水产动物营养与饲料
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6、干物质计算值采用数次称重的最低值。 7、称量瓶中的干物质保留作测定粗蛋白。
【结果计算与方法】
• 1、风干样本(或半干样本)中105℃干物质％
式中：W1=称量瓶重(克) W2=称量瓶重(克)+风干样本重(克) W= W2- W1=风干样本重(克) W3=称量瓶重(克)+105℃干物质重(克)
【注意事项】
3、有些饲料，在105℃时可能发生某些化学变化。例如，含糖 分高的糖浆。这类饲料应在较低温度和减压条件下进行干燥。
【作业与思考】
1、某种饲料半干样本105℃干物质百分比为 90％，该饲料空气干燥干物质为30％，计 算该种新鲜饲料的干物质百分比。
实验三 粗蛋白质的测定 (凯氏定氮法)
【实验目的】
1、掌握饲料中粗蛋白质测定方法。
【作业与思考】
1、试验鱼的暂养应注意哪些方面？
实验二 饲料中干物质的测定
【实验目的】 测定饲料中干物质质量
【实验原理和基础知识】
• 饲料中营养物质，包括有机物质和无机物质均存在于饲料 的干物质中。饲料中干物质含量的多少与饲料的营养价值 及家畜的采食量均有密切关系。风干饲料例如各种籽实饲 料、油饼、糠麸、藁秕、青干草、鱼粉、血粉等可以直接 在100～105Biblioteka Baidu温度下烘干，烘去饲料中蛋白质、淀粉及 细胞膜上的吸附水，得到风干饲料的干物质量百分比。含 水分多的新鲜饲料如青饲料、青贮饲料、多汁饲料以及畜 类和鲜肉等均可先测定初水分后制成半干样本；再在 100～105℃温度下烘干，测得半干样本中的干物质量， 而后计算新鲜饲料或鲜粪或肉中干物质量百分比。
3、样品分析
（1）饲料中干物质的测定。 （2）饲料中灰分的测定。 （3）饲料中粗蛋白质的测定。 （4） Cr2O3的湿式灰化定量法。
4、消化率的计算及不同实验组间的结果比较：
• 根据凯氏定氮法测得的饲料及粪便的蛋白质水平， 以及以上获得Cr2O3数据，用上述计算公式，便可 算出饲料的总消化率及蛋白质消化率。因为不同 试验组所用的试验饲料一样，试验鱼及试验条件 相似，方法相同，所以其结果有很强的可比性。 各试验组可将试验结果与其他组的结果进行比较， 并予讨论。
3、在称量瓶中称取2克风干样本(实验饲料)和半干样本。将 称量瓶和样本放入100～105℃烘箱内，将瓶盖揭开少许。
4、样本在烘箱内烘5～6 小时后紧盖瓶盖，移入干 燥器中，冷却30分钟，进行第一次称重。
5、按照上述方法，继续将称量瓶放入烘箱内，烘1 小时后进行第二次称重，直至前后两次称重的差 数在0.002克。
水产动物营养与 饲料科学实验指导
实验一 鱼虾饲料的总消化率 及其蛋白质消化率的测定
【实验目的】 掌握用外源指示剂Cr2O3间接测量鱼、虾饲料 消化率的基本方法。
【实验原理和基础知识】
• 与饲料均匀混合的外源指示剂Cr2O3完全不被动物吸 收而随粪便排出。根据指示剂及蛋白质(或其他营养 成分)在食物及粪便中的含量变化。饲料的总消化率 和蛋白质的消化率由如下两式给出：
【实验用品】
一、实验器材
1、一个学生做2个测定所需仪器数量
✪称量瓶：铝质、带盖、容量为30毫升
2个
✪干燥器： 30厘米直径
1个
✪坩埚钳：
1把
✪精密天平：
