紫外可见吸收光谱法基本原理1
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第二章 紫外－可见吸收光谱法分析法
第一节 基本原理
一、概述 二、紫外–可见吸收光谱 三、光的吸收定律
一、概述
光的基本性质
光是一种电磁波，具有波粒二象性。 单色光：单一波长的光(由具有相同能量的光子组成) 白光：由各种单色光组成的复合光
绿
黄
青
橙
白光
青蓝
红
蓝
紫
光的互补示意图
表2-1 物质颜色和吸收光颜色之间的关系
物质颜色
黄绿 黄 橙 红 紫红 紫 蓝 绿蓝 蓝绿
颜色 紫 蓝
绿蓝 蓝绿
绿 黄绿
黄 橙 红
吸收光 波长范围/nm 400-450 450-480 480-490 490-500 500-560 560-580 580-600 600-650 650-700
二、紫外–可见吸收光谱分析法
1.定义
光谱分析法是指在光的作用下，通过测量物质产生的发射 光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。
，吸收谱带强度较弱。分子中孤对电子和π键同时存在，同 时发生n →π＊ 跃迁。丙酮n →π＊跃迁的λ为275nm,εmax
为22 L·mol-1 ·cm -1（溶剂环己烷)。
生色团与助色团
生色团：
最有用的紫外-可见光谱是由π→π＊和n→π＊跃迁产生
的。这两种跃迁均要求有机物分子中含有不饱和基团。这类
A ∝b
• 1852年比尔(Beer)又提出了光的吸收程度与吸收物浓度之 间的关系。
A ∝c
• 二者的结合称为朗伯-比尔定律 A =εb c
朗伯–比尔定律数学表达式
A＝lg(I0/It) ＝ εb c 式中A：吸光度；描述溶液对光Байду номын сангаас吸收程度；（A无单位）
b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位；
（5）εmax越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物
质的灵敏度越高。
通常，在λmax处：
ε﹥ 105
超高灵敏的方法
ε＝（6～10）×104 高灵敏的方法
ε＝（2～6）× 104 中灵敏的方法
ε﹤ 2 × 104
不灵敏的方法
（6）可作为定性鉴定的参数；
2.透光度T
透过度T: 描述入射光透过
吸收光谱与电子跃迁
1．紫外—可见吸收光谱
有机化合物的紫外-可见吸收光谱，是其分子中外层价
电子跃迁的结果（三种）：σ电子、π电子、n电子。
分子轨道理论：一个成键轨 道必定有一个相应的反键轨 道。通常外层电子均处于分 子轨道的基态，即成键轨道 或非键轨道上。
外层电子吸收紫外或可见光后，就从基态向激发态(反
朗伯-比尔定律只适用于稀溶液。 (4)为克服非单色光引起的偏离，首先应选择比较好的单色器。
此外还应将入射光波长选定在待测物质的最大吸收波长且吸收曲线 较平坦处。
(2) 化学性因素
• 朗白-比尔定律的假定：所有的吸光质点之间不发生相互作
用；此假定只有在稀溶液(c < 10-2mol/L)时才基本符合。 当溶液浓度c >10-2 mol/L 时，吸光质点间可能发生缔合等相
⑵n →σ＊跃迁
所需能量较大。吸收波长为150～250nm，大部分在远紫 外区，近紫外区仍不易观察到。含非键电子的饱和烃衍生物(
含N、O、S和卤素等杂原子)均呈现n →σ*跃迁。如一氯甲烷 、甲醇、三甲基胺n →σ*跃迁的λ分别为173nm、183nm和
227nm。
⑶π→π＊跃迁
所需能量较小，吸收波长处于远紫外区的近紫外端或近
紫外区，摩尔吸光系数εmax一般在104L·mol-1·cm-1以上，属于
