三种艾滋病检测试剂的应用与比较

变得较小时,说明在灰化过程中已驱除了大部分的干扰物质了,所以在分析血液,尿液样品时,可以利用斜坡升温,长时间灰化程序,以及氘灯校正,来消除由分子吸收及无机离子带来的干扰。

3　加入基体改进剂

这是石墨炉原子吸收光谱法测定生物材料消除干扰的主要技术之一,这种方法是在样品中加入1种或几种混合试剂,加入的离子与待测元素之间产生化学作用,生成较难挥发的化合物,从而减少待测元素在高温灰化过程中的损失,实验证明,尿样或血样不加入基体改进剂,当灰化温度升至450℃左右时,铅、镉等元素就开始挥发而损失,加入基体改进剂后,铅可稳定在800℃以上,镉可稳定在650℃以上[2]。

采用石墨炉原子吸收法测定生物材料中铅、镉时,钯与磷酸盐均可用作基体改进剂,以下对几种基体改进剂的效果进行比较:磷酸盐加硝酸镁混合基体改进剂虽可将被测元素的灰化温度升高,但这种混合基体改进剂须保存在1%硝酸溶液中,否则会产生磷酸镁沉淀,导致石墨炉清洗阶段需较高温度才能完全清除残渣,大大缩短了石墨管的寿命;磷酸二氢铵和磷酸氢二铵也是常用的基体改进剂之一,但其空白值偏高;而纯度高的钯无须预先纯制,可以明显提高被测元素的灰化温度,较好地除去样品中基体干扰的同时,仍能保持石墨管的寿命,故此作为生物样品中铅、镉的测定时,使用钯作为基体改进剂是比较合适的[4]。4　检验方法

由于生物样品的基体较为复杂,对测定有一定的影响,实验操作时又难以配制符合基体的标准液,故此可以采用标准加入法进行定量测定,以消除或减轻生物样品的基体的干扰。

石墨炉原子吸收法是当前所有测定生物样品微量元素分析技术中最有效的检测方法,该方法具有高的灵敏度和元素的特效性。生物样品中的有机物和碱金属、卤化物、无机盐等所产生的背景吸收,可用氘灯校正、化学预处理、加入基体改进剂等方法消除干扰,为样品分析提供有利条件。

5　参考文献

[1]线引林.生物材料中有毒物质分析方法手册1北京:人民卫生出版

社,1994.291

[2]徐伯洪,闫惠芳.工作场所有害物质监测方法1北京:中国人民公安

大学出版社,2003.302.

[3]陈淑怡1宋力1石墨炉原子吸收法直接测定全血中镉和铅1分析测

试通报,1988,7(3):561

[4]梁志华,黄捷玲1无火焰原子分光光度计直接测定尿中铅的条件选

择1广东卫生检验杂志,1999,(10):2051

(收稿:2003-02-16)

(本文编辑:张军)

三种艾滋病检测试剂的应用与比较

卓凡,郑红,黄捷玲

(广东省佛山市顺德区疾病预防控制中心,528300)

关键词　酶联免疫双抗原夹心法;明胶颗粒凝集法;胶体硒法;HI V;检测

中国图书资料分类号:R446.6 文献标识码:B 文章编号:1004-1257(2004)05-0040-02

近年来,艾滋病感染率有呈不断上升的趋势,而各种检测试剂又各有其优缺点,同一标本用不同的试剂检测有时会出现不同的结果,这给诊断带来一定的困难。针对这种情况,2003年我们对500个吸毒人员分别用酶联免疫对抗原夹心法(E LIS A法)、明胶颗粒凝集法(PA法)、胶体硒法对人类免疫缺陷病毒(HI V)进行了对比试验,结果如下。

1　材料与方法

111　抽血对象　戒毒所吸毒人员

112　试剂　酶联免疫双抗原夹心法试剂(上海科华生物工程股份有限公司生产);明胶颗粒凝集法试剂(日本富士公司生产);胶体硒法试剂(美国雅培公司生产)。所有试剂均为国家批准使用试剂,并在有效期内使用。

113　检验原理和结果判断　E LIS A法为临床上最常用的检测方法。其原理是将HI V抗原包被在固相载体,将待测样本与酶标记同类HI V抗原以适当比例加入混合,如样本中含有HI V抗体,因抗体为双份或多份分子,则形成HI V抗原HI V抗体-酶标记抗原复合物,作用一定时间后洗涤,除去未结合的HI V抗体和酶标记HI V抗原,加入底物使之显色,在一定时间内终止反应,用酶标仪测定A值,样本A值大于临界值时为阳性[1]。

PA法其原理是将可溶性HI V抗原吸附或偶联至无载体颗粒上,使之成为致敏载体颗粒,与待检标本中HI V抗体结合,当出现肉眼可见的凝集现象时为阳性。

胶体硒法为免疫层析法。其原理是如果样本中含有HI V 抗体,抗体将会与硒胶体-抗原结合,并在病人窗口处被固相包被的合成肽和重组抗原结合,当病人窗口形成一条红线时为阳性。

