常用染色剂

1、斐林试剂

配制：1）甲液质量浓度为0.1g/ml，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml

2）乙液质量浓度为0.05g/ml，取5gCuSO4溶于蒸馏水，稀释至100ml

临用时将甲、乙液等量混合

作用：鉴定还原性糖：C6H12O6（即葡萄糖）、果糖、麦芽糖、乳糖等。

还原性糖与斐林试剂发生作用，生成砖红色沉淀。如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。

2、班氏尿糖定性试剂还原性糖

配制：称取17.4克无水硫酸铜（CuSO4）溶解于100毫升热蒸馏水中，冷却后，稀释到150毫升。称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠（Na2CO3）100克，加蒸馏水600毫升，加热使之溶解，冷却后，稀释到850毫升。把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中，搅匀后即为班氏尿糖定性试剂。用细口瓶贮存备用（为了防止氢氧化铜沉淀的生成，故加入柠檬酸钠。柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂，它能与铜离子形成可溶性络盐）。使用方法同斐林试剂，所不同的是班氏试剂可长期使用。

3、双缩脲试剂

配制：A液：质量浓度为0.1g/ml，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml

B液：质量浓度为0.01g/ml，取1gCuSO4溶于蒸馏水，稀释至100ml

使用时，先加A液，后加B液

作用：鉴定蛋白质，蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可产生紫色反应。也可用于鉴定多肽。

4、苏丹Ⅲ

配制：取0.1g苏丹Ⅲ，溶解在20ml95%酒精中

作用：鉴定脂肪，脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色）。

5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）。

作用：用于洋葱根尖的解离，即使组织中的细胞相互分离开来。能杀死细胞固定。

6、质量浓度为0.01g/mL的或0.02g/mL龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液）

配制：是将龙胆紫溶解在质量分阶段数为2%的醋酸溶液中配制而成

作用：使细胞核内的染色体着色，便于观察。

7、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液

作用：观察成熟植物细胞质壁分离时用。经此处理细胞仍具活性。

8、质量浓度为0.1mg/ml的亚甲基蓝溶液

配制：将亚甲基蓝溶于蒸馏水中配制而成

作用：（1）用于观察根对矿质元素离子的交换吸附观察；

（2）用于检测水中细菌情况，根据亚甲基蓝褪色情况，判断水质被细菌污染情况。

是活体染色剂。

9、丙酮

是有机溶剂，在叶绿体中色素提取时，用于溶解叶绿体中的色素。可用酒精替代，不过提取色素时将绿叶放入酒精中隔水加热

10、层析液

配制：由20份石油醚（在60~900C下分馏出来的）、2份丙酮和1份苯混合而成。是一种脂溶性很强的有机溶剂，叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同：溶解度高的随层析液在滤纸上扩散很快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。

代用品：93号汽油、四氯化碳

11、SiO2、CaCO3

作用：加入少许SiO2是为了研磨得充分；加入少许CaCO3是为了防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。

12、碘液

配制：取2gKI ，溶解在5ml蒸馏水中，再加1gI，待溶解后用蒸馏水稀释至300ml。溶液在光亮处容易变成紫色，必须保存在暗色玻璃瓶里。

作用：用来测定淀粉，淀粉遇碘后，形成蓝色的复合物。

13、二苯胺

配制：称取1.5g二苯胺，溶于100mL冰醋酸中，再加1.5mL浓硫酸，用棕色瓶保存。临用前，在10mL的上述溶液中再加入0.1mL体积分数为0.2%的乙醛溶液。

作用：DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色。

14、NaOH：用于吸收CO2（验证光合作用需要CO2）或改变溶液的pH,

15、Ca(OH)2：鉴定CO2（验证呼吸作用产生CO2）。

16、NaHCO3：提供CO2等。

斐林试剂/班氏试剂+还原糖--砖红色沉淀

考马斯亮蓝：染蛋白质

双缩脲试剂+蛋白质--紫色络合物

苏丹3+脂肪--橘红色（注意不是橘黄色）

苏丹4+脂肪--红色

碘液+淀粉--蓝色

二苯胺+DNA--蓝色

龙胆紫+染色体--紫色

醋酸洋红+染色体--红色

健那绿+线粒体--蓝绿色

派洛宁：鉴别RNA

吡咯红+RNA--红色

甲基绿+DNA--绿色

溴化乙锭（EB）：鉴别DNA（最常用最灵敏）紫红色

希夫试剂：鉴别DNA

DAPI荧光染料（染活细胞）：鉴别DNA 蓝紫色

詹姆斯绿：特异显示线粒体

酚藏花红染色：鉴别死细胞，死细胞为红色

台盼蓝：台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象

鉴定细胞死活的常用染色方法：醋酸双脂染色、DAPI染色、台盼蓝染色、酚藏花红染色（均为活性染料）