1架
✪药匙：
1个
✪小毛刷：
1把
2、公用仪器
✪鼓风烘箱：100～105℃
1台
二、试剂
• 硅胶 • 凡士林 • 以上均为干燥器用
500克 10克
【实验操作步骤】
2、水族箱每试验组配50～100L容积的水族箱2个，一个作 投饲槽、一个作排泄槽。
3、充氧设备每水族箱配微型充气泵一台。 4、集粪工具每组配虹吸管1支、漏斗2个。 5、小捞网1个。 6、100目分样筛1个。
【实验操作步骤】
1、试验饲料的制备
• 试验饲料可直接用市售鱼、虾饲料，经重新粉碎后使用。 所有干性原料要经粉碎，并通过100目筛。化学纯Cr2O3 也要经过100目筛。按每千克干饲料的1％准确称取Cr2O3 ， 与少量的干性原料混合，分四次逐步扩大到全部干性饲料 组分，充分混合均匀，混合操作可在大白搪瓷盆进行。因 Cr2O3为绿色，所以从盆壁上是否留有团状绿色痕迹来判 断混合的均匀程度。混合均匀程度决定试验的成败。平均 每组制作200g饲料。
2、投饲与粪便采集
• 把试验鱼置于投饲槽、充气，用试验饲料暂养3天。每天 清理粪便及残饵，并适量换水。停食数小时后，再一次投 足量试验饲料让鱼群饱食。然后用捞网把鱼捕到条件完全 相同的排泄槽开始观察排粪，排粪后及时用虹吸管收取， 经过滤，收集烘干，保存分析用。虹吸过程尽量不要把条 状粪便弄破。
• 为了获得可靠的结果，通常要同时作三个重复组，或把排 粪后的鱼再移回投饲槽喂饱，再移到排泄槽，再收集粪便， 如此重复两次。但这里仅为了掌握基本方法、收集足够供 分析的粪便即可(约300mg干品)。
• 本试验所用鼓风烘箱测定饲料样本中干物质的方法，并不是 绝对正确的。有以下几个可能，会引起测定结果的误错。
1、加热时样本中挥发性物质可能与样本中水分一起损失，例 如，青贮料中的挥发性脂肪酸。
2、样本中有些物质如脂肪，在加热时可能在空气中氧化，使 样本重量不但不减少，反而会增加。在这种情况下，测定样 本中干物质需在真空烘箱或装有二氧化碳的特殊烘箱中进行。
1、用普通天平称出200～300克刚采集的样品(实验鱼的粪 便)，放入60～70℃烘箱中，5～6个小时后取出。磨碎， 制得半干样本。
2、将洗净的称量瓶放在100～105℃的鼓风烘箱内，开盖烘 1小时。用坩埚钳取出称量瓶，并移入干燥器中冷却约30 分钟后，称重(称量瓶放入烘箱时须启盖，冷却和称重时 须严盖)。
• 饲料总消化率：D(％)=[1－B／B、]×100 • 蛋白质消化率：D、(％)=[1-(A、／A×B／B、)]×100
• A、A、分别为饲料和粪便中的粗蛋白含量。 • B、B、分别为饲料和粪便中的Cr2O3含量。
【实验用品】
1、实验鱼可根据实际情况选择实验鱼的种类，但易于驯化、 习惯实验环境的鱼类(如：金鱼、锦鲤、罗非鱼等)较好。 体重20～25g，每试验组10尾。
2、测定各种样本的粗蛋白质含量。
【实验原理和基础知识】
饲料中含氮物质包括纯蛋白质和氨化物(氨化物有氨 基酸、酰胺、硝酸盐及铵盐等)，两者总称为粗蛋白质。 凯氏定氮法的基本原理是用浓硫酸分解样本中蛋白质与氨 化物，使它们含氨物都转变成氨气，氨气被浓硫酸吸收变 为硫酸铵。硫酸铵在浓碱的作用下放出氨气。通过蒸馏， 氨气随汽水顺着冷凝管流入硼酸溶液，与之结合成为四硼 酸铵，后者用盐酸或硫酸标准液滴定，即可测定放出的氨 氮量。根据氮量，乘以特定系数，一般为6.25，即可得出 样本中粗蛋白质含量。上述过程中的化学反应如下：
