度、细胞易老化、生长周期短、效率低；

3，流加式培养：优点：1、可根据细胞生长速率、营养物消耗情况，保证合

理、充足的营养；

2、可以减少产物反馈抑制，排除有害代谢产物积累带

来的细胞损伤，细胞不易老化；

3、可以避免在分批培养中因一次投料过多造成的底物抑

制等影响，改善培养液流体学性质；

4、可延长指数生长期，从而提高细胞浓度，延长细胞培

养周期，产物浓度较高，同时又能实现连续收获；

4，半连续式培养：特点：1、操作简便，生产效率高；

2、可进行多次收获；

3、细胞可持续指数生长，并可保持产物和细胞在一较

高的浓度水平，培养过程可延续到很长时间；

优点：操作简便，生产效率高，可长时期进行生产，反复收

获产品，可使细胞密度和产品产量一直保持在较高的

水平。

, 5，连续式培养：特点：1、细胞维持持续指数增长；

2、产物体积不断增长；

3、可控制衰退期与下降期；

不足：1、由于是开放式操作，加上培养周期较长，容易造成污

染；

2、在长周期的连续培养中，细胞的生长特性以及分泌产

物容易变异；

3、对设备、仪器的控制技术要求较高；

4、一直有细胞收获，浓度一般不高；

6，灌流式培养：特点：1、细胞截流系统可使细胞或酶保留在反应器内，维

持较高的细胞密度，一般可达107-109/ml，较大提高

了产品的产量；

2、连续灌流系统，使细胞稳定处在较好的营养环境中，

有害代谢废物浓度积累较低；

3、反应速率容易控制，培养周期较长，可提高生产率，

目标产品回收率高；

4、产品在罐内停留时间短，可及时回收到低温下保存，

有利于保持产品的活性；

7，代谢工程：通过某些特定生化反应的修饰来定向改善细胞的特性，或是利用重组DNA技术来创造新的化合物；代谢工程是生化反应代谢网络有目的的修饰。

8，代谢流：参与代谢的物质在代谢网络中按一定的规律流动。,

9，载流途径：碳架物质在代谢网络中流经的主要途径

, 10，逆代谢工程：首先确定所希望的表型，然后确定该表型的决定基因或特定的环境因子，然后通过基因改造或环境改造使该表型在特定的生物中表达。

第五章

1，植物无性繁殖过程中器官发生方式有：不定芽型、器官发生型、胚状体发生型、原球茎型。

2，植物组织培养(Plant Tissue Culture )：指在无菌条件下，将离体植物器官、组织、细胞、胚胎、原生质体等外植体材料培养在人工配置的培养基上，在适当的条件下诱长成新的完整植株的一种技术。

3，植物组织培养优点：

1）.周期短，便于人工控制培养条件，繁殖速度快，经济效益高；

2）.占用空间小，不受地区、季节限制；

3）.繁殖珍稀、濒危苗木和突变体，是优良品种培育的有效途径；

利于保持原来品种的特性；

4）.利于保持原来品种的特性

植物组织培养存在的问题及解决方法

1）与常规营养体繁殖比生产成本高问题；

2）组培苗炼苗难、移栽成活率较低问题；

3）玻璃化问题；

4）褐变问题；

5）微生物污染问题；

解决措施：

1）在进行组培产业时通过选择高效益、名特优、珍稀等植物进行组培商品化生产，取得更高的经济效益；

2）通过培育健壮的组培苗、调控环境因素、选择适宜的基质，使组培苗移栽成活率达到90%以上；

3）改进外植体消毒方法，结合常规的消毒方法，采用间隙消毒法；

反复检查培养物，不急于扩大繁殖；

4）使用抗生素；

4，极性现象：指在植物的器官、组织、甚至单个细胞中，在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异，是植物细胞分化中的一个基本现象。

5，植物细胞脱分化：是已有特定结构和功能的植物组织，在一定的条件下，其细胞被诱导改变原有的发育途径，逐步失去原有的分化状态，转变为具有分生能力的胚性细胞的过程。

6，植物组织培养再生植株的途径：器官发生途径、体细胞胚发生途径。

7，人工种子：又称合成种子或体细胞种子，是指将植物离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。

第六章

1，胚胎工程：指对哺乳动物的胚胎进行操作，让它继续发育获得人们所需要的成体动物的一种技术；包括胚胎培养、胚胎移植、胚胎分割与融合、胚胎干细胞培养等技术。

2，胚胎移植：指将受精卵或发育到一定阶段的胚胎移植到与供体同时发情但未经配种的受体母畜输卵管或子宫的技术。

3试管动物培育步骤：（1）精子采集与体外获能，卵子采集与成熟培养；（2）体外受精；（3）重组胚激活与体外培养；（4）胚胎移植；（5）体内发育、出生。 4试管婴儿：将卵子与精子取出再体外受精，培养发育成早起胚胎，再植回母体子宫内发育出生的婴儿，也就是采用体外受精联合胚胎移植技术培育的婴儿。1978年，世界首例试管婴儿路易斯·布朗在英国出生。

5，细胞核移植：是一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞的技术。

6，胞核移植克隆动物技术环节主要包括：核供体细胞的获得与取核、受体细胞的准备与去核、细胞核移植、重组胚的激活与培养、胚胎移植、核移植后代鉴定。（必考）

7，细胞克隆：是将动物体细胞经过抑制培养使其处于休眠状态，利用细胞核移植技术将其导入去核卵母细胞，培育成早期胚胎，将胚胎移植至受体，妊娠产仔培育出与核供体一样的成体动物的一种细胞工程技术。

7，胚胎分割：是指借助显微操作仪切割早期胚胎成多等份，再移植给受体从而制造同卵多仔后代的技术，是一种广义上的动物克隆技术。