DNAstar与Vector NTI序列拼接功能
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2012-2-8序列拼接软件使用总结:
1. 目前,个人使用DNAstar 较Vector NTI 更顺手。
可能因为vector 中某些设置没有调整,assemble 后的序列中存在许多
N,需人为删除。
且在DNAstar 中可随意将碱基编辑为Y,R,S 等兼并碱基,而在Vector 中无法进行同样操作,键盘输入兼并碱基时只能显示出N。
更重要的一点是,在contig 中选中某一位碱基想细看时,标记不明显,上下几排碱基只有
两条细细的白边来标示,要仔细分辨才能保证不会看错位。
白边在旁边这两条红
线内侧,万分仔细看才
能看见-__-b
对比一下,DNAstar 中的界面多醒目啊:
1
2
BTW: icon 1 can be used to amplify chromatogram. Icon 2 can be used to show/hide chromatogram.
2.使用DNAstar时偶尔会出现无法拼接成一条序列的情况,比如本来有5个片断,导入所有片
断后assemble,却分成了2个contig:1-3为一个contig,4和5拼成另一个contig。此时可先将3和4的序列进行assemble,然后再选择Sequence〉Add…将其他序列加入,再拼接,就会生成一条contig了。
3.Vector亦有其特色,例如:
(1)可以在同一窗口中直接看到某一拼接序列位于整个序列的什么位置:
(2)可以将鼠标停留在峰图上某一碱基处,查看每个测序峰的每种碱基信号强度----可据此分辨杂合峰具体是由什么碱基组成,而在DNAstar中只能通过看峰图颜色判断-_-b。
4.Vector有时拼接出的结果有误,如下图,有些序列被错误的拼接在一起,共3个台阶(不对,
一共是5对PCR引物,应该有5个台阶):
用DNAstar对同样的序列进行分析,拼接结果如下,共5个台阶:
5.DNAstar拼接后若需人工核查序列:用DNAstar进行序列拼接后,单击下图中的图标处:
会弹出如下窗口,一定要用这些键查找不匹配处,Conflict和Consensus Difference两项都要查,查了Conflict后,Conflict/SNP项可以不用再查。
选定查找项目后,直接点搜索框边的这个图标>>可自动跳到下一处。