优选第二章血液一般检验红细胞检验
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A/44×64458（mg）/1000×251=A×367.7
但在实际工作中，一般实验室的分光 光度计达不到WHO规定的标准条件，所以利用 Hb参考液制备标准曲线，或算K (K=∑Hb/∑A)值 ，间接计算出Hb（G/L）。
氰化高铁血红蛋白法转化液作用及评价
氰化高铁血红蛋白法（HiCN法）质量保证
人为原因造成的红细胞形态异常
人为原因
红细胞形态异常
涂片不当
棘形红细胞、皱缩红细胞、红细 胞缗钱状形成等
使用非疏水性玻片
口形红细胞
染色不当
嗜多色红细胞
抗凝剂EDTA浓度过高，或长 锯齿状红细胞 时间放置血液
涂片干燥过慢，或由于固定 面包圈形红细胞 液中混有少许水分
涂片末端附近
长轴方向一致的假椭圆形红细胞
血红蛋白由4条多肽链组成，每条有1个分子的亚铁血红素。组成 Hb的多肽链分为α和非α两大类：①α类链：α，ζ和θ链； ②非α链：β，δ，γ，ε链。α链由141个氨基酸组成，β 链由146个氨基酸组成。
2、珠蛋白肽链有三种形式： HbA（α2ß2），成人主要血红蛋白，约97%。 HbA2（α2δ2），成人次要血红蛋白，约2-3%。 HbF（α2γ2），胎儿血红蛋白，约2%。
3.亚铁血红素结构式
Fe2+有6个配位键， 4个与原卟啉环连接， 1个与珠蛋白连接， 1个与O2结合。
（二）.Hb的合成及代谢
1.Hb的合成受激素的调节,激素有两种.一是红 细胞生成素,二是雄激素。
2.正常情况下，血红蛋白主要为HbO2和 Hbred，还有少量HbCO 和 Hi。
3.血红蛋白分子降解为珠蛋白和血红素。血红 素中大部分铁由单核-吞噬细胞系统细胞加工 处理后，再重新回到循环血液中 。
3、比色法 光电比色法：常用，有HiCN、SDS-Hb
1966年国际血液学委员会 HiCN是测定Hb的标准方法 也是参考方法（WHO）
氰化高铁血红蛋白法（HiCN法）
1.检测原理
血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各种血红蛋白均可被 高 铁 氰 化 钾 氧 化 成 高 铁 血 红 蛋 白 （ Hi），Hi与 氰 化 钾 的 氰 根 （CN-）生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白（HiCN）。其在 540nm有吸收峰。特定标准条件下，其毫摩尔消光系数为 44L/（mmol.cm），可测得 吸光度并计算Hb（g/L）。
Hb测定方法学评价
RBC和Hb临床意义
参考值：
Hb： 成年男: 120 ～ 160 g/L 成年女: 110 ～ 150 g/L 新生儿：180～190 g/L
RBC： （4.0～ 5.5）X1012/L （3.5 ～ 5.0）X1012/
(6.0～7.0)×1012/L
RBC、Hb临床意义：
（一）、RBC正常形态
• 直径6~9.5µm，平均7.2µm，厚度2µm。 • 瑞氏染色成淡红色，中央1/3为生理性淡
染区，胞内无特殊结构。
• 外观：双凹圆盘状，大小相似。
正常形态红细胞图
正常形态红细胞扫描电镜图
（二）、RBC异常形态
（1）红细胞大小改变 （2）红细胞形态改变 （3）红细胞内血红蛋白含量改变 （4）红细胞内结构改变
生理变化
（1）年龄与性别的差异；初生 2周男6-7岁25-30岁 （2）精神因素； （3）剧烈的体力劳动； （4）气压降低； （5）长期多次献血者红细胞亦可代偿性增多； （6）生理性贫血。
RBC、Hb临床意义：
• 病理变化-------增多：
相对性增多：因脱水血液浓缩所致；
如剧烈呕吐、大面积烧伤、出汗、多尿、慢性肾上腺皮质 功能减退、尿崩症、甲状腺功能亢进等。
(四)、临床意义
二 . 血红蛋白测定
（Hemoglobin Hb）
Hemoglobin :是一种微红色的胶体物质， 是一种呼吸载ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ,由珠蛋白和亚铁血红素组 成，其相对分子质量为64458。
(一) .Hb的结构
1、血红蛋白由珠蛋白和亚铁血红素组成，分子量为64458，它是 一种呼吸载体，每克血红蛋白可携带氧1.34ml。
