2D-DIGE(荧光差异双向电泳)

of less than 10% between samples.
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
每个标记蛋白只携带一个染 料标记，呈现一个蛋白质点
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2-D DIGE
杨华丽
November 12th, 2015
Contents
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2-DE
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2-D DIGE
3来自百度文库
Experiment
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2-D DIGE video
1. 2-DE
1. 2-DE
1. 2-DE
2. 2-D DIGE
荧光差异双向电泳技术（two dimension difference gel electrophoresis, 2D-DIGE）
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
Virtual elimination of gel:gel variation is induced biological change with statistical accuracy capable of revealing differences in abundance
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2. 2-D DIGE
3. experiment
3. experiment
3. experiment
3. experiment
3. experiment
3. experiment
3. experiment
3. experiment
3. experiment
2、在第14张PPT中，很明显可以看出样品4的量要远远大于样品2，但为什 么又说它们的量是一样的呢？ 答：因为在胶A中样品1与2的量相对于内标几乎是没有变化的，我们可以粗略的认 为它们三者均一样。在胶B中我们可以得出样品4与内标一样，而样品3相对于内标 有所减少。由于胶A与胶B的内标又相同的，所以样品4与样品2的量也是一样的。
2. 2-D DIGE
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2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
2. 2-D DIGE
3. experiment
4. video
2-D DIGE video
5.question
❖ 1. 用三色荧光染料标记样品是否会改变蛋白质的分子质量和等电点。 答：不会。这三种荧光染料是电荷和分子量匹配的，并且都是带一价正电荷，标记 的是蛋白质赖氨酸的ε-氨基。由于ε-氨基上带有一价正电荷，当染料与蛋白质发生 反应时就可以发生电荷取代，所以不会改变各蛋白质的等电点。虽然被标记蛋白质 的分子质量有所改变，但样品中所有蛋白质的相对分子质量都等量增加了，所以依 旧不会影响蛋白质的电泳结果
2D-DIGE技术是一种新出现的荧光标记的定量蛋 白质组学技术，它比经典的2-DE具有更高的动力 学范围和灵敏性，是2-DE技术的成熟与完善。它 通过三色荧光染料分别对内标和生物样本进行标 记，能够在一张2D胶上对两个样本的多种蛋白质 进行分离，并分别单独成像，应用DeCyder 2D 软件分析图像，得到蛋白表达量的丰度变化，根 据数据分析结果准确地发现差异蛋白。常规可检 测到小于10%的蛋白表达差异而同时统计学可信 度达到95%。