输血前免疫血液学检查---疑难配血

血液标本的采集及准备

1. 输血申请单：必须含有病人姓名、住院号、床号及负责医师的签名。还应包含申请日期、用血原因及时间、用血种类及数量；年龄、性别、种族、疾病诊断、输血史、妊娠史、输血反应史、有无不规则抗体及血型等。

2. 受血者血样：

①认真核对后，方可采集；

②血液标本必须收集到有正确标记的带塞子的试管里，且标明病人姓名、住院号、采集日期及采集者；

③血液标本应是不抗凝血，以避免纤维蛋白、抗凝剂成分对血清学试验的干扰；

④溶血或混入静脉输注液体而致标本稀释的血液标本不得使用；

⑤须用输血前3 天以内采集的血液标本；

⑥输血后，病人的血液标本须在4C至少保存7天，以备重复试验。⑦用右旋糖酐、聚乙酰吡咯酮（PVP等大分子物质治疗后采集的血标本（如已标记说明应将红细胞洗涤）。脂肪乳可干扰配血实验结果，在输用脂肪乳之前应抽取血标本备用

3. 献血员血样：

①从血袋上附着的血样小辫获得献血员血液标本；

②在标本收集管上粘贴血袋上有关血液制品号的条形码标签；

③准确核对血袋上及标本管上的号码。

血清学试验

一、受血者试验

（一）血型鉴定

1. ABO 血型鉴定：

⑴ 常规鉴定：

①正定型：用抗—A抗—B试剂检测受血者红细胞。

②反定型：用A和B型试剂红细胞检测血清中的抗体。

人ABO 血型是由红细胞的抗原和血浆/血清中的抗体所决定，因此正反

定型的结果应该一致。

表1常规ABO 正反定型试验

正定型 反定型

血型

抗— A

抗— B

A B

O

0 + + 0 ＋

0 + A 0

＋ + 0 B ＋ ＋

AB

⑵ 如果正反定型不一致，则需进一步鉴定。可在正定型试验中增加抗— A1、抗—

AB 及抗—H 反定型试验中增加 A2、O 及自身红细胞。

正定型试验中的抗一 AB 是用来确认弱 A 和弱B 抗原，抗一A1用于鉴定 A 亚型，抗-H 用于鉴

定亚型及孟买型。

反定型试验中的 A2细胞是用于鉴定 A2亚

型。O 细胞用于鉴定是否存在 ABO 系统以外的同种抗体影响定型， 自身对照用于是

否存在自身抗体影响定型，如果与 O 细胞或自身对照为阳性，则定型结果不可靠，

必须进一步进行血型鉴定。

⑶如果无法找到正反定型不一致的原因， 则只能给病人输注 O 型红细胞，病

人血型可请血液中心血型参比试验室协助鉴定。

⑷ABO 定型不一致的原因：

I 、反定型试验出现弱反应或缺失抗体：

新生儿； 老人；

低球蛋白症的白血病人或淋巴瘤病人（恶性）； 使用免疫抑制剂而致低球蛋白的病人； 先天丙球缺乏的病人； 免疫缺陷者； 骨髓移植病人； 双胞

胎嵌合体。

正定型

抗-A 抗-B 抗-AB 抗-A 抗-H

表2疑难ABO 正反定型试验

反定型 自身对照

A1 A2 B O

n、弱反应或缺失抗原：

A 亚型、

B 亚型或AB 亚型；

白血病导致A或B抗原减弱，何杰金病有时会抑制抗原表达，与白血病类似；

某种疾病(如腹腔癌、胰腺癌)导致血浆中存在大量的型物质，中和抗-A或抗-

B 抗体，引起正定型为假阴性或弱阳性；洗涤红细胞可解决此问题；获得性B；

抗-A或抗-B试剂中存在低频抗原的抗体。

川、蛋白或血浆不正常引起的正反定型不符：

某些疾病导致球蛋白水平增高引起缗钱状凝集，纤维蛋白原水平的增高也会引起缗钱状凝集，导致假阳性凝集；洗涤红细胞

血浆增溶剂(葡聚糖、PVP也会引起缗钱状凝集。

W、其他原因引起的正反定型不符：

多凝集：当病人感染细菌或病毒后，病毒或细菌产生的酶使红细胞上掩蔽的T 抗原暴露激活，由于正常人血清中都含有抗－T 抗体，因此可与正常人血清产生凝集反应，正定型试验假阳性；

