红细胞渗透脆性试验
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红细胞渗透脆性试验
[目的和原理]目的:测定动物的红细胞对低渗溶液的脆性。原理:将红细胞放置于等渗溶液中,红细胞的形态不发生改变。放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变,置于高渗液中,红细胞出现皱缩;置于低渗液中则发生膨胀,最后破裂,细胞内容物溢入血浆或溶液,这种现象称为溶血。
将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中,可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度,为该血液红细胞的最小抵抗力(约0.40%~0.45%NaCl 溶液),而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力(约0.30%~-0.45%NaCl溶液)。对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大,反之表示脆性小,最大抵抗力到最小抵抗力的范围,称脆性范围。
[实验对象]家兔
[实验器材]试管架、5ml试管十支、2ml吸管两支、注射器、1%NaCl溶液、蒸
馏水、枸椽酸钠。
[实验步骤]
(一)低渗盐溶液的配制
取试管十支,洗净烤干,用玻璃铅笔编号,排在试管架上,参照下表向各试管中加入1%NaCl溶液,然后再加入蒸馏水,每管溶液均2ml。
试管号
12345678910试管
1%NaCl(ml)1.401.301.201.101.000.900.800.700.600.50
蒸馏水(ml)0.600.700.800.901.001.101.201.301.401.50
NaCl浓度(%)0.700.650.600.550.500.450.400.350.300.25
(二)枸椽酸钠血的制备
家兔颈部解剖,剥离颈总动脉,插管,将血放入烧杯内,烧杯内事先加入3.8%枸椽酸钠溶液,血与枸椽酸钠溶液的比例为9:1,轻摇烧杯使之混匀。
[观察项目]
用注射器向每个试管内加入兔血一滴,用拇指堵住试管口,将试管颠倒2~3次(不要用力振荡以免溶血),在室温下静置1小时,然后观察各试管的透明度以判断是否溶血。
1、试管内下层为混浊红色,上层为无色或淡黄色液体,说明红细胞尚未破坏。
2、试管内下层为混浊红色,上层为透明淡红色,则表明红细胞部分溶解,才出现溶血的低渗盐溶液的浓度,为红细胞的最小抵力(最大脆性)。
3、试管内溶液呈现透明红色,说明红细胞全部溶解,称为完全溶血,首先引起红细胞全部溶解的低渗盐溶液浓度,即红细胞的最大抵抗力(最小脆性)。
通过试验,记录红细胞的脆性范围。
[思考题]
1、什么是红细胞的渗透脆性?
2、测定红细胞渗透脆性时,应注意什么?
1、简要说明红细胞渗透脆性试验的意义?