强吸收。不饱和烃、共轭烯烃和芳香烃类均可发生该类跃迁
。如：乙烯π→π*跃迁的λ为162 nm， εmax为: 1×104 L·mol-1·cm-1。
⑷ n →π＊跃迁
需能量最低，吸收波长λ>200nm。这类跃迁在跃迁选律 上属于禁阻跃迁，摩尔吸光系数一般为10～100L·mol-1·cm-1
含有π键等不饱和基团称为生色团。简单的生色团由双键或
叁键体系组成，如乙烯基、羰基、亚硝基、偶氮基-N＝N-、 乙炔基、腈基-C㆔N等。 助色团：
有一些含有n电子的基团(如-OH、-OR、-NH２、-NHR、-X 等)，它们本身没有生色功能(不能吸收λ>200nm的光)，但 当它们与生色团相连时，就会发生n-π共轭作用，增强生色
度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。
摩尔吸收系数ε的讨论
（1） ε在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在 某一波长下的吸光度。 （2）吸收物质是在一定温度、波长和溶剂条件下的特征常数。
（3）不随浓度c和光程长度b的改变而改变。ε 仅与吸收物质本
身的性质有关，与待测物浓度无关； （4）同一吸收物质在不同波长下的ε值是不同的。在最大吸收波 长λmax处的摩尔吸光系数，常以εmax表示。εmax表明了该吸收物质 最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最 大灵敏度。
（1）物理性因素
朗白-比尔定律的前提条件之一是入射光为单色光。
难以获得真正的纯单色光。
分光光度计只能获得近似于单色的狭窄光带。复合光可导 致对朗伯-比尔定律的正或负偏离。
非单色光、杂散光、非平行入射光都 会引起对朗白-比尔定律的偏离，最主要的 是非单色光作为入射光引起的偏离。
非单色光作为入射光引起的偏离
假设由波长为λ1和λ2的两单色光 组成的入射光通过浓度为c的溶液，则：
A 1 ＝ lg(Ｉo1 /Ｉt1 ）＝ε1bc
A 2 ＝ lg(Ｉo2 /Ｉt2 ）＝ε2bc
故：
It1 IO1 10ε 1bc ;
It2
I 10ε 2bc O1
式中：Ｉo1、Ｉo2分别为λ1、λ2 的入射光强度； Ｉt1、Ｉt2分别为λ1、λ2 的透射光强度；
ε1、ε2分别为λ1、λ2的摩尔吸光系数； 因实际上只能测总吸光度A总，并不能分别测得A1和A2，故
A总 ＝ lg(Io总/It总 ) ＝lg(Io1+Io2)/(It1+It2） ＝ lg(Io1+Io2)/(Io110 -ε1bc +Io210-ε2bc )
令： ε2 –ε1 ＝ ； Io1 ＝Io2 A总 ＝ lg(2Io1)/It1(1＋10- bc ) ＝ A1 + lg2 - lg(1＋10- bc )
用不同波长的单色光照射，吸收曲线—测吸光度与吸收波
长之间的关系。
吸收曲线的讨论：
（1）同一种物质对不同波长的光 的吸光度不同。吸光度最大处对应的
波长称为最大吸收波长λ max
（2）不同浓度的同一种物质，其 吸收曲线形状相似，λ max不变。而 对于不同物质，它们的吸收曲线形状 和λ max则不同。
（b) 使用5cm的吸收池时溶液的百分透光度。
解：
应用举例
某有色物质溶液的浓度为4.5×10-3g·L-1,在530nm 波长下用2.0cm的吸收池所测得的吸光度为0.300，试 计算(a)吸收系数；(b)使用5cm的吸收池时溶液的百分 透光度。 解： （a）a=A/bc=0.300/2.0×4.5×10-3=33.3L·g-1·cm-1
（3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一.