【结果计算与方法】
• 1、风干样本(或半干样本)中105℃干物质％
式中：W1=称量瓶重(克) W2=称量瓶重(克)+风干样本重(克) W= W2- W1=风干样本重(克) W3=称量瓶重(克)+105℃干物质重(克)
【注意事项】
3、有些饲料，在105℃时可能发生某些化学变化。例如，含糖 分高的糖浆。这类饲料应在较低温度和减压条件下进行干燥。
【作业与思考】
1、某种饲料半干样本105℃干物质百分比为 90％，该饲料空气干燥干物质为30％，计 算该种新鲜饲料的干物质百分比。
实验三 粗蛋白质的测定 (凯氏定氮法)
【实验目的】
1、掌握饲料中粗蛋白质测定方法。
【作业与思考】
1、试验鱼的暂养应注意哪些方面？
实验二 饲料中干物质的测定
【实验目的】 测定饲料中干物质质量
【实验原理和基础知识】
• 饲料中营养物质，包括有机物质和无机物质均存在于饲料 的干物质中。饲料中干物质含量的多少与饲料的营养价值 及家畜的采食量均有密切关系。风干饲料例如各种籽实饲 料、油饼、糠麸、藁秕、青干草、鱼粉、血粉等可以直接 在100～105Biblioteka Baidu温度下烘干，烘去饲料中蛋白质、淀粉及 细胞膜上的吸附水，得到风干饲料的干物质量百分比。含 水分多的新鲜饲料如青饲料、青贮饲料、多汁饲料以及畜 类和鲜肉等均可先测定初水分后制成半干样本；再在 100～105℃温度下烘干，测得半干样本中的干物质量， 而后计算新鲜饲料或鲜粪或肉中干物质量百分比。
3、样品分析
（1）饲料中干物质的测定。 （2）饲料中灰分的测定。 （3）饲料中粗蛋白质的测定。 （4） Cr2O3的湿式灰化定量法。
4、消化率的计算及不同实验组间的结果比较：
• 根据凯氏定氮法测得的饲料及粪便的蛋白质水平， 以及以上获得Cr2O3数据，用上述计算公式，便可 算出饲料的总消化率及蛋白质消化率。因为不同 试验组所用的试验饲料一样，试验鱼及试验条件 相似，方法相同，所以其结果有很强的可比性。 各试验组可将试验结果与其他组的结果进行比较， 并予讨论。
3、在称量瓶中称取2克风干样本(实验饲料)和半干样本。将 称量瓶和样本放入100～105℃烘箱内，将瓶盖揭开少许。
4、样本在烘箱内烘5～6 小时后紧盖瓶盖，移入干 燥器中，冷却30分钟，进行第一次称重。
5、按照上述方法，继续将称量瓶放入烘箱内，烘1 小时后进行第二次称重，直至前后两次称重的差 数在0.002克。
水产动物营养与 饲料科学实验指导
实验一 鱼虾饲料的总消化率 及其蛋白质消化率的测定
【实验目的】 掌握用外源指示剂Cr2O3间接测量鱼、虾饲料 消化率的基本方法。
【实验原理和基础知识】
• 与饲料均匀混合的外源指示剂Cr2O3完全不被动物吸 收而随粪便排出。根据指示剂及蛋白质(或其他营养 成分)在食物及粪便中的含量变化。饲料的总消化率 和蛋白质的消化率由如下两式给出：
【实验用品】
一、实验器材
1、一个学生做2个测定所需仪器数量
✪称量瓶：铝质、带盖、容量为30毫升
2个
✪干燥器： 30厘米直径
1个
✪坩埚钳：
1把
✪精密天平：
1架
✪药匙：
1个
✪小毛刷：
1把
2、公用仪器
✪鼓风烘箱：100～105℃
1台
二、试剂
