血糖的定量测定
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实验九 血糖的定量测定
Hagedorn-Jensen 二氏定糖法
• 一 .目的： 目的： 目的 学习用Hagedorn-Jensen二氏微量滴定法测 学习用 二氏微量滴定法测 定血糖含量 • 二.原理 原理 动物血液中的糖主要是葡萄糖，其含量较恒定。 动物血液中的糖主要是葡萄糖，其含量较恒定。 用硫酸锌和氢氧化钠除去被检测血中的蛋白质制 成无蛋白血滤液。 成无蛋白血滤液。当将血滤液与标准铁氰化钾溶 液共热时,一部分铁氰化钾还原成亚铁氰化钾 一部分铁氰化钾还原成亚铁氰化钾， 液共热时 一部分铁氰化钾还原成亚铁氰化钾，并 与锌离子生成不溶性化合物。 与锌离子生成不溶性化合物。 向混合物中加入碘化物后， 向混合物中加入碘化物后，用硫代硫酸钠溶液 滴定所释放的碘。即可知剩余的铁氰化钾量。 滴定所释放的碘。即可知剩余的铁氰化钾量。血 糖越多，剩余的铁氰化钾越少， 糖越多，剩余的铁氰化钾越少，所消耗的硫代
将两个试管同时放入沸水浴中。 3. 将两个试管同时放入沸水浴中。准确煮沸四分钟 后将二试管的内容物用滤纸分别过滤到两个大试 管中，用蒸馏水冲洗沉淀和原来的试管两次， 管中，用蒸馏水冲洗沉淀和原来的试管两次，每 次用水3毫升。将溶液并在一起。 次用水3毫升。将溶液并在一起。 4. 向每个试管用吸管精确的加入标准铁氰化钾碱性 溶液2毫升，一同放入沸水浴中煮沸15分钟。 15分钟 溶液2毫升，一同放入沸水浴中煮沸15分钟。 冷却后分别加入氯碘溶液3毫升及3%醋酸2 3%醋酸 5. 冷却后分别加入氯-锌-碘溶液3毫升及3%醋酸2毫 升混匀。并加淀粉液两滴。 升混匀。并加淀粉液两滴。用标准硫代硫酸钠溶 液滴定至蓝色消失为止。 液滴定至蓝色消失为止。 血糖含量的计算： 6. 血糖含量的计算： 根据血糖值换算表将样品滴定值和对照滴定 值的差值折合成糖值。将此糖值乘以1000 1000， 值的差值折合成糖值。将此糖值乘以1000，即为
100毫升血液中含葡萄糖毫克数。 毫升血液中含葡萄糖毫克数。 毫升血液中含葡萄糖毫克数 当量/升硫代硫酸钠 表（书53页）列出了 页 列出了0.005当量 升硫代硫酸钠 当量 溶液的用量（毫升）和血糖含量（毫克/毫升 毫升） 溶液的用量（毫升）和血糖含量（毫克 毫升）的 换算关系。 换算关系。 表中最左边纵行中的数字是滴定时消耗的0.005 表中最左边纵行中的数字是滴定时消耗的 当量/硫代硫酸钠溶液的毫升数的整数及小数后第 当量 硫代硫酸钠溶液的毫升数的整数及小数后第 一位。 一位。表中最上边的横行代表其小数后第二位数 表中交叉点的数字为0.1毫升血液所含葡萄糖 字，表中交叉点的数字为 毫升血液所含葡萄糖 的毫克数。 的毫克数。
硫酸钠也越少。硫代硫酸钠溶液用量与血糖的关系 硫酸钠也越少。 可以由经验确定下来的数字表查出。 可以由经验确定下来的数字表查出。此过程可以用 反应式表示如下： 反应式表示如下： K3Fe(CN)6+糖→K4Fe(CN)6+糖的氧化产物 糖 糖的氧化产物 2K4Fe(CN)6+3ZnSO4→K2Zn3[Fe(CN)6]2↓+3K2SO4 ↓+3
法滴定的指示剂，可长期保存。 法滴定的指示剂，可长期保存。 8. 鸡。
操作方法： 五. 操作方法：
1. 取两个试管，各加入 取两个试管，各加入0.45%硫酸锌 毫升及 摩 硫酸锌5毫升及 硫酸锌 毫升及0.1摩 毫升氢氧化钠溶液1毫升 尔/毫升氢氧化钠溶液 毫升，此时产生氢氧化锌 毫升氢氧化钠溶液 毫升， 胶状沉淀。 胶状沉淀。 2. 用微量吸管精确的吸取血液 毫升。擦去吸管尖 用微量吸管精确的吸取血液0.1毫升 毫升。 端周围的血。 端周围的血。将血吸入一个装有氢氧化锌的试管 中，并仔细地用吸入和放出溶液的方法洗微量吸 管三次。另一试管中加入0.1毫升蒸馏水为对照管 管三次。另一试管中加入 毫升蒸馏水为对照管