（三）. 血红蛋白Hb测定
即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。 （xx g/L）
血液中血红蛋白以各种形式存在，包括 氧合血红蛋白、碳氧血红蛋白、高铁血红 蛋白或其他衍生物。
Hb测定的方法
1、 测铁法：1gHb—3.47mgFe 2、 测氧法：1gHb—1.34mlO2
此两种方法较准确，但不易操作。 目光比色法：沙利氏法，现已淘汰。
优选第二章血液一般检验红细 胞检验
1
一.红细胞计数red blood cell,RBC
(一)、原理
1.显微镜计数法:用等渗稀释液将血液稀释一定倍数后， 滴入血细胞计数盘，然后于显微镜下，计数一定范围内 的红细胞数，经过换算即可求得每升血液中红细胞数。 （XXX ×1012/L） 2.血液分析仪法:电阻抗或流式细胞术激光检测法原理
继发增多：组织缺氧、促红细胞生成素代偿性增多所致 。
如法洛四联症、紫绀型先天性心脏病、阻塞性肺气肿、肺源性心 脏病、肺动-静脉瘘以及携氧能力低的异常血红蛋白病等。
原发增多：真性红细胞增多症，多能造血干细胞受累所 致。
RBC、Hb临床意义：
• 病理变化------减少：
• 一般成年男性血红蛋白＜120g/L,成年女性血红蛋白＜110g/L，红细胞 ＜ 3.5 X1012/L为贫血。
• 根据血红蛋白减低的程度贫血可分为四级。 轻度： 90g／L <血红蛋白<120g／L、 中度：血红蛋白60～90g／L、 重度：血红蛋白30～60g／L、 极度：血红蛋白＜30g/L。 当RBC＜1.5×1012/L，Hb＜45g/L时，应考虑输血
三.红细胞形态检查
红细胞形态检查的检测常用方法
（1）大小异常：
①小红细胞microcyte ：直径小于6µm。
见于：缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血。
(二)、质量保证:技术、仪器、分布误差 （三）、参考值
成年男性：(4.0～5.5)×1012/L 成年女性：(3.5～5.0)×1012/L 新生儿： (6.0～7.0)×1012/L 医学决定水平：高于6.8×1012/L，应采取相应治疗措施；
低于3.5×1012/L可诊断贫血； 低于1.5×1012/L应考虑输血
但在实际工作中，一般实验室的分光 光度计达不到WHO规定的标准条件，所以利用 Hb参考液制备标准曲线，或算K (K=∑Hb/∑A)值 ，间接计算出Hb（G/L）。
氰化高铁血红蛋白法转化液作用及评价
氰化高铁血红蛋白法（HiCN法）质量保证
人为原因造成的红细胞形态异常
人为原因
红细胞形态异常
涂片不当
棘形红细胞、皱缩红细胞、红细 胞缗钱状形成等
使用非疏水性玻片
口形红细胞
染色不当
嗜多色红细胞
抗凝剂EDTA浓度过高，或长 锯齿状红细胞 时间放置血液
涂片干燥过慢，或由于固定 面包圈形红细胞 液中混有少许水分
涂片末端附近
长轴方向一致的假椭圆形红细胞
血红蛋白由4条多肽链组成，每条有1个分子的亚铁血红素。组成 Hb的多肽链分为α和非α两大类：①α类链：α，ζ和θ链； ②非α链：β，δ，γ，ε链。α链由141个氨基酸组成，β 链由146个氨基酸组成。
2、珠蛋白肽链有三种形式： HbA（α2ß2），成人主要血红蛋白，约97%。 HbA2（α2δ2），成人次要血红蛋白，约2-3%。 HbF（α2γ2），胎儿血红蛋白，约2%。
3.亚铁血红素结构式
Fe2+有6个配位键， 4个与原卟啉环连接， 1个与珠蛋白连接， 1个与O2结合。
（二）.Hb的合成及代谢
1.Hb的合成受激素的调节,激素有两种.一是红 细胞生成素,二是雄激素。
2.正常情况下，血红蛋白主要为HbO2和 Hbred，还有少量HbCO 和 Hi。
3.血红蛋白分子降解为珠蛋白和血红素。血红 素中大部分铁由单核-吞噬细胞系统细胞加工 处理后，再重新回到循环血液中 。
3、比色法 光电比色法：常用，有HiCN、SDS-Hb
1966年国际血液学委员会 HiCN是测定Hb的标准方法 也是参考方法（WHO）
氰化高铁血红蛋白法（HiCN法）
1.检测原理