（4）不同浓度的同一种物质，在每一波长下吸光度 A 有差异，在λ max处吸 光度A 的差异最大，所以测定最灵敏，此特性可作为物质定量分析的依据。
3.紫外-可见吸收光谱与电子跃迁的关系
物质分子内部三种运动形式： （1）电子相对于原子核的运动 （2）原子核在其平衡位置附近的相对振动 （3）分子本身绕其重心的转动
在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的 分析方法称为吸光光度法。
本章主要讲授紫外-可见吸光光度法。
2.物质对光的选择性吸收及其吸收曲线
M + h M*
基态
激发态
E1 （△E）
E2
E = E2 - E1 = h
量子化；选择性吸收; 分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度不同；
分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能级 三种能级都是量子化的，且各自具有相应的能量。 分子的内能：电子能量Ee 、振动能量Ev 、转动能量Er
即 E ＝ Ee + Ev + Er Εe>Εv>Εr
能级跃迁
紫外-可见光谱属 于电子跃迁光谱。
电子能级间跃迁的 同时总伴随有振动和转 动能级间的跃迁。即电 子光谱中总包含有振动 能级和转动能级间跃迁 产生的若干谱线而呈现 宽谱带。
c 轴弯曲，即负偏离；反之，则向A轴弯曲，即正偏离。
讨论:
A总 =A1 + lg2 - lg(1＋10-ε bc )
(3)｜｜很小时，即ε1≈ε2：
可近似认为是单色光。在低浓度范围内，不发生偏离。若浓度
较高，即使｜｜很小，A总≠Ａ1 ，且随着c值增大， A总与A1的差
异愈大，在图上则表现为A-c曲线上部(高浓度区)弯曲愈严重。故
键轨道)跃迁。主要有四种跃迁所需能量ΔΕ大小顺序为：
n →π＊ < π→π＊ < n →σ＊ < σ→σ＊
n →π＊ < π→π＊ < n →σ＊ < σ→σ＊
⑴σ→σ＊跃迁
所需能量最大，σ电子只有吸收远紫外光的能量才能发生 跃迁。饱和烷烃的分子吸收光谱出现在远紫外区(吸收波长
λ<200nm，只能被真空紫外分光光度计检测到)。如甲烷的λ 为125nm,乙烷λmax为135nm。
溶液的程度:
T = It /I0 吸光度A与透光度T的关系:
A = -lgT
朗伯-比尔定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。应
用于各种光度法的吸收测量。
应用举例
某有色物质溶液的浓度为4.5×10-3g·L-1,在530nm 波长下用2.0cm的吸收池所测得的吸光度为0.300，试 计算
（a）吸收系数；
团的生色能力(吸收波长向长波方向移动，且吸收强度增加) ，这样的基团称为助色团。
红移和蓝移
有机化合物的吸收谱带常常因 引入取代基或改变溶剂使最大吸收
波长λmax和吸收强度发生变化: λmax向长波方向移动称为红移
，向短波方向移动称为蓝移。
吸收强度即摩尔吸光系数ε增
大或减小的现象分别称为增色效应 或减色效应，如图所示。
4. 定性和定量分析依据
（1）定性分析依据： 可根据吸收光谱曲线的形状，即曲线上吸收峰的数
目，峰所对应的波长及峰的相对高度来进行定性分析。 （2）定量分析的依据：
根据某一特征峰的高度与物质浓度成正比的关系来 进行定量分析。 A＝lg(I0/It)= εb c
三、光的吸收定律
1.朗白-比尔定律
• 布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐 明了光的吸收程度与吸收层厚度的关系。
讨论如下:
讨论:
A总 =A1 + lg2 - lg(1＋10-εbc )
(1) = 0； 即： 1= 2 =
则： A总 ＝lg（Ｉo/Ｉt）＝ bc
(2) ≠0 若 <0 ；即 2< 1 ； - bc>0,
lg(1＋10 - bc )值随c值增大而增大，则标准曲线偏离直线向
（b）T=10-ab’c=10-A’ T%=10-ab’c×100％=10-A’×100％=17.81％
3. 朗伯-比尔定律偏离的原因
