臭氧灭菌效果验证

#########生产线臭氧灭菌效果验证方案

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验证目录1 引言

1. 1 概述

1. 2 验证小组成员

2 目的

3 适用范围

4 验证判定标准

5 验证条件确认

5. 1 验证用仪器检验清单确认

5. 2 文件或资料确认

5. 3 检验方法确认

6 验证内容及步骤

6. 1 臭氧浓度分布测试

6. 2 沉降菌测试

6. 3 臭氧消毒时间间隔的测试

7 洁净区中重要机械表面细菌数的测定

8 验证结果记录及分析

8 验证结论及再验证

9 验证计划

1 引言

1. 1 概述

臭氧(O3)是氧的同素异形体，由三个氧原子(O)组成。由于臭氧在常温下结构极不稳定，很快自行分解成（O2）和单个氧原子（O）后者具有很强的活性，对细菌有极强的氧化作用，可氧化分解细菌内部氧化葡萄糖所必需的酶，从而破坏其细胞膜，将它杀死，多余的氧原子则会自行重新结合成为普通的氧分子（O2），不存在任何有害残留物，故称无污染消毒剂。

臭氧消毒是利用HVAC系统的循环风作为臭氧的载体，即将臭氧发生器产生的臭氧体由HVAC系统中的净化风机产生的压力风源扩散至整个洁净区域，并且使空气中臭氧浓度均匀，在洁净区域的生产环境不增加任何消毒设备，即可

达到灭菌的目的，对HVAC系统(净化空调，初、中效过滤器，送回风管道，高效过滤器等)起到杀灭细菌和霉菌的效果。同时在开启臭氧消毒前,打开洁净区域中机械的保护盖对其进行消毒，也能达到灭菌效果。

本次验证是对KCF-W150B型臭氧发生器的一次性灭菌的效果验证。KCF-W150B型臭氧发生器放置在空调房间，与编号为########的净化空调系统相连。

消毒时，启动空调机及臭氧发生器，关闭相应的新风进口和########的风机，使整个被消毒的洁净区空气通过净化系统风管形成循环。

按《臭氧发生器安全操作维护程序》开启臭氧发生器，进行房间灭菌。臭氧发生器开启40min后测试房间臭氧浓度随时间变化情况,50min后测试房间臭氧浓度随空间的变化情况。臭氧发生器开启2小时后进行沉降菌测试。

在对臭氧发生器安装调试合格后,通过一次性灭菌.每间隔三天对有代表性和气流扰动小的地方进行沉降菌的测定.记录沉降菌落数不超过沉降菌警戒线（沉降菌落数小于8个）的效期,并结合车间的生产要求,提前一段时间作为冬季臭氧消毒的间隔.由于本次测定在11到12月期间进行,只能对冬季臭氧消毒时间间隔进行测定,对于夏季臭氧消毒时间间隔,待可行时间（5月-10月）进行测定。.

1. 2 验证小组成员

2 目的

检查并确认臭氧灭菌效果是否符合要求,以及臭氧消毒开启的时间间隔.

3 适用范围

本方案仅适用于#######生产线的臭氧灭菌效果验证。

4 验证判断标准

(1)臭氧浓度-时间与空间分布的标准.

1.1臭氧浓度一时间分布的标准. 在臭氧发生器开启后40min后，所有洁净区域中臭氧浓度达到10ppm（臭氧灭菌浓度参考卫生部1991年12月颁布的《消毒技术规范》），并且在发生器关闭之前不得低于此浓度。

1.2臭氧浓度-空间分布的标准：在臭氧发生器开启40min后，所有洁净区域中臭氧浓度不低于10ppm（臭氧灭菌浓度参考卫生部1991年12月颁布的《消毒技术规范》）。

(2) 沉降菌标准：微生物最大允许数10个（CFU/皿）《药品生产验证指

南》。

(3) 臭氧消毒时间间隔的测试:沉降菌落数小于等于8 (CFU/皿)《药品生产验证指南》。

(4) 洁净区中重要机械表面沉降菌落的测定：细菌数小于20(CFU/inch2)《药品生产验证指南》。

5 验证条件确认

5. 1 验证用仪表检验清单确认

5. 2 文件或资料确认

5. 3 检验方法确认

6 验证内容及步骤

6. 1 臭氧浓度分布测试

6. 1. 1 臭氧-时间分布测试

6. 1. 1. 1 采样地点：选取距离空调风箱送风口最远且送风口分布最稀少的房间，选择原辅料。

6. 1. 1. 2 采样方案

原辅料间：臭氧发生器开启40min后，每30min采样一次，采样量1.0 L (采样器流量0．1 L/次，拉手柄10次)；连续监测3hr；臭氧发生器关闭，空调送风时采样一次，20min后采样一次(监测在空调送新风时臭氧浓度衰减)，采样量1.0 L (采样器流量0．1 L/次，拉手柄10次) 。

6. 1. 2 臭氧浓度-空间分布测试

6. 1. 2. 1 采样地点：选取如下关键房间

缓冲双铝包装压片室分析总混制粒称量粉碎过筛。

6. 1. 2. 2 采样方案

一从臭氧发生器开启50min后依次采样；

—采样量1.0L(采样器流量0．1 L／次，拉手柄10次)

6. 1. 3 每一采样点同时采两个平行样。

6. 1. 4 采样时采样人员应戴防毒口罩，防止臭氧中毒。

6. 1. 5 检验方法及数据处理

6. 1. 5. 1 具体测定方法见附录

6. 1. 5. 2 两个平行样臭氧浓度的平均值作为该采样点的臭氧浓度

6. 2 沉降菌测试

按沉降菌测试标准操作程序取样。

6. 3 臭氧消毒时间间隔的测试

6. 3. 1 采样地点：缓冲双铝包装压片室分析总混制粒称量粉碎过筛原辅料。

6. 3. 2 采样的时间间隔：每间隔三天对以上房间进行沉降菌测试

6. 3. 3 采样方案：按沉降菌测试标准操作程序取样。

7 洁净区中重要机械表面沉降菌落的测定.

7. 1 采样机械压片室中的旋转压片机，型号ZP-31D,设备编号：T201

总混中的二维运动混合机，型号EYH-1000A,设备编号：T110

制粒室中的高速混合制粒机，型号GHL-200,设备编号：T103 7. 2 采样标准：选择经常接触药物且不易清洗的部位。

7. 3 采样方案：消毒结束后，对洁净室中的机械表面的一定面积（inch2），用事先经过灭菌的生理盐水湿润的适当大小的灭菌纱布充分擦拭，然后放入光口瓶中，加一定量浸出液振摇，再对浸出液进行细菌的培养。

7. 4 每一采样点同时采两个平行样。

8验证结果记录及分析