血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各种血红蛋白均可被 高 铁 氰 化 钾 氧 化 成 高 铁 血 红 蛋 白 （ Hi），Hi与 氰 化 钾 的 氰 根 （CN-）生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白（HiCN）。其在 540nm有吸收峰。特定标准条件下，其毫摩尔消光系数为 44L/（mmol.cm），可测得 吸光度并计算Hb（g/L）。
Hb测定方法学评价
RBC和Hb临床意义
参考值：
Hb： 成年男: 120 ～ 160 g/L 成年女: 110 ～ 150 g/L 新生儿：180～190 g/L
RBC： （4.0～ 5.5）X1012/L （3.5 ～ 5.0）X1012/
(6.0～7.0)×1012/L
RBC、Hb临床意义：
（一）、RBC正常形态
• 直径6~9.5µm，平均7.2µm，厚度2µm。 • 瑞氏染色成淡红色，中央1/3为生理性淡
染区，胞内无特殊结构。
• 外观：双凹圆盘状，大小相似。
正常形态红细胞图
正常形态红细胞扫描电镜图
（二）、RBC异常形态
（1）红细胞大小改变 （2）红细胞形态改变 （3）红细胞内血红蛋白含量改变 （4）红细胞内结构改变
生理变化
（1）年龄与性别的差异；初生 2周男6-7岁25-30岁 （2）精神因素； （3）剧烈的体力劳动； （4）气压降低； （5）长期多次献血者红细胞亦可代偿性增多； （6）生理性贫血。
RBC、Hb临床意义：
• 病理变化-------增多：
相对性增多：因脱水血液浓缩所致；
如剧烈呕吐、大面积烧伤、出汗、多尿、慢性肾上腺皮质 功能减退、尿崩症、甲状腺功能亢进等。
(四)、临床意义
二 . 血红蛋白测定
（Hemoglobin Hb）
Hemoglobin :是一种微红色的胶体物质， 是一种呼吸载ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ,由珠蛋白和亚铁血红素组 成，其相对分子质量为64458。
(一) .Hb的结构
1、血红蛋白由珠蛋白和亚铁血红素组成，分子量为64458，它是 一种呼吸载体，每克血红蛋白可携带氧1.34ml。
（三）. 血红蛋白Hb测定
即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。 （xx g/L）
血液中血红蛋白以各种形式存在，包括 氧合血红蛋白、碳氧血红蛋白、高铁血红 蛋白或其他衍生物。
Hb测定的方法
1、 测铁法：1gHb—3.47mgFe 2、 测氧法：1gHb—1.34mlO2
此两种方法较准确，但不易操作。 目光比色法：沙利氏法，现已淘汰。
优选第二章血液一般检验红细 胞检验
1
一.红细胞计数red blood cell,RBC
(一)、原理
1.显微镜计数法:用等渗稀释液将血液稀释一定倍数后， 滴入血细胞计数盘，然后于显微镜下，计数一定范围内 的红细胞数，经过换算即可求得每升血液中红细胞数。 （XXX ×1012/L） 2.血液分析仪法:电阻抗或流式细胞术激光检测法原理
继发增多：组织缺氧、促红细胞生成素代偿性增多所致 。
如法洛四联症、紫绀型先天性心脏病、阻塞性肺气肿、肺源性心 脏病、肺动-静脉瘘以及携氧能力低的异常血红蛋白病等。
原发增多：真性红细胞增多症，多能造血干细胞受累所 致。
RBC、Hb临床意义：
• 病理变化------减少：
• 一般成年男性血红蛋白＜120g/L,成年女性血红蛋白＜110g/L，红细胞 ＜ 3.5 X1012/L为贫血。
• 根据血红蛋白减低的程度贫血可分为四级。 轻度： 90g／L <血红蛋白<120g／L、 中度：血红蛋白60～90g／L、 重度：血红蛋白30～60g／L、 极度：血红蛋白＜30g/L。 当RBC＜1.5×1012/L，Hb＜45g/L时，应考虑输血
三.红细胞形态检查
红细胞形态检查的检测常用方法
（1）大小异常：
①小红细胞microcyte ：直径小于6µm。
见于：缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血。
(二)、质量保证:技术、仪器、分布误差 （三）、参考值
成年男性：(4.0～5.5)×1012/L 成年女性：(3.5～5.0)×1012/L 新生儿： (6.0～7.0)×1012/L 医学决定水平：高于6.8×1012/L，应采取相应治疗措施；
低于3.5×1012/L可诊断贫血； 低于1.5×1012/L应考虑输血