标准曲线法测定未知溶液的浓度 时，发现：标准曲线常发生弯曲(尤 其当溶液浓度较高时)，这种现象称 为对朗伯-比尔定律的偏离。
引起这种偏离的因素（两大类）： （1）物理性因素， （2）化学性因素。
c：溶液的摩尔浓度，单位 mol·L-1；
ε：摩尔吸光系数，单位L·mol-1·cm-1；在数值上等于浓度为
1mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度；
或:
A＝lg(I0/It) ＝ a b c
c：溶液的浓度，单位 g·L-1
（A无单位）
a：吸光系数，单位 L·g-1·cm-1，相当于浓度为1g/L、液层厚
互作用，直接影响了对光的吸收。 • 故：朗伯-比尔定律只适用于稀溶液。
溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学 平衡时。使吸光质点的浓度发生变化，影响吸光度。 例：铬酸盐和重铬酸盐溶液中存在下列平衡：
CrO42- ＋ 2H＋ = Cr2O72- ＋ H2O 溶液中CrO42-、Cr2O72-的颜色不同，吸光性质也不相同。故此 时溶液pH对测定有重要影响。
第一节 基本原理
一、概述 二、紫外–可见吸收光谱 三、光的吸收定律
一、概述
光的基本性质
光是一种电磁波，具有波粒二象性。 单色光：单一波长的光(由具有相同能量的光子组成) 白光：由各种单色光组成的复合光
绿
黄
青
橙
白光
青蓝
红
蓝
紫
光的互补示意图
表2-1 物质颜色和吸收光颜色之间的关系
物质颜色
黄绿 黄 橙 红 紫红 紫 蓝 绿蓝 蓝绿
颜色 紫 蓝
绿蓝 蓝绿
绿 黄绿
黄 橙 红
吸收光 波长范围/nm 400-450 450-480 480-490 490-500 500-560 560-580 580-600 600-650 650-700
二、紫外–可见吸收光谱分析法
1.定义
光谱分析法是指在光的作用下，通过测量物质产生的发射 光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。
，吸收谱带强度较弱。分子中孤对电子和π键同时存在，同 时发生n →π＊ 跃迁。丙酮n →π＊跃迁的λ为275nm,εmax
为22 L·mol-1 ·cm -1（溶剂环己烷)。
生色团与助色团
生色团：
最有用的紫外-可见光谱是由π→π＊和n→π＊跃迁产生
的。这两种跃迁均要求有机物分子中含有不饱和基团。这类
A ∝b
• 1852年比尔(Beer)又提出了光的吸收程度与吸收物浓度之 间的关系。
A ∝c
• 二者的结合称为朗伯-比尔定律 A =εb c
朗伯–比尔定律数学表达式
A＝lg(I0/It) ＝ εb c 式中A：吸光度；描述溶液对光Байду номын сангаас吸收程度；（A无单位）
b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位；
（5）εmax越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物
质的灵敏度越高。
通常，在λmax处：
ε﹥ 105
超高灵敏的方法
ε＝（6～10）×104 高灵敏的方法
ε＝（2～6）× 104 中灵敏的方法
ε﹤ 2 × 104
不灵敏的方法
（6）可作为定性鉴定的参数；
2.透光度T
透过度T: 描述入射光透过
吸收光谱与电子跃迁
1．紫外—可见吸收光谱
有机化合物的紫外-可见吸收光谱，是其分子中外层价
电子跃迁的结果（三种）：σ电子、π电子、n电子。
分子轨道理论：一个成键轨 道必定有一个相应的反键轨 道。通常外层电子均处于分 子轨道的基态，即成键轨道 或非键轨道上。
外层电子吸收紫外或可见光后，就从基态向激发态(反
朗伯-比尔定律只适用于稀溶液。 (4)为克服非单色光引起的偏离，首先应选择比较好的单色器。
此外还应将入射光波长选定在待测物质的最大吸收波长且吸收曲线 较平坦处。
(2) 化学性因素
• 朗白-比尔定律的假定：所有的吸光质点之间不发生相互作
用；此假定只有在稀溶液(c < 10-2mol/L)时才基本符合。 当溶液浓度c >10-2 mol/L 时，吸光质点间可能发生缔合等相
⑵n →σ＊跃迁
