PH、AD、Ach等对家兔离体肠肌运动的影响

PH、AD、Ach等因素对离体家兔肠肌运动的影响

浙江中医药大学第二临床医学院临床医学滨临（2）班第四组陈兰20092090216

【摘要】：目的：观察Hcl、NaoH、23摄氏度台氏液、AD、Ach和缺氧对离体家兔肠肌运动的影响。方法：向浸润有离体家兔肠肌的台氏液中依次滴加Hcl、NaoH、25℃台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱、缺氧。用生物信号采集系统记录肠肌的收缩情况。结果：滴加乙酰胆碱和氢氧化钠的肠肌运动张力和频率都增大；滴加盐酸、肾上腺素的肠肌运动张力和频率迅速降低；换成25摄氏度的台氏液张力与频率先迅速下降然后逐渐增大；缺氧后，肠肌运动的张力和频率逐渐降低。结论：在一定范围内，一定浓度Ach、NaOH 可促进肠肌的运动；一定浓度的AD、HCl 可以抑制肠肌的运动；短时低温能使肠肌运动降低后又加强直至正常；短时缺氧能使肠肌运动减弱。

【关键词】：离体肠肌；台氏液；酸碱度；肾上腺素

【Key words】：Intestinal muscle from the body；PH；AD

【引言】：消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样具有肌肉组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。但消化道平滑肌兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械张力刺激较为敏感等特点。给予离体肠肌以接近在体情况的适宜环境，消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。为观察哺乳动物消化道平滑肌（smooth muscle）的特性，必须给予离体肠肌以接近于在体情况的适宜环境。本实验以台氏液作灌流液。其离子成分和pH与哺乳动物的体液相似。在整个实验过程中，灌流液的温度恒定在38℃左右，并持续给灌流液供O2。[1]

【材料和方法】：

1.实验对象：家兔浙江中医药大学动物实验中心提供。

2.实验仪器：恒温水泵、空气泵、固定器、恒温离体小肠灌流装置、温度计、微调固定器、张力换能器、铁支架、电脑、生物信号采集处理系统、冰箱等木锤、止血钳、手术刀、20ml 注射器、手术剪、持针器、手术圆针、缝线、烧杯、手术盘、搪瓷碗等。

3.实验药品和试剂：蒂罗德液（即台氏液）：0.8%NaCl、0.02%KCl、0.026%MgSO477H2O、0.0065% NaH2PO4、0.02%CaCl2、0.1%NaHCO3、0.1%葡萄糖溶液。1:10 000肾上腺素、1:10 0000乙酰胆碱、1NHCl、1NNaOH溶液。

4.实验方法：

将台氏液快速充满空气小泡后，分成两份，一份冷藏于4℃冰箱, 使其变冷却，简称为预冷台氏液；一份分次放入200ml的小烧杯中，然后将其放入恒温水泵中的不锈钢槽内预热至37 ~ 38 ℃。

按下图安装实验装置，并进行以下操作：

图1：实验装置示意图

打开恒温水泵，加热台氏液。打开空气泵，调试恒温离体小肠灌流装置内槽台氏液中的气流速度。打开电脑，点击生物信号采集处理系统图标，显示生物信号采集处理系统窗口。选择菜单“实验/常用生理学实验”，“离体小肠平滑肌运动”。并将张力换能器输出线连接到已确定作为记录张力的通道。

离体小肠段的制备

（1）准备两个小手术盘，一个小手术盘用于清洗肠内容物，另一小手术盘盛预冷台氏液倒入中，其液体量已淹过小肠段为准。（2）用持针器夹持手术圆针、穿线备用。（3）取家兔一只，

将其倒提，用木锤猛击后脑勺，使之昏迷，迅速进行以下操作：将其仰卧位固定，用手术剪

从剑突下沿腹白线向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm长，打开腹壁，暴露腹腔，顺着胃找到与

胃相连的十二指肠，沿十二指肠向空肠的方向取出小肠段约30cm，放入一小手术盘中，用注

射器抽取预冷台氏液冲洗肠内容物，直至冲洗干净为止。将干净的小肠段放入另一盛有预冷

台氏液的小手术盘中，用手术刀刮去肠管外的血管和系膜，将小肠段切割成小段，每小段肠

约2cm长，并在小段肠的两端、距断端约1mm处各穿约30cm长的线，注意在操作过程中，

每10分钟换一次预冷台氏液。

按图1. 安装离体肠段，具体操作是：

（1）取出固定架，将肠段的下端的线头尽量靠近固定架的小钩，并牢固地绑紧在小钩上，将

固定架放回内槽，小钩尽量靠近槽底，重新用张力微调器固定固定架，将空气泵重新连接至

固定架，并通过固定架将空气输入内槽的台氏液中。

（2）将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接, 用张力微调器缓慢升降拉线，保持线

有一定紧张度，肠段、线应与地平面垂直，同时，肠段及上端的线头不得碰及槽壁和固定架。（3）换液：打开灌流槽的内槽排水阀门，排去原来的台氏液，用注射器从恒温水泵的小烧杯

中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽中，其每次用量以淹过肠段的量为准。调节位于固

定架尾部的空气流量调节旋钮，使气泡即细小、均匀，又不影响肠段的运动。

实验观察：

1记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线，观察其收缩活动的特点。向台氏液中加入1NHCl盐

酸2滴，观察小肠收缩活动的改变.反应稳定后冲洗2遍。

2记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线，向台氏液中加入1NNaOH 2滴，观察小肠收缩活动的

改变.反应稳定后冲洗2遍。

3肠活动恢复后，关闭恒温水泵，将原37℃~ 38℃台氏液换成等量的25℃台氏液，观察肠

活动的改变, 待其活动改变明显时，冲洗1遍, 再加入等量的37℃~ 38℃的台氏液。

4肠活动恢复后，向台氏液中加入1:10 000肾上腺素2滴，观察小肠活动的改变, 待反应稳

定后冲洗2遍, 再加入等量的37℃~ 38℃的台氏液。

5肠活动恢复后，向台氏液中加入1:10 0000乙酰胆碱2滴，观察小肠收缩活动的改变, 待反

应稳定后冲洗2遍。

6. 待肠活动恢复后，停止空气泵的工作，观察肠活动的改变，待其收缩活动改变明显时反

应稳定后冲洗1遍，再加入等量的37 ℃~ 38℃的台氏液，空气泵描记一段肠段收缩活动恢

复曲线后终止实验。

【结果】：（图1）此图是滴

加盐酸的图样，可

见滴加盐酸后，肠

肌兴奋度降低，张

力和频率迅速降

低。冲洗后又迅速

恢复。

（图2）