全血细胞计数

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5)MXD%[W-MCR(中型白细胞比率)]
中型白细胞数相对于全部白细胞数(WBC)的比率。
6)NEUT%[W-LCR(大型白细胞比率)]
大型白细胞数相对于全部白细胞数(WBC)的比率。
(2)白细胞粒度分布异常标志:
WL:低辨别线(LD)的相对度数超过规定值。可认为是血小板凝聚或含有多数大型血小板的原因。
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1.全血细胞分析(血常规)检测
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因素条件下进行。
(2)标本采集:
1)毛细血管采血:首先用加样枪准确加入500μL血球稀释液于子弹头中。取患者左手中指或无名指内侧-—用酒精棉签由里向外消毒-—用干棉球擦试干净-—用带刃的三棱采血针刺破皮肤,深度约2 - 3毫M,稍加挤压以血液能流出为宜-—擦去第一滴血-—用血红蛋白吸管准确吸取20μL血液-—加入准备好的子弹头中-—上下颠倒混匀10次,等待5分钟,上机检测。
(2)稀释模式:
1)事先用清洗液稀释成1∶26的血液试样,通过吸液管被吸入旋转阀。
2)由旋转阀定量的78μL稀释血液,用稀释液1.922ML被送到WBC检测器的同时,添加WBC/HGB溶血剂1.0ML,成1∶1000的稀释试样。这个状态下约使其反应溶血,血小板收缩。同时血红蛋白变成红色的正铁化的血红蛋白。
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1.全血细胞分析(血常规)检测
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1.2RBC、PLT测量原理
(1)全血模式:
1)血液通过吸液管被吸入旋转阀。
2)由旋转阀定量4.0μL血液,用稀释液1.996ML稀释成1∶500,作为稀释试样被移送到搅拌容器。(第一次稀释)。
T1:当低的谷值辨别线不能决定时。
T2:当高的谷值辨别线不能决定时。
F1:小型白细胞分布异常。T1的相对度数超过规定值。
F2:中型白细胞分布异常。T1或T2的相对度数超过规定值。
F3:大型白细胞分布异常。T2的相对度数超过规定值。
WU:高辨别线(UD)的相对度数超过规定值。溶血不充分(对于溶血剂的
红细胞膜电极极强的标本等),或含有多数异常血球等的情况。
量状态-—在LCD画面上的系统区域中显示“WD”时检测模式为全血模式-—将试管倾斜来回晃动,充分混匀-—将试管塞取下-—将试管放入吸液管下-—按下开始键-—当LCD画面中显示“正在测量”时,将试管取下-—机器自动测量-—结束后自动打印结果-—将结果贴在报告单上,登记,即可发报告。
注:容许空白值WBC:0.3(×103/μL以下)、
MP:具有2个以上粒度分布峰值时。
DW:设峰值的高度为100%时,20%度数的粒度分布幅出现异常。20%度数与粒度分布不相交2次时标有此标记。
(3)PLT粒度分布:
血小板粒度分布解读,使用3条辨别线来进行。分别为2-6FL和12-30FL之间自动决定的2条辨别线(LD)和(UD),以及固定辨别线12FL。
间粒子数占(LD)之间的粒子数的比率来求出。
(4)PLT粒度分布异常标志:
PL:低辨别线(LD)处的相对度数超过规定值时。可认为是燥声的影响。
PU:高辨别线(UD)处的相对度数超过规定值。可认为是血小板凝聚或燥声的影响。
MP:具有2个以上粒度分布峰值时。
DW:设峰值的高度为100%时,20%度数的粒度分布幅出现异常。20%度数与粒度分布不相交2次时标有此标记。
3)接着,被稀释成1∶500的试样用旋转阀定量40μL,用稀释液1.960μL稀释成1∶25000,被移送到RBC/PLT检测器。(第二次稀释)
4)RBC/PLT检测器中的试样,通过细孔被吸取250μL。同时,RBC及PLT由DC检测法被计数。同时,HCT(红细胞比积),由红细胞脉波峰值检测法来求出。
KX-21全自动血球分析仪、日本东亚。
5.操作
(1)全血模式:
