药典二部附录

❖ 调整流动相组分比例时，当小比例组分的百 分比例X小于等于33%时，允许改变范围为 0.7X~1.3X; 当X大于33%时，允许改变范围 为X-10~X+10。
❖ 当必须使用特定牌号的色谱柱方能满足分离 要求时，可在该品种正文项下注明。
❖ 色谱系统的适用性试验通常包括理论板数、 分离度、灵敏度（新增）、拖尾因子和重复性 等五个参数。
❖ 电泳： 垂直电泳：恒压电泳，初始电压为80v， 进入分离胶时调至150~200v，当溴酚蓝迁移至 胶底处，停止电泳。
❖ 或恒流电泳，以恒流10mA条件下开始电泳，至 供试品溶液进入分离胶后将电流调至20mA，直 至电泳结束。
❖ 圆盘电泳：调节电流使每管8mA。
第六法：等电聚焦电泳法
❖ 方法1-----垂直板电泳
0541 电泳法
❖ 电泳是指溶解或悬浮于电解液中的带电荷的蛋白质、 胶体、大分子或其他粒子，在电流作用下向其自身 所带电荷相反的电极方向迁移。
❖ 电泳法是指利用溶液中带有不同量电荷的阳离子或 阴离子，在外加电场中使供试品组分以不同的迁移 速度向对应的电极移动，实现分离并通过适宜的检 测方法记录或计算，达到测定目的的分析方法。电 泳法一般可分为两大类：一类为自由溶液电泳或移 动界面电泳，另一类为区带电泳。
使用聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质进行电 泳，生物大分子保持天然状态，其迁移速 率不仅取决于电荷密度，还取决于分子大 小和形状，可以用来研究生物大分子的特 性，如电荷、分子量、等电点等。根据仪 器装置的不同分为水平平板电泳、垂直平 板电泳和盘状电泳，根据制胶方式的不同 又分为连续电泳和不连续电泳。
第五法：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法
供试品溶液制备：将供试品对水透析（或用其 他方法）脱盐后，与供试品缓冲液按3:1体积 比混匀。供试品溶液最终浓度应不低于 0.5mg/ml或按照品种项下的方法制备。
❖ 方法2-----水平板电泳
供试品溶液的制备：将供试品对水透析（或用 其他方法）脱盐，并使蛋白质或多肽含量调节 在每0.5~5mg/ml范围或按照各品种项下的方法 制备。
市售薄层板按固定相种类分为硅胶薄层板、聚酰胺 薄层板、氧化铝薄层板等；按固定相粒径大小分为 普通薄层板板（10~40um）和高效薄层板 （5~10um）；按硅胶板是否含有荧光剂分为硅胶G 板和硅胶GF254板。
❖ 基本同一部，删除二部显色剂部分。
❖ 点样------基本同一部，点样点由直径一般不大于 4mm（原为3mm）。
0612熔点测定法
❖ 第一法 测定易粉碎的固体药品（在原有基上新增一 个方法） B.电热块空气加热法 ：本法是采用 自动熔点仪的熔点测定法。自动熔点仪有两种测光 方式：透射光方式和反射光方式。大部分自动熔点 仪可置多根毛细管同时测定。分取经干燥处理（同 第一法）的供试品适量，置熔点测定用毛细管中 （同第一法）；将自动熔点仪加热块加热至较规定 的熔点低限约10℃时，将装有供试品的毛细管插入 加热块中，继续加热，调节升温速率为每分钟上升 1.0~1.5 ℃，重复测定3次，取其平均值，即得。
《中国药典》
2015年版主要增修订内容 汇编（四部）
本版药典对各部药典共性附录进行整合，将原附录 更名为通则，包括制剂通则、检定方法、标准物质、 试液试药和指导原则。重新建立规范的编码体系，并 将药典通则、药用辅料单独作为《中国药典》四部。
本汇编提供《中国药典》四部增修订有关内容包 括制பைடு நூலகம்通则38个，检定方法114个、药用辅料修订该 品种97个、指导原则29个。
0502 薄层色谱法
定义：薄层色谱法系将供
试品溶液点于薄层板上， 在展开容器内用展开剂展 开，使供试品所含成分分 离，所得色谱图与适宜的 对照标准物质按同法所得 的色谱图对比，亦可用薄 层色谱扫描仪进行扫描， 用于鉴别、检查或含量测 定。
将一部二部中对照
物修订为对照标准 物质
❖ 市售薄层板---补充分类信息
❖ 测定熔融同时分解的供试品时，方法如上述， 但调节升温速率使每分钟上升2.5~3.0 ℃。遇 有色粉末、熔融同时分解、固相消失不明显且 生成分解物导致体积膨胀、或含结晶水（或结 晶溶剂）的供试品时，可适当调整仪器参数， 提高判断熔点变化的准确性。当透射和反射测 光方式受干扰明显时，可允许目视观察熔点变 化；通过摄像系统记录熔化过程并进行追溯评 估，必要时，测定结果的准确性需经第一法验 证。若对本法持有异议，应以第一法测定结果 为准。
第一法：纸电泳法
❖ 滤纸：取色谱纸置1mol/l甲酸溶液中浸泡不少 于12小时（原为浸泡过夜），取出，用水漂 洗至洗液的PH值不低于4，置60℃烘箱烘干， 备用。
第二法：醋酸纤维素薄膜电泳法
第三法：琼脂糖凝胶电泳法（适用于检
测DNA,PCR反应中的电泳检测）
第四法：聚丙烯酰胺凝胶电泳法
❖ 定义：聚丙烯酰胺凝胶电泳法以聚丙烯 酰胺凝胶为支持介质。聚丙烯酰胺凝胶 是由丙烯酰胺单体和少量的交联剂甲叉 双丙烯酰胺，在催化剂作用下聚合交联 而成的三维网状结构的凝胶。单体的浓 度或单体与交联剂比例的不同，其凝胶 孔径就不同。
❖ 温度会影响分离效果，品种正文中未指明色 谱柱温度时系指室温，应注意室温变化的影 响。为改善分离效果可适当提高色谱柱的温 度，但还不宜超过60℃。
❖ 品种正文项下规定的条件除填充剂类型、流 动相组分、检测器类型不得改变外，其余如 色谱柱内径与长度、填充剂粒径、流动相流 速、流动相组分比例、柱温、进样量、检测 器灵敏度等，均可适当改变，以达到系统适 用性的要求。
0512高效液相色谱法
❖ 高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的 流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品 进行分离测定的色谱方法。注入的物质（原为 供试品），由流动相带入色谱柱（原为柱内）中， 组分在柱内分离，并进入检测器检测，由积 分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。
❖ 对仪器的一般要求和色谱条件： 高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱 柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。色 谱柱内径一般为3.9~4.6nm，填充剂粒径为 3~10um。超高效液相色谱仪是适应小内经（约 2mm或更小）色谱柱与小粒径（约2um）填充 剂的耐超高压、小进样量、低死体积、高灵敏 度检测的高效液相色谱仪。