二级菌种制作技术

拌料
调节pH值 分装培养料
清洁(洗或擦)瓶、袋外壁
封口
湖北三峡职业技术学院《食用菌生产技术》课程组
【2-3】 二级菌种制作技术
三、二级菌种培养基的灭菌
三、 二级菌种培养基的灭菌
1．灭菌方法及要求 高压蒸汽灭菌： 压力1.5kg/cm2，温度 126～128℃，时间1～2h（种 木、谷粒和经过堆制发酵的粪 草培养基应达到2～2.5h）。 常压蒸汽灭菌： 100℃，保持10～12h(攻 头，控中，保尾)。
四、二级菌种的接种
接种室(箱)的接种程序
清洁 放入接种物品 物品的摆放要便于接种操作 消毒处理 接种操作 药物消毒后，再用紫外灯照射 无菌操作、接毕及时贴好标签、避免错种
接种完毕及时清理清洁，并用75%酒精或 室(箱)后处理 新洁尔灭溶液擦试消毒。
净化工作台的接种程序
用75%酒精表面擦拭消毒 开机预净20 min 接种操作
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2．根据实际操作说明如何测定培养基的含水量和pH值。
3. 简述二级菌种培养基的灭菌方法及要求。 4. 如何检验二级菌种培养基的灭菌效果？ 5. 简述一级菌种转接二级菌种的过程。 6. 合格的培养室有什么要求？
7．如何检查二级菌种质量？
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【2-3】 二级菌种制作技术
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【2-3】 二级菌种制作技术
六、二级菌种的质量鉴定
菌种制作过程中，只要做到
选择优良菌种 选择正确的配方和优质原料 严格灭菌 严格无菌操作 科学培育 优良的二级菌种
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【2-3】 二级菌种制作技术
作业题
作业题
1．简述二级菌种的制作流程。
注：其它配方参见课本
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【2-3】 二级菌种制作技术
二、二级菌种培养基的配制
（三）培养基配制步骤
称料
1.不溶性主、辅料混拌均匀 2.可溶性辅料溶于水后拌入主辅料 3.注意检查含水量（手测法等） 比实际要求的pH值调高1左右 容器：菌种瓶、菌种袋 要求：上紧下松，外紧内松，中间一个洞
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【2-3】 二级菌种制作技术
五、二级菌种的培养
五、 二级菌种的培养
菌种的培养实质就是对菌丝体的培养 场所预先清洁、消毒、灭虫
培 养 条 件
温度约20～24℃(因种而异)
空气湿度75%以下
空气清新
光线暗（避光）
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【2-3】 二级菌种制作技术
【2-3】 二级菌种制作技术
四、二级菌种的接种
四、二级菌种的接种
接种
概念：菌种移至新培养基上的过程 关键：无菌操作
接种环境消毒灭菌 酒精棉球消毒双手 操作器具消毒灭菌 开启的管口、瓶口靠近灯焰 拔出的棉塞勿触及任何地方 动作快、准、稳
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无菌 操作 要点
【2-3】 二级菌种制作技术
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【2-3】 二级菌种制作技术
二、二级菌种培养基的配制
（二）培养基常用配方 木屑培养基 阔叶树木屑 78% 麸皮(或米糠) 20% 蔗 糖 1% 石膏粉 1% 料水比 1:1.1~1.3 棉籽壳培养基 棉籽壳 78% 麸皮(或米糠) 20% 蔗 糖 1% 石膏粉 1% 料水比 1:1.1~1.3
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【2-3】 二级菌种Hale Waihona Puke Baidu作技术
一、二级菌种制作流程
一、二级菌种制作流程
配制培养基 一级菌种
灭
接 培
菌
种 养
二级菌种
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【2-3】 二级菌种制作技术
二、二级菌种培养基的配制
二、 二级菌种培养基的配制
（一）培养基配制原则 1．选择适宜的营养物质。 2．营养物质间配制的比例要恰当。 3．选择经济实用、来源广泛的原料。 4．适宜的pH值和含水量。
复习思考题
复习思考题
1．简述二级菌种培养基的配制原则。 2. 分装培养料时，为何要在料中打一个孔？
3．培养二级菌种时，要注意哪些问题？
4．购买菌种时要注意什么？ 5. 请你以一个菌种厂厂长或技术员的身份，谈谈如 何搞好菌种生产。
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【2-3】 二级菌种制作技术
菌 无杂色、无黄水、无结皮、无原基、 种
不同的食用菌，原种和栽培种的形态特 征各不相同，可以此作为菌种鉴定的依据。
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【2-3】 二级菌种制作技术
六、二级菌种的质量鉴定
常见食用菌的特征介绍：参见教材
无论哪一类、哪一级菌种均应杜绝培养基上或 棉花塞和瓶（袋）颈交接处有杂色色斑。
《食用菌生产技术》
【模块2】食用菌菌种制作技术
【单元3】二级菌种制作技术
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【模块2】食用菌菌种制作技术
【单元3】二级菌种制作技术
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二级菌种的制作流程 二级菌种培养基的配制 二级菌种培养基的灭菌 二级菌种的接种 二级菌种的培养 二级菌种的质量鉴定
菌种出售必须贴有菌种质量合格标签，标明菌 种种类、级别、品种、生产单位和接种日期。
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【2-3】 二级菌种制作技术
六、二级菌种的质量鉴定
菌种的选购
1.要选择从具有相应资质的供种单位购买。 同时，索要相关的技术资料。 2. 应咨询所购菌种的种类、品种、级别、 培养基种类、接种日期、保藏条件、保质期等， 对所购菌种做到心中有数。 3.对菌种质量的外观进行鉴别。菌种是否洁 白、丰满、粗壮、有无老皮和黄水等老化现象， 最好逐瓶（袋）检查。
五、二级菌种的培养
勿堆放过挤
培 养 方 法
适时检查，及时剔除污染瓶（袋）
控制菌龄（菌丝长满7～10天后使用）
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【2-3】 二级菌种制作技术
六、二级菌种的质量鉴定
六、 二级菌种的质量鉴定
菌丝白（或呈该菌种应有的颜色） 合 均匀、粗壮、有菇香味 格 接种后萌发快 无干缩脱壁等现象
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【2-3】 二级菌种制作技术
四、二级菌种的接种
注 意
1. 从具有相应技术资质的供种单位引种，且 种性清楚。不应使用来历不明、种性不清、 随意冠名的菌种和生产性状未经系统试验验 证的组织分离物作种源生产菌种。 2. 严格挑选待接的菌种质量。
接 种 方 法
•用接种耙取蚕豆大母种放于瓶中料面上。 •勿接入表面老菌丝及老种块。 •一支母种移植扩大原种不应超过6瓶（袋）。
卧式高压蒸汽灭菌锅
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【2-3】 二级菌种制作技术
三、二级菌种培养基的灭菌
2．灭菌效果检验 随机取几瓶（袋）置于25～30℃温度下空 白培养4～6天，会出现以下情况： 全部感杂 少数感杂 分析原因 全部没有杂菌
？
3. 高压蒸汽灭菌锅的使用方法
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