打开主机右侧电源开关-—自动检查、清洗、空白校验-—进入准备测
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1.全血细胞分析(血常规)检测
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1.全血细胞分析(血常规)检测
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1)LYM=[W-SCC(小型白细胞数)]
为辨别线(LD)到(T1)间的小型白细胞数,可认为与淋巴球数有很大的关联。
3) WBC检测器中的被稀释/溶血后的试样中,约1ML被移送到HGB检测器。
4) WBC检测器中的试样,通过细孔被吸引500μL,这时,根据PC检测法,对血球通过细孔时的脉冲数进行计数。
5)在HGB测量器中,由发光二极管照射波长为555NM的光,能照射到HGB细胞中的试样。此试样的浓度作为吸光率的测量,与试样进入前测量的只有稀释液时的吸光率相比较,以求出HGB(血红蛋白值)。
(2)稀释模式:
1)用清洗液事先稀释1∶26的血液试样,用吸液管吸入旋转阀。
2)旋转阀定量2.08μL的稀释血液,用1.99792ML的稀释液被移到RBC/PLT检测器,稀释成1∶25000的稀释试样。
3)RBC/PLT检测器中的试样,通过细孔被吸引250μL,同时RBC及PLT根据DC检测法来计数。同时,HCT(红细胞比积值)根据红细胞脉冲波峰值检测法求出。
1.1WBC、HGB检测原理
(1)全血模式:
1)血液通过吸液管被吸入旋转阀;
2)由旋转阀定量的6μL的血液,用稀释液1.994ML被移送到WBC检测器的同时,添加WBC/HGB溶血剂1.0ML,成1∶500的稀释试样。这个状态下约使其反应10秒后,在白细胞膜保持原来的状态下,红细胞发生溶血,血小板收缩。同时血红蛋白变成红色的正铁化的血红蛋白。
AG:为小于低辨别线(LD)的粒子数超过规定值时。可推测为发生血小板聚集。这对白细胞测量没有影响,但有可能造成血小板数偏低,而对血小板有异常标记。
1.5RBC/PLT粒度分布解读
(1) RBC粒度分布:RBC可由,分别在25—75fL、200—250 fL之间自动决定的低、高2个辨别线(LD)和(UD)之间的粒子数来求出。粒度分布,分别对各个辨别线上的相对度数是否有异常,是否有2个以上的峰值,分布幅的异常等进行检查。
规格:20升/桶。
2)WBC/HGB用溶血素:同稀释液配套。规格:500ML×3瓶/合。
3)清洗剂:同稀释液配套。规格:50ML/瓶。
1.试剂消耗量(每一个标本):稀释液:约30ML。
WBC/HGB用溶血素:约1.0ML。
2.吸引血液量:全血模式约50μL,稀释模式约200μL(预先稀释血样)。
4.仪器
1)血小板分布幅(PDW):设峰值高度为100%时20%度数处的分布幅为PDW。其单位为FL(=10-15L)
2)平均血小板容积(MPV):由下式来求出。
MPV(FL)=PLT(%)/PLT(×103/μL)×1000
3)大型血小板比率(P-LCR)
12FL辨别线以上的大型血小板的比率。作为12FL固定辨别线和(UD)之
2)MXD=[W-MCC(中型白细胞数)]
为辨别线(T1)到(T2)间的中型白细胞数,可认为与单核细胞,嗜碱细胞、嗜酸细胞的总数有很大关联。
3)NEUT=[W-LCC(大型白细胞数)]
为辨别线(T2)以上Baidu Nhomakorabea大型白细胞数,可认为与中性白细胞有很大关联。
4)LYM%[W-SCR(小型白细胞比率)]
小型白细胞数相对于全部白细胞数(WBC)的比率。
2.标本采集与处理
(1)受检者(体检对象或病人)的准备:吸烟、进食、运动和情绪激动等,均可影响血液成分。甚至一日之间,白细胞总数,嗜酸性粒细胞绝对值,淋巴细
胞各亚群的比例等均有一定的波动。服用某些药物可能明显干扰实验,因此采血前应询问是否服用过明显干扰药物,并尽可能在一定时间内避免干扰
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MCH(pg)=HGB(g/dL)/RBC(106/μL)×10
