荧光原位杂交技术样本

硕士学位论文

荧光原位杂交技术及其在环境领域内应用Fluorescence in situ hybridization technology and its application in

the field of environment

作者姓名： **

学科、专业：环境科学与工程

学号： ********

指导教师： ***

完成日期： /3/26

大连理工大学

Dalian University of Technology

摘要

荧光原位杂交（FISH）是当代分子生物学及基因工程中广泛应用新技术，本文概述了FISH实验原理、实验流程以及技术问题等。总结了某些实验核心环节操作要点和注意事项，并对荧光原位杂交技术在环境微生物监测方面应用做了综述。运用FISH技术在环境样品上直接原位杂交，不但可以测定不可培养微生物形态特性及丰度，并且可原位分析它们空间及数量分布。并且展望了FISH技术将来。

核心词：荧光原位杂交技术；探针；环境微生物；监测

Abstract

Fluorescence in situ hybridization （FISH）is a new technology which is widely used in modern molecular biology and genetic engineering. This article summarizes the experimental principle，process and technical issues of FISH .Also we summarize some operation points and matters needed attention of key steps，and review application of FISH in environmental microbe monitoring. Using FISH technology directly in the environmental samples，can not only measure the morphology and abundance of uncultured microorganisms，but also analyse their spatial distribution and quantity in situ. And look forward to the future of FISH.

Key Words：Fluorescence in situ hybridization technology；Probe；Environmental microbes；monitoring

目录

摘要............................................................................................. 错误!未定义书签。Abstract ............................................................................................... 错误!未定义书签。

1 荧光原位杂交技术简介............................................................... 错误!未定义书签。

1.1 FISH发展历史 .................................................................. 错误!未定义书签。

1.2 FISH原理 .......................................................................... 错误!未定义书签。

1.3 FISH基本过程 .................................................................. 错误!未定义书签。

1.3.1 探针制备................................................................... 错误!未定义书签。

1.3.2 探针标记................................................................... 错误!未定义书签。

1.3.3杂交前解决................................................................ 错误!未定义书签。

1.3.4 杂交........................................................................... 错误!未定义书签。

1.3.5荧光检测与成果分析................................................ 错误!未定义书签。

1.4 FISH技术特点 .................................................................. 错误!未定义书签。

1.5 常用技术问题及解决办法................................................ 错误!未定义书签。

1.5.1 FISH检测假阳性 ...................................................... 错误!未定义书签。

1.5.2 FISH检测假阴性 ...................................................... 错误!未定义书签。

2 FISH技术在环境领域应用 ......................................................... 错误!未定义书签。

2.1 对硝化细菌监测................................................................ 错误!未定义书签。

2.2 对除磷细菌监测................................................................ 错误!未定义书签。

2.3 FISH技术在丝状微生物研究中应用 .............................. 错误!未定义书签。

2.4 对厌氧颗粒污泥中微生物监测........................................ 错误!未定义书签。

2.5 对自然环境中微生物多样性监测.................................... 错误!未定义书签。

3 将来展望....................................................................................... 错误!未定义书签。