入预先准备好的炼制无水碳酸钠10.6克，定溶到1升。 克 定溶到 升 入预先准备好的炼制无水碳酸钠 将溶液放在棕色瓶内，于阴暗处保存。 将溶液放在棕色瓶内，于阴暗处保存。 4. 氯-锌-铁溶液 锌 铁溶液 取硫酸锌50克及纯氯化钠 克及纯氯化钠250克，定溶到 升， 取硫酸锌 克及纯氯化钠 克 定溶到1升 作为母液。临用前根据所需要的试剂量加入碘化 作为母液。 钾，使它在混合液中的浓度为25克/升。 使它在混合液中的浓度为 克 升 5. 标准 标准0.005当量 升硫代硫酸钠溶液 当量/升硫代硫酸钠溶液 360毫升 当量 毫升 临用时由标准0.1当量 当量/升硫代硫酸钠溶液稀释 临用时由标准 当量 升硫代硫酸钠溶液稀释 6. 3%醋酸溶液（不含铁） 醋酸溶液（ 100毫升 醋酸溶液 不含铁） 毫升 7. 1%可溶性淀粉溶液 20毫升 可溶性淀粉溶液 毫升 1克可溶性淀粉溶于 毫升沸水中然后加入 毫升 克可溶性淀粉溶于10毫升沸水中然后加入 克可溶性淀粉溶于 毫升沸水中然后加入90毫升 饱和氯化钠溶液中。 饱和氯化钠溶液中。此溶液可作为大多数碘量
用碘量法测定剩余的标准K3Fe(CN)6:
2K3Fe(CN)6+2KI+8CH3COOH→ → 2H4Fe(CN)6+I+8CH3COOK 2Na2S2O3+I→2NaI+Na2S4O6
器材： 三.器材： 器材 1. 微量滴定管 2. 0.1毫升微量吸血管 毫升微量吸血管 3. 沸水浴 4. 50x90毫米大试管 毫米大试管 四.试剂与材料 试剂与材料 1. 0.45%硫酸锌溶液（新配制） 硫酸锌溶液（ 250毫升 硫酸锌溶液 新配制） 毫升 2. 0.1摩尔 升氢氧化钠溶液（新配制） 50毫升 摩尔/升氢氧化钠溶液 摩尔 升氢氧化钠溶液（新配制） 毫升 3. 0.005当量 升铁氰化钾碱性溶液 当量/升铁氰化钾碱性溶液 100毫升 当量 毫升 用分析天平称化学纯铁氰化钾165克，溶解后加 用分析天平称化学纯铁氰化钾 克
实验九 血糖的定量测定
Hagedorn-Jensen 二氏定糖法
• 一 .目的： 目的： 目的 学习用Hagedorn-Jensen二氏微量滴定法测 学习用 二氏微量滴定法测 定血糖含量 • 二.原理 原理 动物血液中的糖主要是葡萄糖，其含量较恒定。 动物血液中的糖主要是葡萄糖，其含量较恒定。 用硫酸锌和氢氧化钠除去被检测血中的蛋白质制 成无蛋白血滤液。 成无蛋白血滤液。当将血滤液与标准铁氰化钾溶 液共热时,一部分铁氰化钾还原成亚铁氰化钾 一部分铁氰化钾还原成亚铁氰化钾， 液共热时 一部分铁氰化钾还原成亚铁氰化钾，并 与锌离子生成不溶性化合物。 与锌离子生成不溶性化合物。 向混合物中加入碘化物后， 向混合物中加入碘化物后，用硫代硫酸钠溶液 滴定所释放的碘。即可知剩余的铁氰化钾量。 滴定所释放的碘。即可知剩余的铁氰化钾量。血 糖越多，剩余的铁氰化钾越少， 糖越多，剩余的铁氰化钾越少，所消耗的硫代
将两个试管同时放入沸水浴中。 3. 将两个试管同时放入沸水浴中。准确煮沸四分钟 后将二试管的内容物用滤纸分别过滤到两个大试 管中，用蒸馏水冲洗沉淀和原来的试管两次， 管中，用蒸馏水冲洗沉淀和原来的试管两次，每 次用水3毫升。将溶液并在一起。 次用水3毫升。将溶液并在一起。 4. 向每个试管用吸管精确的加入标准铁氰化钾碱性 溶液2毫升，一同放入沸水浴中煮沸15分钟。 15分钟 溶液2毫升，一同放入沸水浴中煮沸15分钟。 冷却后分别加入氯碘溶液3毫升及3%醋酸2 3%醋酸 5. 冷却后分别加入氯-锌-碘溶液3毫升及3%醋酸2毫 升混匀。并加淀粉液两滴。 升混匀。并加淀粉液两滴。用标准硫代硫酸钠溶 液滴定至蓝色消失为止。 液滴定至蓝色消失为止。 血糖含量的计算： 6. 血糖含量的计算： 根据血糖值换算表将样品滴定值和对照滴定 值的差值折合成糖值。将此糖值乘以1000 1000， 值的差值折合成糖值。将此糖值乘以1000，即为