所需能量较大。吸收波长为150～250nm，大部分在远紫 外区，近紫外区仍不易观察到。含非键电子的饱和烃衍生物(
含N、O、S和卤素等杂原子)均呈现n →σ*跃迁。如一氯甲烷 、甲醇、三甲基胺n →σ*跃迁的λ分别为173nm、183nm和
227nm。
⑶π→π＊跃迁
所需能量较小，吸收波长处于远紫外区的近紫外端或近
紫外区，摩尔吸光系数εmax一般在104L·mol-1·cm-1以上，属于
强吸收。不饱和烃、共轭烯烃和芳香烃类均可发生该类跃迁
。如：乙烯π→π*跃迁的λ为162 nm， εmax为: 1×104 L·mol-1·cm-1。
⑷ n →π＊跃迁
需能量最低，吸收波长λ>200nm。这类跃迁在跃迁选律 上属于禁阻跃迁，摩尔吸光系数一般为10～100L·mol-1·cm-1
含有π键等不饱和基团称为生色团。简单的生色团由双键或
叁键体系组成，如乙烯基、羰基、亚硝基、偶氮基-N＝N-、 乙炔基、腈基-C㆔N等。 助色团：
有一些含有n电子的基团(如-OH、-OR、-NH２、-NHR、-X 等)，它们本身没有生色功能(不能吸收λ>200nm的光)，但 当它们与生色团相连时，就会发生n-π共轭作用，增强生色
度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。
摩尔吸收系数ε的讨论
（1） ε在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在 某一波长下的吸光度。 （2）吸收物质是在一定温度、波长和溶剂条件下的特征常数。
（3）不随浓度c和光程长度b的改变而改变。ε 仅与吸收物质本
身的性质有关，与待测物浓度无关； （4）同一吸收物质在不同波长下的ε值是不同的。在最大吸收波 长λmax处的摩尔吸光系数，常以εmax表示。εmax表明了该吸收物质 最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最 大灵敏度。
（1）物理性因素
朗白-比尔定律的前提条件之一是入射光为单色光。
难以获得真正的纯单色光。
分光光度计只能获得近似于单色的狭窄光带。复合光可导 致对朗伯-比尔定律的正或负偏离。
非单色光、杂散光、非平行入射光都 会引起对朗白-比尔定律的偏离，最主要的 是非单色光作为入射光引起的偏离。
非单色光作为入射光引起的偏离
假设由波长为λ1和λ2的两单色光 组成的入射光通过浓度为c的溶液，则：
A 1 ＝ lg(Ｉo1 /Ｉt1 ）＝ε1bc
A 2 ＝ lg(Ｉo2 /Ｉt2 ）＝ε2bc
故：
It1 IO1 10ε 1bc ;
It2
I 10ε 2bc O1
式中：Ｉo1、Ｉo2分别为λ1、λ2 的入射光强度； Ｉt1、Ｉt2分别为λ1、λ2 的透射光强度；
ε1、ε2分别为λ1、λ2的摩尔吸光系数； 因实际上只能测总吸光度A总，并不能分别测得A1和A2，故
A总 ＝ lg(Io总/It总 ) ＝lg(Io1+Io2)/(It1+It2） ＝ lg(Io1+Io2)/(Io110 -ε1bc +Io210-ε2bc )
令： ε2 –ε1 ＝ ； Io1 ＝Io2 A总 ＝ lg(2Io1)/It1(1＋10- bc ) ＝ A1 + lg2 - lg(1＋10- bc )
用不同波长的单色光照射，吸收曲线—测吸光度与吸收波
长之间的关系。
吸收曲线的讨论：
（1）同一种物质对不同波长的光 的吸光度不同。吸光度最大处对应的
波长称为最大吸收波长λ max
（2）不同浓度的同一种物质，其 吸收曲线形状相似，λ max不变。而 对于不同物质，它们的吸收曲线形状 和λ max则不同。
（b) 使用5cm的吸收池时溶液的百分透光度。
解：
应用举例
某有色物质溶液的浓度为4.5×10-3g·L-1,在530nm 波长下用2.0cm的吸收池所测得的吸光度为0.300，试 计算(a)吸收系数；(b)使用5cm的吸收池时溶液的百分 透光度。 解： （a）a=A/bc=0.300/2.0×4.5×10-3=33.3L·g-1·cm-1
（3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一.