冷自身抗体引起的自家凝集反应，正反定型均可出现假阳性；DAT及IAT

均阳性。

存在ABO系统的意外抗体，如A2或A2B个体血清中可能存在天然抗—A1,导致反定型试验多出抗体；

被检者血清中存在ABO系统以外的同种抗体，反定型时出现假阳性反应；

非抗-A及抗-B的抗体与相应抗原形成复合体吸附在红细胞表面，引起正定

型非特异性凝集，如抗—B 的染料吖啶黄。

2. Rh ( D)血型鉴定：

⑴ Rh(D) 抗原检测原则：

①对受血者常规一般只测Rh(D)抗原，而对献血员不仅要检查Rh(D)

抗原，并在其为阴性的前提下必须进一步确定是否为弱Rh(D)(即D U)。

②Rh(D)阴性及弱D的受血者只能提供Rh(D)阴性血，不得使用D 阳性及弱D 的血。即弱D针对受血者而言为D阴性，而对于供血者而言则为D阳性。

③对直接抗人球蛋白试验阳性的Rh(D) 阴性红细胞进行Rh(D) 定型时，易引起假阳性反应，因此必须按照试剂生产商的试剂使用说明书要求，增加对照试验。

⑵Rh ( D)抗原检测方法：

①试管法；

②微柱凝胶法。

(二)、不规则抗体的检测和鉴定：

1. 血型不规则抗体检测：必须对有输血史、妊娠史或短期内需要接受多次输血者

及交叉配血不合者进行抗体筛选试验。

⑴ 抗体筛选的重要性：有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体，并可以在配血前鉴

定此意外抗体，获得充足的时间来选择缺少相应抗原的相配合的血，避免由于寻找不到相合的血液而造成患者病情的延误。

⑵ 抗体筛选用试剂红细胞：

①试剂红细胞必须含有下列抗原：D,C,E,c,e,M,N,S,s,P1,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb,Jka, 和

Jkb

②目前已商品化的试剂红细胞有两种，分别为双人份细胞和三人份细胞组。

两组细胞抗原分布图Rh-Hr Kell Duffy Kidd Lewis P MN Lutheran Xg

donor D C c E e

K k Fya FybJka Jkb Lea LebP1M N S sLua Lub Xga

+ +

I R1R1+ + 0 0 ++ ++ 0＋＋0 + 0

++

0 +＋

n R2R2+ 0 + + 00 +＋＋＋0+ 0 ＋+ 0 +++ +0

三组细胞抗原分布图

Rh-Hr Kell D uffy Kidd Lewis P MN Lutheran Xg

Fya Jka Lea Lua

donor DC c E eK k P1MNSs Xga

Fyb Jkb Leb Lub

1R1R1 + + 0 0 ++ ++ 00 +0 +＋+++00 +0

2R2R2 + 0 + + 00 ++ ++ ++ 0＋0+0+0 ++

3rr 0 0 + 0 +0 +0 ++ 0+ 0＋+00+0 ++

③试剂红细胞是保存在保存液中，一旦用生理盐水或Liss 液洗涤后则应该在

24 小时内使用，否则会因污染、抗原丢失导致试验错误。

⑶ 抗体筛选技术：

①技术要求：

尽可能多的检测出有临床意义的抗体。

尽可能少的检测出无临床意义的抗体。

尽可能快的完成抗体检测。

②方法选择：每种方法都有自己的特点，适应于不同范围及情况。

立即离心盐水试验技术：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反应活性抗体，