(3)胞平均血红蛋白浓度(MCHC)根据HCT及HGB,由下式来求出。
MCHC(g/dL)=HGB(g/dL)/HCT(%)×100
1.4 WBC的分类原理
(1)WBC粒度分布,采用4条辨别线划分3个区域,来辨别小型白细胞,中型白细胞,大型白细胞,低辨别线(LD)在30至60fL之间的最合适位置上自动决定,高鉴别线(UD)固定在300fL,用作粒度分布的异常监视。进一步求出(LD)和(UD)之间的范围内的WBC粒度分布的谷值,最初的谷值设为TROUGH辨别线1(T1),另一个谷值设为TROUGH辨别线2(T2)。
1.3红细胞计算
红细胞常数(红细胞平均体积,红细胞平均血红蛋白量,红细胞平均血红蛋白浓度)根据RBC、HGB及HCT来求出。
(1)细胞平均体积(MCV)
根据RBC及HCT,由下式来求出。
MCV(fL)=HCT(%)/RBC(×106/μL)×10
(2)红细胞平均血红蛋白量(MCH)
根据RBC及HGB,由下式来求出。
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1.仪器检测原理
定量地吸取血液取样,按规定的倍率稀释后,被送入各检测器容器,在检测容器中,有孔眼状细孔,在其两侧的电极之间通有直流电。当浮游在稀释试样中的血球,通过细孔时,电极之间的直流电阻将发生变化。根据直流电阻的变化血球的大小作为电脉冲被检测出来。根据电脉冲的个数,可算出血球数。另外,可通过求该脉冲大小,就可按血球的大小描出粒度分布,并且,通过解读粒度分布,可得到各种解读数据。
(3)标本处理:我院采用真空采血管,采血量为0.5-1ML,每日清晨由病区护士采集,早7:30分送至检验科。血液标本保存非常重要,采血后应在2小时内检测,血液分析仪进行细胞计数的血液只能在室温下保存,温度4℃
(4)标本拒收规范:有凝块或微小凝块、溶血、无标签及标本与化验单不符的标本。
3.试剂
1)血球稀释液:本科使用希森美康产的与仪器配套的稀释液。
RBC:0.02(×103/Μl)以下
HGB:0.1(g/dL)以下、
PLT:10(×103/μL)以下
(2)末梢血:
打开电源机器自动清洗后在LCD画面上系统区域显示“WD”检测模式-—按下MODE键,使画面变成变更模式-—用光标键选择[稀释(PD)]-—按下ENTER键,进行切换回到主画面-—将稀释的末梢血放至吸液管下进行检测。
2)静脉采血:
(1)抗凝剂:最佳选用乙二氨四乙酸—二钾(EDTA-K2),EDTA-Na2也可,只是溶解度不如K2。
(2)抗凝剂配制(体检时用):10% EDTA-K2溶液:
1)EDTA-K220g+ H2O至100Ml完全溶解后备用。
2)取子弹头分别加上述溶液20μL。
3)静脉采血0.5 - 1 mL加入子弹头内,颠倒混合5次以上。
RDW-CV(%)=L2-L1/L2+L1×100
2) RDW-SD:设峰值的高度为100%时,度数为20%处的分布幅作为红细胞分
布幅RDW-SD。
(2)RBC粒度分布异常标志:
RL:在低辨别线(LD)处的相对度数超过规定值。可认为是燥声的影响、红细胞形态异常、血小板凝聚等原因。
RU:在高辨别线(LD)处的相对度数超过规定值。可认为是燥声的影响。
3)WBC检测器中的被稀释溶血后的试样中,约1ML被移送到HGB检测器。
4)WBC检测器中的试样,通过细孔吸引500μL,这时,根据DC检测法,对血球通过细孔时的脉冲数进行计数。
5)在HGB测量器中,由发光二极管照射到HGB细胞中的试样。此试样的浓度作为吸光度被测量,与试样进入前测量的只有稀释液时的吸光度相比较,以求出HGB(血红蛋白值)。
1)红细胞分布幅(RDW-CV),求出全粒度面积68.26%,度数时的点L1和
大庆油田总医院集团乘风医院检验科
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1.全血细胞分析(血常规)检测
第4页、共13页第1版、第3次修订
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L2,然后由下式来求出:
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