（4）不同浓度的同一种物质，在每一波长下吸光度 A 有差异，在λ max处吸 光度A 的差异最大，所以测定最灵敏，此特性可作为物质定量分析的依据。
3.紫外-可见吸收光谱与电子跃迁的关系
物质分子内部三种运动形式： （1）电子相对于原子核的运动 （2）原子核在其平衡位置附近的相对振动 （3）分子本身绕其重心的转动
在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的 分析方法称为吸光光度法。
本章主要讲授紫外-可见吸光光度法。
2.物质对光的选择性吸收及其吸收曲线
M + h M*
基态
激发态
E1 （△E）
E2
E = E2 - E1 = h
量子化；选择性吸收; 分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度不同；
分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能级 三种能级都是量子化的，且各自具有相应的能量。 分子的内能：电子能量Ee 、振动能量Ev 、转动能量Er
即 E ＝ Ee + Ev + Er Εe>Εv>Εr
能级跃迁
紫外-可见光谱属 于电子跃迁光谱。
电子能级间跃迁的 同时总伴随有振动和转 动能级间的跃迁。即电 子光谱中总包含有振动 能级和转动能级间跃迁 产生的若干谱线而呈现 宽谱带。
c 轴弯曲，即负偏离；反之，则向A轴弯曲，即正偏离。
讨论:
A总 =A1 + lg2 - lg(1＋10-ε bc )
(3)｜｜很小时，即ε1≈ε2：
可近似认为是单色光。在低浓度范围内，不发生偏离。若浓度
较高，即使｜｜很小，A总≠Ａ1 ，且随着c值增大， A总与A1的差
异愈大，在图上则表现为A-c曲线上部(高浓度区)弯曲愈严重。故
键轨道)跃迁。主要有四种跃迁所需能量ΔΕ大小顺序为：
n →π＊ < π→π＊ < n →σ＊ < σ→σ＊
n →π＊ < π→π＊ < n →σ＊ < σ→σ＊
⑴σ→σ＊跃迁
所需能量最大，σ电子只有吸收远紫外光的能量才能发生 跃迁。饱和烷烃的分子吸收光谱出现在远紫外区(吸收波长
λ<200nm，只能被真空紫外分光光度计检测到)。如甲烷的λ 为125nm,乙烷λmax为135nm。
溶液的程度:
T = It /I0 吸光度A与透光度T的关系:
A = -lgT
朗伯-比尔定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。应
用于各种光度法的吸收测量。
应用举例
某有色物质溶液的浓度为4.5×10-3g·L-1,在530nm 波长下用2.0cm的吸收池所测得的吸光度为0.300，试 计算
（a）吸收系数；
团的生色能力(吸收波长向长波方向移动，且吸收强度增加) ，这样的基团称为助色团。
红移和蓝移
有机化合物的吸收谱带常常因 引入取代基或改变溶剂使最大吸收
波长λmax和吸收强度发生变化: λmax向长波方向移动称为红移
，向短波方向移动称为蓝移。
吸收强度即摩尔吸光系数ε增
大或减小的现象分别称为增色效应 或减色效应，如图所示。
4. 定性和定量分析依据
（1）定性分析依据： 可根据吸收光谱曲线的形状，即曲线上吸收峰的数
目，峰所对应的波长及峰的相对高度来进行定性分析。 （2）定量分析的依据：
根据某一特征峰的高度与物质浓度成正比的关系来 进行定量分析。 A＝lg(I0/It)= εb c
三、光的吸收定律
1.朗白-比尔定律
• 布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐 明了光的吸收程度与吸收层厚度的关系。
讨论如下:
讨论:
A总 =A1 + lg2 - lg(1＋10-εbc )
(1) = 0； 即： 1= 2 =
则： A总 ＝lg（Ｉo/Ｉt）＝ bc
(2) ≠0 若 <0 ；即 2< 1 ； - bc>0,
lg(1＋10 - bc )值随c值增大而增大，则标准曲线偏离直线向
（b）T=10-ab’c=10-A’ T%=10-ab’c×100％=10-A’×100％=17.81％
3. 朗伯-比尔定律偏离的原因
标准曲线法测定未知溶液的浓度 时，发现：标准曲线常发生弯曲(尤 其当溶液浓度较高时)，这种现象称 为对朗伯-比尔定律的偏离。
引起这种偏离的因素（两大类）： （1）物理性因素， （2）化学性因素。
c：溶液的摩尔浓度，单位 mol·L-1；
ε：摩尔吸光系数，单位L·mol-1·cm-1；在数值上等于浓度为
1mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度；
或:
A＝lg(I0/It) ＝ a b c
c：溶液的浓度，单位 g·L-1
（A无单位）
a：吸光系数，单位 L·g-1·cm-1，相当于浓度为1g/L、液层厚
互作用，直接影响了对光的吸收。 • 故：朗伯-比尔定律只适用于稀溶液。
溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学 平衡时。使吸光质点的浓度发生变化，影响吸光度。 例：铬酸盐和重铬酸盐溶液中存在下列平衡：
CrO42- ＋ 2H＋ = Cr2O72- ＋ H2O 溶液中CrO42-、Cr2O72-的颜色不同，吸光性质也不相同。故此 时溶液pH对测定有重要影响。