实验报告体验制备细胞膜
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河北蒙中生物实验报告
实验题目体验制备细胞膜的方法
活动目标
1.体验用哺乳动物红细胞制备细胞膜的基本方法。
2.使用高倍显微镜观察制备细胞膜过程中细胞的变化。
实验原理
生物膜的研究发展迅速。要研究生物膜的组成、结构及功能,首先必须分离出纯净的细胞膜。分离得到的哺乳动物的红细胞膜,一般称为“血影”。哺乳动物成熟的红细胞中没有一般真核细胞所具有的细胞核和细胞器,容易用它制备纯净的细胞膜。此外,哺乳动物的血液也比较容易获得,因而是研究细胞膜的理想材料。
从哺乳动物的红细胞中分离细胞膜,第一步是将血液收集在加有抗凝剂的容器内,用低速离心的方法从血液中分离出红细胞,然后用等渗缓冲液反复洗涤,经多次离心,去除血浆。第二步是在红细胞中加入低渗缓冲液,由于低渗溶液的作用,大量水分进入细胞,使红细胞胀破而溶血。第三步是将溶血的红细胞反复而充分地高速离心、洗涤,去除血红蛋白和其他的细胞内含物,最终获得比较纯净的红细胞膜。
细胞内的物质具有一定的浓度,把细胞放入清水中,细胞由于吸水而涨破,除去细胞内的其他物质,即得到细胞膜。
方法步骤及结果:
选材:的新鲜的红细胞稀释液
制作装片:用滴管取一滴红细胞稀释液滴在载玻片上,盖上盖玻片
观察:用显微镜观察红细胞的形态(由低倍一高倍)
滴加清水:在盖玻片的一侧滴加______________,在另一侧用
_______________ 吸引(引流法)
观察:持续观察细胞的变化
结果:红细胞凹陷消失,体积增大,细胞破裂,内容物流出,获得细胞膜
(1)取得红细胞后应先用适量的生理盐水稀释,目的是:________________
(2)用哺乳动物成熟红细胞的原因:________________________________
需要注意的几个问题
(1)制作临时装片时,红细胞必须稀释,而且取红细胞的量要少。
(2)在高倍镜下观察,待观察清晰时,在盖玻片的一侧滴加蒸馏水,同
时在另一侧用吸水纸吸引。上述操作均在载物台上进行,并随时调整镜筒高度,
持续观察细胞的变化。在盖玻片一侧滴加蒸馏水的量要少,不能让盖玻片处于
漂浮状态;同时在另一侧用吸水纸吸引时要小心,不要将血细胞吸走。
(3)要想取得好的观察效果,所用显微镜的放大倍数应在400倍以上。