改善营养性贫血功能评价方法

改善营养性贫血功能评价方法

（征求意见稿）

保健食品评价试验项目、试验原则及结果判定

Items, Principles and Result Assessment

改善营养性贫血功能

1 试验项目

动物实验

1.1.1 体重

1.1.2 血红蛋白

#

1.1.3红细胞比积/红细胞游离原卟啉

人体试食试验

1.2.1 血红蛋白

1.2.2 血清铁蛋白

1.2.3 红细胞游离原卟啉/红细胞运铁蛋白饱和度

2 试验原则

动物实验和人体试食试验所列指标均为必做项目。

针对儿童的人体试食试验，只测血红蛋白和红细胞内游离原卟啉。

在进行人体试食试验时，应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。

3 结果判定

动物实验：血红蛋白指标阳性，红细胞游离原卟啉/红细胞压积二项指标一项指标阳性，可判定该受试样品改善营养性贫血功能动物实验结果为阳性。

…

人体试食试验

3.2.1针对改善儿童营养性贫血功能的，血红蛋白和红细胞内游离原卟啉二项指标阳性，可判定该受试样品具有改善营养性贫血功能作用。

3.2.2针对改善成人营养性贫血功能的，血红蛋白指标阳性，血清铁蛋白、红细胞内游离原卟啉/血清运铁蛋白饱和度二项指标一项指标阳性，可判定该受试样品具有改善营养性贫血功能作用。

改善营养性贫血功能检验方法

Method for the Assessment of Improving

Nutritional Anaemia Function

1.动物实验

原理

用低铁饲料喂饲动物可形成实验性缺铁性贫血模型，再给予受试样品，观察其对血液细胞学、血液生化学等指标的影响，可判定该受试样品对改善动物营养性贫血的作用。

实验动物

【

健康初断乳大鼠，单一性别，每组大鼠8-12只。

低铁饲料

配方：

成分添加量

g/kg

玉米淀粉

蛋清蛋白*

蔗糖,

玉米油（无添加剂）

纤维素

混合矿物盐(AIN-93G-MX)

混合维生素(AIN-93G-VX)

L-胱氨酸

；

氯化胆碱

* 亦可使用EDTA处理的酪蛋白

AIN-93G混合矿物盐配方

矿物质添加量

g or mg/kg mix

Calcium carbonate anhydrous

Potassium phosphate monobasic&

Potassium citrate, tripotassium monohydrate

Sodium chloride

Potassium sulfate

Magnesium oxide

Zinc carbonate

》

Sodium meta-silicater9H2O

Manganous carbonate

Cupric carbonate

Chromium potassium sulfater12H2O

Boric acid % B), mg

Sodium fluoride % F), mg》

Nickel carbonate (45% Ni), mg

Lithium chloride % Li), mg

Sodium selenate anhydrous% Se), mg

表3 AIN-93G混合维生素配方

维生素添加量

·

g/kg mix

Nicotinic acid

Ca pantothenate

Pyridoxine-HCl

Thiamin-HCl

Riboflavin

…

Folic acid

Biotin

Vitamin B-12 (cyanocobalamin) % in mannitol)

Vitamin E (all-rac-a-tocopheryl acetate)2 (500 IU/g)

Vitamin A (all-trans-retinyl palmitate)2 (500,000 IU/g)

Vitamin D-3 (cholecalciferol) (400,000 IU/g)【

Vitamin K-1 (phylloquinone)

Powdered sucrose

剂量分组及受试样品给予时间

实验设三个剂量组和一个低铁对照组，以人体推荐量的5倍为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组（硫酸亚铁或乳酸亚铁，剂量为2ppm或2mg/(kgbw)，以Fe 元素计）。受试样品给予时间30天，必要时可延长至45天。

实验步骤

1.5.1 建立缺铁性贫血大鼠模型

选用健康断乳大鼠在实验环境下适应3～5天后饲予低铁饲料及去离子水（或双蒸水），采用不锈钢笼及食罐，同时，采用剪尾取血法放血，5天一次，每次~。实验过程中避免铁污染。自第3周开始每周选取部分大鼠采尾血测Hb，如多数动物Hb低于100g/L时，测定全部大鼠的体重及Hb。

；

1.5.2 恢复实验

选取Hb<100g/L的大鼠作为实验动物，根据贫血大鼠Hb水平和体重将其随机分为低铁对照组和三个实验组，各组均继续饲予低铁饲料，低铁对照组给予相应溶剂，实验组分别给予不同剂量的受试样品，受试样品给予时间30天，必要时可延长至45天，测定体重及各项血液学指标。

观察指标