阳离子脂质体制备

阳离子脂质体制备
阳离子脂质体制备
一、原料准备
1、抗原：已经纯化的、经过酶联免疫吸附测定法和细胞膜抗体校正法鉴定的标准化的预抗原（有些蛋白质在细胞膜上表达，需要细胞膜抗体校正）；
2、表位蛋白：纯化的、标准化并且经过蛋白质印迹证实的表位蛋白；
3、磷脂单体：乙腈溶解的椰子油中的磷脂单体；
4、厌氧细菌：经过特定条件培养出的厌氧细菌；
5、其他材料：抗酶标准溶液、双盐缓冲液、低渗透调节液、注射用水。

二、制备过程
1、将抗原稀释成抗原溶液（稀释以抗原在预测应用中的浓度为准）；
2、将磷脂单体稀释为预混合溶液；
3、将预混合溶液和表位蛋白配比搅拌均匀，经低渗透调节液调整至pH为7.4；
4、加入厌氧细菌，混合均匀，经双盐缓冲液调整至pH为
6.5，在4℃下孵育2小时；
5、加入抗酶标准溶液，稀释成注射用水，隔夜稳定，稀释200倍，制备抗原脂质体；
6、处理抗原脂质体，过滤、反渗、离心、冻干等，最终成品为经免疫动力学筛选的抗原脂质体。

三、注意事项
1、抗原溶液、磷脂单体混合溶液必须经双盐缓冲液调整至
pH7.4；
2、添加厌氧细菌时，要将pH值再次调整至6.5；
3、厌氧细菌处理时，一定要注意相应的条件控制（温度、时间等）；
4、抗原脂质体溶液稀释至最终用于动物接种的容量时，要用抗酶标准溶液抗击抗酶活性；
5、抗原脂质体制备完成后，一定要进行质量控制，保证其高品质；
6、抗原脂质体应尽快使用，避免变质；
7、在处理时，要注意清洁卫生。