酶的特性

酶的特性.txt女人谨记：一定要吃好玩好睡好喝好。一旦累死了，就别的女人花咱的钱，住咱的房，睡咱的老公，泡咱的男朋友，还打咱的娃。实验五酶的特性

【实验目的】

1．了解pH、温度、激活剂、抑制剂对酶活力的影响。

2．了解酶的特异性2.掌握检查酶特异性的方法及原理

【实验原理】

酶的特点之一对环境酸碱度敏感。酶表现最大活力时的pH值称为酶的最适pH值。一般酶的最适pH值在4～8之间。

酶的催化作用受温度的影响很大，反应速度达到最大值时的温度称为酶的最适温度。大多数动物酶的最适温度为37～40℃，大多数植物酶的最适温度为50～60℃。

激活剂能增加酶的活力，抑制剂会降低酶的活力。

淀粉与各级糊精遇碘呈现不同的颜色。在不同pH、温度以及激活剂、抑制剂存在下，唾液淀粉酶对淀粉水解活力的高低可通过水解混合物遇碘呈现颜色的不同来判断。

酶是生物催化剂，酶对所作用的底物有严格的选择性，即酶的特异性。淀粉和蔗糖都是非还原性糖，分别为唾液淀粉酶和蔗糖酶的专一底物。淀粉被唾液淀粉酶水解生成具有还原性的麦芽糖，蔗糖被蔗糖酶水解生成具有还原性的葡萄糖和果糖。Benedict试剂（含有Cu2+）常用于检验还原糖的存在，其被还原后生成砖红色的氧化亚铜（Cu2O）沉淀。

【器材及试剂】

器材：1. 恒温水浴锅 2. 试管及试管架 3. 滤斗 4. 吸量管 5. 量筒烧杯

6.吸量管（1、2、5、10ml）

7. 白瓷板

8. pH试纸

试剂： 1. 0.5%蔗糖 2. 新配制的溶于0.3％NaCl的0.5％淀粉溶液3. 唾液淀粉酶溶液4. Benedict试剂1.；5. 0.2mol／L Na2HPO4溶液 ; 0.1mol／L柠檬

酸溶液； 6. KI－碘溶液

锥形瓶号试剂

0.2mol/L Na2HPO4（ml） 0.1mol/L柠檬酸（ml）缓冲液pH

1 5.15 4.85 5.0

2 7.72 2.28 6.8

3 9.72 0.28 8.0

【实验步骤】

1. 温度对酶活力的影响

(1) 取试管3支，编号后按下表加入试剂：

管号淀粉溶液(ml) 稀释唾液(ml) 酶液温度℃现象

1 3.0 3.0 1.0 0℃3.0

2 3.0 3.0 1.0 -37℃

3 3.0 3.0 1.0 90℃以上

摇匀，将2号试管放入37℃恒温水浴中，1号试管放入冰水中,3号管放入沸水浴。用KI－碘溶液检验各管内淀粉被水解的程度。记录水解时间.

2.pH值对酶活力的影响

取试管3支，标号，按下表所列的次序操作：

试剂缓冲溶液

管号 1%淀粉溶液（ml） Ph5 pH6.8 pH8 唾液淀粉酶（ml）现象

1 3.0 2.0 1.0

2 3.0 2.0 — 1.0

3 3.0 — 2.0 1.0

摇匀后放入37℃恒温水浴锅中保温,检测淀粉水解程度,并测定淀粉完全水解所需的时间。按照第2号试管的保温时间，依次将各管迅速取出，并立即加入KI－碘溶液1滴。观察各管呈现的颜色，观察pH对唾液淀粉酶活力的影响，并确定其最适pH。

3. 激活剂和抑制剂对酶活力的影响

取试管4支，按下表编号加入相应试剂：

管号 0.5%淀粉水溶液 0.1%NaCl 0.1%NaCl 0.1%NaCl H2O 现象

1 3.0 1.0 — --- —

2 3.0 — 1.0 — ---

3 3.0 —— 1.0 ---

4 3.0 ---- --- — 1.0

摇匀，置37℃水浴中保温，用碘液检测淀粉水解程度。

4.淀粉酶的特异性

取试管5支，标号，按下表所列的次序操作：

试剂试管编号

1 唾液淀粉酶（ml）现象

0.5%淀粉溶液（ml） 2.0 1.0

0.5%蔗糖溶液（ml） 2.0 1.0

各管加完试剂后，放37℃恒温水浴保温10min，然后每管加入Benedict试剂1ml，再放沸水浴5min。观察各管颜色变化，并解释实验结果。

【实验结果与分析】

分析pH值、温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响;淀粉酶的特异性

复习思考题、作业题：

1. 什么是酶的最适温度？有何实践意义？

2. 什么是酶的最适pH？它是否是一个常数？它与哪些因素有关？这种性质对于选择测定酶活力的条件有什么意义？

3. 酶反应的抑制作用有哪些类型？各根据什么划分的？它们各有什么特点？

4.什么是酶的特异性？本实验如何验证了酶的特异性？