100毫升血液中含葡萄糖毫克数。 毫升血液中含葡萄糖毫克数。 毫升血液中含葡萄糖毫克数 当量/升硫代硫酸钠 表（书53页）列出了 页 列出了0.005当量 升硫代硫酸钠 当量 溶液的用量（毫升）和血糖含量（毫克/毫升 毫升） 溶液的用量（毫升）和血糖含量（毫克 毫升）的 换算关系。 换算关系。 表中最左边纵行中的数字是滴定时消耗的0.005 表中最左边纵行中的数字是滴定时消耗的 当量/硫代硫酸钠溶液的毫升数的整数及小数后第 当量 硫代硫酸钠溶液的毫升数的整数及小数后第 一位。 一位。表中最上边的横行代表其小数后第二位数 表中交叉点的数字为0.1毫升血液所含葡萄糖 字，表中交叉点的数字为 毫升血液所含葡萄糖 的毫克数。 的毫克数。
硫酸钠也越少。硫代硫酸钠溶液用量与血糖的关系 硫酸钠也越少。 可以由经验确定下来的数字表查出。 可以由经验确定下来的数字表查出。此过程可以用 反应式表示如下： 反应式表示如下： K3Fe(CN)6+糖→K4Fe(CN)6+糖的氧化产物 糖 糖的氧化产物 2K4Fe(CN)6+3ZnSO4→K2Zn3[Fe(CN)6]2↓+3K2SO4 ↓+3
法滴定的指示剂，可长期保存。 法滴定的指示剂，可长期保存。 8. 鸡。
操作方法： 五. 操作方法：
1. 取两个试管，各加入 取两个试管，各加入0.45%硫酸锌 毫升及 摩 硫酸锌5毫升及 硫酸锌 毫升及0.1摩 毫升氢氧化钠溶液1毫升 尔/毫升氢氧化钠溶液 毫升，此时产生氢氧化锌 毫升氢氧化钠溶液 毫升， 胶状沉淀。 胶状沉淀。 2. 用微量吸管精确的吸取血液 毫升。擦去吸管尖 用微量吸管精确的吸取血液0.1毫升 毫升。 端周围的血。 端周围的血。将血吸入一个装有氢氧化锌的试管 中，并仔细地用吸入和放出溶液的方法洗微量吸 管三次。另一试管中加入0.1毫升蒸馏水为对照管 管三次。另一试管中加入 毫升蒸馏水为对照管
入预先准备好的炼制无水碳酸钠10.6克，定溶到1升。 克 定溶到 升 入预先准备好的炼制无水碳酸钠 将溶液放在棕色瓶内，于阴暗处保存。 将溶液放在棕色瓶内，于阴暗处保存。 4. 氯-锌-铁溶液 锌 铁溶液 取硫酸锌50克及纯氯化钠 克及纯氯化钠250克，定溶到 升， 取硫酸锌 克及纯氯化钠 克 定溶到1升 作为母液。临用前根据所需要的试剂量加入碘化 作为母液。 钾，使它在混合液中的浓度为25克/升。 使它在混合液中的浓度为 克 升 5. 标准 标准0.005当量 升硫代硫酸钠溶液 当量/升硫代硫酸钠溶液 360毫升 当量 毫升 临用时由标准0.1当量 当量/升硫代硫酸钠溶液稀释 临用时由标准 当量 升硫代硫酸钠溶液稀释 6. 3%醋酸溶液（不含铁） 醋酸溶液（ 100毫升 醋酸溶液 不含铁） 毫升 7. 1%可溶性淀粉溶液 20毫升 可溶性淀粉溶液 毫升 1克可溶性淀粉溶于 毫升沸水中然后加入 毫升 克可溶性淀粉溶于10毫升沸水中然后加入 克可溶性淀粉溶于 毫升沸水中然后加入90毫升 饱和氯化钠溶液中。 饱和氯化钠溶液中。此溶液可作为大多数碘量
用碘量法测定剩余的标准K3Fe(CN)6:
2K3Fe(CN)6+2KI+8CH3COOH→ → 2H4Fe(CN)6+I+8CH3COOK 2Na2S2O3+I→2NaI+Na2S4O6
器材： 三.器材： 器材 1. 微量滴定管 2. 0.1毫升微量吸血管 毫升微量吸血管 3. 沸水浴 4. 50x90毫米大试管 毫米大试管 四.试剂与材料 试剂与材料 1. 0.45%硫酸锌溶液（新配制） 硫酸锌溶液（ 250毫升 硫酸锌溶液 新配制） 毫升 2. 0.1摩尔 升氢氧化钠溶液（新配制） 50毫升 摩尔/升氢氧化钠溶液 摩尔 升氢氧化钠溶液（新配制） 毫升 3. 0.005当量 升铁氰化钾碱性溶液 当量/升铁氰化钾碱性溶液 100毫升 当量 毫升 用分析天平称化学纯铁氰化钾165克，溶解后加 用分析天平称化学纯铁氰化钾 克