注射用红花黄色素

注射用红花黄色素

Zhusheyong Honghuahuangsesu

本品为红花黄色素经冷冻干燥制成的无菌粉末。

【制法】取红花黄色素适量（按含总黄酮80g计），甘露醇40～60g，以注射用水溶解，滤过，最后用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于1000瓶，冷冻干燥，即得。

【性状】本品为黄色至橙黄色的疏松块状物。

【鉴别】取本品，加水制成每1ml含1mg的溶液，作为供试品溶液，另取羟基红花黄色素A 对照品，加水制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取上述两种溶液各lμl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲醇-水-冰醋酸（5∶4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

【检查】pH值取本品，加水制成每1ml含1mg的溶液，依法测定（中国药典2015年版通则0631），应为5.0～7.0。

水分精密称取本品0.5g，照水分测定法（中国药典2015年版通则0832第三法）测定，水分不得过5.0%。

可见异物取本品5支，分别用经0.45μm微孔滤膜过滤的注射用水5ml溶解，依法检查（中国药典2015年版通则0904第一法及可见异物检查法补充规定）。应符合规定。

蛋白质取本品，加水制成每1ml含1mg的溶液，取该溶液1m1，滴加鞣酸试液1～3滴，不得产生浑浊。

鞣质取本品，加水制成每1ml含1mg的溶液，取该溶液1m1，加新鲜配制的含1%鸡蛋清的生理盐水5ml，放置10分钟，不得出现浑浊或沉淀。

草酸盐取本品，加水制成每1ml含1mg的溶液，取该溶液2ml，加3%氯化钙试液2～3滴，放置10分钟，不得出现浑浊或沉淀。

钾离子取本品1瓶，加水制成250ml溶液。取2ml，依法测定（中国药典2015年版通则2400）。应符合规定。

无菌取本品，用薄膜过滤法处理依法检查（中国药典2015年版通则1101），应符合规定。

热原取本品1瓶，加氯化钠注射液制成每1ml含4mg的溶液，依法检查（中国药典2015年版通则1142），剂量按家兔体重每1Kg注射1ml。应符合规定。

溶血与凝聚2%的红细胞混悬液的制备取兔血或羊血数毫升，放入盛有玻璃珠的锥形瓶中，

振摇10分钟，除去纤维蛋白原，使成脱纤血，加约10倍量的生理氯化钠溶液，摇匀，离心，除去上清液，沉淀的红细胞再用生理氯化钠溶液洗涤2～3次，至上清液不显红色时为止，将所得红细胞用生理氯化钠溶液配成浓度为2%的红细胞混悬液，即得。

试验方法取试管6支，按下表中的配比量依次加入2%红细胞混悬液和生理氯化钠溶液，混匀，于37℃恒温箱中放置30分钟，分别加入不同量的药液（取本品80mg，用生理氯化钠溶液溶解并稀释成4mg/ml；以第6管为空白对照），摇匀后，置37℃恒温箱中，开始每隔15分钟观察1次，1小时后，每隔1小时观察1次，共观察2小时。

按上法检查，以第3管为准，本品在2小时内不得出现溶血和红细胞凝聚。

异常毒性取本品80mg（以总黄酮计），加氯化钠注射液配制成每1ml含4mg的供试品溶液，依法检查（中国药典2015年版通则1141）。应符合规定。

过敏反应取本品或同批原料80mg（以总黄酮计），用氯化钠注射液配制成每1ml含4mg的溶液进行致敏，依法检查(中国药典2015年版通则1147)，应符合规定。

重金属及有害元素残留量

铅、镉、砷、汞、铜测定精密称取注射用红花黄色素0.3g，照铅、镉、砷、汞、铜测定法（中国药典2015年版通则2321）检查，本品每瓶含：铅不得超过12μg，镉不得超过3μg，砷不得超过6μg，汞不得超过2μg，铜不得超过150μg。

相关物质照高效液相色谱法（中国药典2015年版通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验Agilent 1100 型高效液相色谱仪；色谱柱：Inertsil ODS-3 C18，250mm×4.6mm，5µm；以流动相A：乙腈、B：0.05％磷酸，按下表进行梯度洗脱；流速每分钟为1.0ml；检测波长为230nm；柱温35℃。理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于5000。

时间（分钟）A(%) B(%)

0～55 0→30100→70

55～65 30→070→100参照物溶液的制备精密称取羟基红花黄色素A对照品适量，加水制成每1ml含0.4mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品1瓶，加水使溶解，并转移至100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇

匀，用微孔滤膜(0.45µm)滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各5µl，注入液相色谱仪，测定，记录0分钟～65分钟的色谱峰，以供试品色谱中羟基红花黄色素A峰面积的0.3%为最小积分峰面积，积分，计算，即得。

供试品色谱中，除羟基红花黄色素A峰外其他色谱峰面积总和不得超过总峰面积的25%。

其他应符合注射剂项下有关的各项规定（中国药典2015年版通则0102）。

【含量测定】总黄酮

对照品溶液的制备精密称取羟基红花黄色素A对照品适量，加水制成每1ml含0.7mg的溶液，即得。

标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.1 ml、0.15 ml、0.2 ml、0.25 ml、0.3 ml、0.4ml，分别置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。以水作为空白，照紫外-可见分光光度法（中国药典2015年版通则0401），在400nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

测定法取本品约55mg，精密称定，加水制成每1ml含1mg的溶液，精密量取该溶液1ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。照标准曲线的制备项下的方法，自“以水为作为空白”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中羟基红花黄色素A的重量，计算，即得。

本品每瓶含总黄酮以羟基红花黄色素A（C27H30O15）计，应为72～88mg。

羟基红花黄色素A 照高效液相色谱法（中国药典2015年版通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基键合硅胶为填充剂，甲醇-乙腈-水-磷酸（20∶10∶70∶0.02）为流动相，检测波长为400nm。理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备精密称取羟基红花黄色素A对照品适量，加水制成每1ml含0.6mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品适量，精密称定，加水制成每1ml含1mg的溶液，微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。

测定法分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每瓶含羟基红花黄色素A（C27H30O15）应为56～78mg。

【功能与主治】活血、化瘀、通脉。用于冠心病稳定型劳累性心绞痛。中医辨证为心血瘀阻证，症见胸痛、胸闷、心悸。

【用法与用量】静脉滴注（滴速不高于30滴/分），每次1瓶（含红花总黄酮80mg），每日1次，加注射用生理盐水250ml溶解后使用，14天为一疗程。