• 硅胶 • 凡士林 • 以上均为干燥器用
500克 10克
【实验操作步骤】
2、水族箱每试验组配50～100L容积的水族箱2个，一个作 投饲槽、一个作排泄槽。
3、充氧设备每水族箱配微型充气泵一台。 4、集粪工具每组配虹吸管1支、漏斗2个。 5、小捞网1个。 6、100目分样筛1个。
【实验操作步骤】
1、试验饲料的制备
• 试验饲料可直接用市售鱼、虾饲料，经重新粉碎后使用。 所有干性原料要经粉碎，并通过100目筛。化学纯Cr2O3 也要经过100目筛。按每千克干饲料的1％准确称取Cr2O3 ， 与少量的干性原料混合，分四次逐步扩大到全部干性饲料 组分，充分混合均匀，混合操作可在大白搪瓷盆进行。因 Cr2O3为绿色，所以从盆壁上是否留有团状绿色痕迹来判 断混合的均匀程度。混合均匀程度决定试验的成败。平均 每组制作200g饲料。
2、投饲与粪便采集
• 把试验鱼置于投饲槽、充气，用试验饲料暂养3天。每天 清理粪便及残饵，并适量换水。停食数小时后，再一次投 足量试验饲料让鱼群饱食。然后用捞网把鱼捕到条件完全 相同的排泄槽开始观察排粪，排粪后及时用虹吸管收取， 经过滤，收集烘干，保存分析用。虹吸过程尽量不要把条 状粪便弄破。
• 为了获得可靠的结果，通常要同时作三个重复组，或把排 粪后的鱼再移回投饲槽喂饱，再移到排泄槽，再收集粪便， 如此重复两次。但这里仅为了掌握基本方法、收集足够供 分析的粪便即可(约300mg干品)。
• 本试验所用鼓风烘箱测定饲料样本中干物质的方法，并不是 绝对正确的。有以下几个可能，会引起测定结果的误错。
1、加热时样本中挥发性物质可能与样本中水分一起损失，例 如，青贮料中的挥发性脂肪酸。
2、样本中有些物质如脂肪，在加热时可能在空气中氧化，使 样本重量不但不减少，反而会增加。在这种情况下，测定样 本中干物质需在真空烘箱或装有二氧化碳的特殊烘箱中进行。
1、用普通天平称出200～300克刚采集的样品(实验鱼的粪 便)，放入60～70℃烘箱中，5～6个小时后取出。磨碎， 制得半干样本。
2、将洗净的称量瓶放在100～105℃的鼓风烘箱内，开盖烘 1小时。用坩埚钳取出称量瓶，并移入干燥器中冷却约30 分钟后，称重(称量瓶放入烘箱时须启盖，冷却和称重时 须严盖)。
• 饲料总消化率：D(％)=[1－B／B、]×100 • 蛋白质消化率：D、(％)=[1-(A、／A×B／B、)]×100
• A、A、分别为饲料和粪便中的粗蛋白含量。 • B、B、分别为饲料和粪便中的Cr2O3含量。
【实验用品】
1、实验鱼可根据实际情况选择实验鱼的种类，但易于驯化、 习惯实验环境的鱼类(如：金鱼、锦鲤、罗非鱼等)较好。 体重20～25g，每试验组10尾。
2、测定各种样本的粗蛋白质含量。
【实验原理和基础知识】
饲料中含氮物质包括纯蛋白质和氨化物(氨化物有氨 基酸、酰胺、硝酸盐及铵盐等)，两者总称为粗蛋白质。 凯氏定氮法的基本原理是用浓硫酸分解样本中蛋白质与氨 化物，使它们含氨物都转变成氨气，氨气被浓硫酸吸收变 为硫酸铵。硫酸铵在浓碱的作用下放出氨气。通过蒸馏， 氨气随汽水顺着冷凝管流入硼酸溶液，与之结合成为四硼 酸铵，后者用盐酸或硫酸标准液滴定，即可测定放出的氨 氮量。根据氮量，乘以特定系数，一般为6.25，即可得出 样本中粗蛋白质含量。上述过程中的化学反应如下：