2　结果

在所检测的500份样本中,E LIS A法阳性者为6例,阳性率为1120%,PA法和胶体硒法均为4例,阳性率为0180%。把E LIS A法的6例阳性标本上送确证,只有4例阳性,和PA法及胶体硒法的结果相同。经卡方检验χ2=3.2,P>0105,3种方法结果差异无显著性。

3　讨论

E LIS A法适用于大批量样品筛选。其特点是灵敏度高,但假阳性也相对较高。酶联免疫双抗原夹心法和以往的酶联免疫法相比,由于其直接采用重组基因抗原进行标记,达到对HI V 抗体直接测定的目的,准确性更高。但我们在使用E LIS A法时曾发现一些奇怪的现象:少数每年献血的无偿献血者,用E LIS A 法检测时,每年检测结果均为阳性,用PA法及上送确证结果却为阴性,还有个别献血者用一种品牌E LIS A试剂反复检测其结果均为强阳性,但改用另一种品牌E LIS A试剂检测却为阴性,上送结果也为阴性。

PA 法灵敏度略低于E LIS A 法,但特异性好,适用于无偿献

血人员现场的检测及流行病学调查,操作时注意把样本充分离心以除去红细胞等有形成份,且当第二孔出现凝集时应做吸附试验后重做,PA 法不宜用于诊断小于18月龄的新生儿母婴垂直感染。

胶体硒法操作简单、快速,无需洗涤和任何仪器,适用于临床初筛及紧急情况的使用。对于血浆样本应尽量使用E DT A 做抗凝剂,避免使用血液外的其他体液做检材,末梢全血样本必须马上测定,胶体硒法不宜用于质控样本的测定,对2ng 以下的阳性血清做不出来。

虽然3种方法一般差异无显著性,但3种方法各有其优缺点,各单位可根据不同目的、检测对象、人群流行率的不同和成本效益比、实验室设备、条件等选择不同的初筛方法,或几种方法互相补充,尽可能防止任何情况下的漏检,达到提高检验准确性的目的。

4　参考文献

[1]刘勇鹰1广东省2000～2001年HIV/AIDS 监测结果分析1华南预防

医学,2002,28(5):21-231

(收稿:2003-12-23)

(本文编辑:张军)

水中氨氮纳氏试剂分光光度测定法的改进

王志红

(山东省诸城市卫生防疫站,262200)

关键词　氨氮;纳氏试剂;悬浮物

中国图书资料分类号:R115 文献标识码:B 文章编号:1004-1257(2004)05-0041-01 水中氨氮含量的高低直接体现受有机物、肥料及工业污染的严重程度。据报道,长期饮用氨氮含量高的地面水可增加人类患癌症的概率。应用纳氏试剂分光光度法进行水中氨氮含量测定时,其精密度及准确度不高,我们将纳氏试剂进行离心处理后使用,观察其测定结果,报告如下。1　

方法111　试剂配制　按中华人民共和国国家标准G B 5750-85《生活饮用水标准检验方法》之氨氮测定方法进行。112　试验方法　基本按中华人民共和国国家标准G B 5750-85《生活饮用水标准检验方法》之氨氮测定方法进行。只是在加入纳氏试剂之前将纳氏试剂经3000r/min 离心15min 后,再取上清液使用。并参考文献[1]。

标准系列各管的平均μg 数(x )为2419,平均吸光度值为01174。

以浓度为横座标,以吸光度为纵座标,绘制校准曲线,见图1:

图1　水中氨氮测定的校准曲线

2　计算与结果

C =

M V =24.9

50

=0.498(mg/L )式中:

C —水样中氨氮的浓度mg/L ; M —从校准曲线上查得的样品管中氨氮的含量(或相

当于氨氮标准的含量)μg ;

V —水样体积,ml 。

平均回收率:014898015

×100%=99.6%

相关系数:r =1

回归方程:Y =0.037X +0.0723　讨论

纳氏试剂分光光度法是一种应用较广泛的水质氨氮检验方法,其优点是简单易行,不需要很多的仪器设备,较适应于基层卫生单位的水质分析。本法不足之处,干扰因素较多,结果重现性较差。据中国预防医学科学院环境卫生监测所《水质分析实验室技能评价工作总结》中统计:应用纳氏试剂分光光度法测定氨氮城市样品总数423个,异常个数46个,异常百分率1019%。应用纳氏试剂分光光度法测定氨氮,其他影响因素较易控制,唯有悬浮于纳氏试剂中长久不易下沉的一些肉眼较难发现的微小悬浮物,不规则的影响溶液的吸光度。相同浓度的平行样吸光度波动较大,使曲线线性较差,测得结果的精密度及准确度下降,故采取对纳氏试剂离心处理的措施,收到良好效果。

经多次水质质控验证,将配制好的(未变质失效的)纳氏试剂进行3000r/min 离心15min ,取上清液使用。标准系列呈完全正相关,相关系数,平均回收率,回归方程等较好。与用未经离心处理的纳氏试剂在相同条件下所绘制的校准曲线比较有明显差异,前者明显好于后者,测定结果重现性好、效果满意。4　参考文献

[1]水质分析大全编写组,编1水质分析大全1重庆:科学技术文献出版

社重庆分社出版,19891136-1391

(收稿:2003-12-12)

(本文编辑:张军)