微生物复习

第一章原核生物的形态、构造和功能

2、试图示G+细菌和G-细菌细胞壁的主要构造，并简要说明其异同。

答：图示：

G+细菌与G-细菌细胞壁成分的比较：

占细胞壁干重的%

成分

G+细菌G-细菌

肽聚糖含量很高（一般为90%）含量很低（5～20）

磷壁酸含量较高（﹤30）0

脂质一般无（﹤2）含量较高（约20）

蛋白质0～少量含量较高

3、试述革兰氏染色的机制。

答：革兰氏染色的机制为：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。G+由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使网孔缩小，在加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。反之，G-细菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此细胞退成无色。这时，再经沙黄等红色染料复染，就使G-细菌呈现红色，而G+细菌则仍保留最初的紫色（实为紫加红色）。

重要性：此法证明了G+和G-主要由于起细胞壁化学成分的差异而引起了物理特性的不同而使染色反应不同，是一种积极重要的鉴别染色法，不仅可以用与鉴别真细菌，也可鉴别古生菌。

4、何为“拴菌试验”？它的创新思维在何处？

答：“拴菌”试验是1974年，美国学者西佛曼和西蒙曾设计的一个实验，做法是：设法把单毛菌鞭毛的游离端用相应抗体牢牢“拴”在载玻片上，然后在光学显微镜下观察细胞的行为。

因实验结果发现，该菌只能在载玻片上不断打转而未作伸缩“挥动”，故肯定了“旋转论”是正确的。6、什么是缺壁细菌？试列表比较4类缺壁细菌的形成、特点和实践意义。

答：在自然界长期进化中和实验室菌种的自发突变中都会产生少数缺细胞壁的种类，或是用人为的方法通过抑制新生细胞壁的合成或对现成细胞壁进行酶解而获得人工缺壁的细菌统称为缺壁细菌。

比较如下：

第二章 真核微生物的形态，构造和功能

3、试对酵母菌的繁殖方式做一表解。

无性繁殖

芽殖 各属酵母菌都存在 裂殖

在裂殖酵母菌中存在

产无性孢子

节孢子 地霉属等产生 掷孢子 掷孢酵母属等产生 厚垣孢子

白假丝酵母等产生

有性繁殖 （产子囊孢子）

酵母属、接合酵母属等有

4、试以表解法介绍霉菌的营养菌丝和气生菌丝各可分化成哪些特化构造，并简要说明它们的功能。。

7、试列表比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，并提出制备相应原生质体的酶或试剂。 答：细菌分为G+和G-，G+肽聚糖含量高，G-含量低；G+磷壁酸含量较高，而G-不含磷壁酸；G+类脂质一般无，而G-含量较高；G+不含蛋白质，G-含量较高。放线菌为G-，其细胞壁具有G-所具有的特点。酵母菌和霉菌为真菌，酵母菌的细胞壁外层为甘露聚糖，内层为葡聚糖；而霉菌的细胞壁成分为几丁质、蛋白质、葡聚糖。

原生质体制备方法：

G+菌原生质体获得：青霉素、溶菌酶 G-菌原生质体获得：EDTA 鳌合剂处理，溶菌酶

类型 形成 特点 实践意义

L 型细菌

（L-form of

bacteria ）

在某些环境条件下（实验室或宿主体内）通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型 1、没有完整而坚韧的细胞壁，细胞

呈多形态。 2、有些能通过细菌滤器，故又称“滤过型细菌”。 3、对渗透敏感，在固体培养基上形成“油煎蛋”似的小菌落（直径在0.1mm 左右） 可能与针对细胞壁的抗菌治疗

有关

原生质体

（protoplast ） 在人为条件下，用溶菌酶处理或

在含青霉素的培养基中培养而抑

制新生细胞壁合成而形成的仅由

一层细胞膜包裹的，圆球形、对渗

透压变化敏感的细胞，一般由革兰

氏阳性细菌形成。

1、对环境条件变化敏感，低渗透压、

振荡、离心甚至通气等都易引起其破裂。 2、有的原生质体具有鞭毛，但不

能运动，也不被相应噬菌体所感染，在

适宜条件（如高渗培养基）可生长繁殖、

形成菌落，形成芽孢。及恢复成有细胞

壁的正常结构。 3、比正常有细胞壁的

细菌更易导入外源遗传物质，是研究遗

传规律和进行原生质体育种的良好实

验材料

球状体

(sphaeroplast) 又称原生质球，是对革兰氏阴性

细菌处理后而获得的残留部分细胞壁（外壁层）的球形体。与原生

质体相比，它对外界环境具有一定

的抗性，可在普通培养基上生长

支原体 (mycoplasma) 在长期进化过程中形成的、适应自然生活条件的无细胞壁的原核生物 细胞膜中含有一般原核生物所没有的甾醇， 所以即使缺乏细胞壁，其细

胞膜仍有较高的机械强度

放线菌原生质体获得：青霉素、溶菌酶

霉菌原生质体获得：纤维素酶

酵母菌原生质体获得：蜗牛消化酶

8、试列表比较四大类微生物的细胞形态和菌落特征。

项目

单细胞微生物丝状微生物

细菌酵母菌放线菌霉菌

细胞

核原核真核真核真核排列状况

单个分散或

有一定排列

方式

单个分散或假丝状丝状交织丝状交织形态特征

小而均匀*,

个别有芽孢

大而分化细而均匀粗而分化

菌落

含水状态很湿或较湿较湿干燥或较干燥干燥

外观形态

小而突起或

大而平坦

大而突起小而紧密大而疏松或大而致密透明度

透明或稍透

明

稍透明不透明不透明

与培养基结

合程度

不结合不结合牢固较牢固颜色多样

单调,一般呈乳白

色,少数红或黑色

多样多样

正反面颜色

差别

无无有有

边缘

低倍镜观察

一般看不到

细胞

可见球状,卵圆状或

假丝状细胞

有时可见细丝

状细胞

可见粗线状细胞细胞生长速度很快较快慢较快气味一般有臭味多带酒香味常有泥腥味往往有霉味

（*“均匀”指在高倍镜下看到的细胞只是均匀一团；而“分化”指可看到细胞内部的一些模糊结构。）