第18章 基因诊断与基因治疗
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第十八章
基因诊断与基因治疗
Gene Diagnosis and Gene Therapy 南方医科大学基因工程研究所 生物化学与分子生物学教研室 周珏宇
zhoujueyu@126.com
1
主要内容
1
基因诊断
2
基因治疗
2
教学要求
【教学课时】 2 学时 【掌握内容】
基因诊断的含义、特点；基因治疗的概念。 【熟悉内容】
基因诊断的各种常用技术方法；基因治疗的载 体系统与导入方法。 【了解内容】 基因诊断、基因治疗在医学中的应用
3
基因变异致病类型
内源基因的变异 基因结构突变 基因表达异常
外源基因的入侵
4
第一节 基因诊断
Gene Diagnosis
5
一、基因诊断的概念和特点
定义 利用现代分子生物学和分子遗传学的技术
和方法，直接检测基因结构及其表达水平是否 正常，从而对疾病作出诊断的方法。
6
一、基因诊断的概念和特点
特点 1. 特异性高，针对性强 2. 灵敏度高: 3. 早期诊断 4. 取样方便 5. 安全高效 6. 适应范围广
7
二、基因诊断常用技术方法
（一）核酸分子杂交技术 （二）聚合酶链反应 (PCR) （三）基因测序 （四）生物芯片
8
（一）核酸分子杂交技术
概念
核酸分子杂交技术是依据DNA双链碱基 互补、变性和复性原理，用已知碱基序列 的单链核酸片段作为探针检测样本中是否 存在与其互补的同源核酸序列。
9
分类
液相杂交：待测的核酸样本与特异性探针同 时溶于杂交液中进行反应。
固相杂交：将待检测核酸样本先行结合到某 种固相支持物上，再与杂交液中的特异性标 记探针进行杂交反应，然后漂洗去除未参加 反应的核酸探针。
11
分子杂交操作程序
制备待测核酸样品
制备核酸探针
分离、变性、转移、固化DNA片段
标记核酸探针
预杂交
加入标记核酸探针
杂交 漂洗除去未参与杂交的标记探针
检测杂交信号
核酸探针是指带有标记的某一特定DNA或 RNA片断，能与待测样本中单链核酸分子互 补配对结合，进而检测同源序列。 探针标记物有放射性核素或非放射性核素（生 物素、地高辛、荧光素等）两大类。
13
常用的固相核酸杂交方法 Southern印迹杂交、Northern印迹杂交、 菌落杂交、斑点杂交（狭缝杂交）、原位杂 交、夹心杂交等。
14
Southern印迹
由 英 国 人 Southern (1975) 发 明 ， 将 琼 脂 糖 中 的 DNA 转 移 到 硝 酸 纤 维素膜或尼龙膜上进行 DNA 分 子 杂 交 分 析 的 方 法。
Northern
印 迹
是经典的RNA分析法，用于组织细胞中总 RNA或 mRNA 的 定 性 和 定 量 分 析 。 过 程 类 似 于 Southern blotting。
放 射 自 显 影 照 片
聚偏二氟乙烯 辣根过氧化物酶
Western印迹 用于蛋白质的分析
三 种 印 迹 技 术 的 比 较
菌落杂交（colony hybridization）
该法可从大量细菌中筛选含特异的DNA序列及基因工程 重组体。
硝酸纤维膜
菌落
硝酸纤维膜
琼脂培养板
复制培养
溶菌、中和
鉴定克隆 （含感兴趣DNA）
蛋白酶处理
漂洗、烘干 1、32P探针 2、放射自显影
菌落杂交
夹心杂交法 (sandwich hybridization)
RE A
RE B
A
B
A
片段A检测探针(标记)
固
片段B捕获探针 相
B
支
持
物
原位杂交（in situ hybridization）
将标记探针与细胞或组织切片中的核酸进行杂 交，进而检测特异的DNA或RNA序列。
细胞原位杂交 组织切片原位杂交
该法优点：
不需提取核酸，故可完整保持组织或细胞的形态， 因而更能准确地反映组织细胞的功能状态。
小鼠大脑皮层mRNA原位杂交
细胞原位杂交
（二）聚合酶链反应技术 1. 发展简史
1988 Saiki 1988 Keohanog 1985 Mullis 1971 Korana
耐热DNA聚合酶 T4 DNA聚合酶 聚合酶链式反应(Klenow片段) 核酸体外扩增设想
25
PCR技术让Mullis荣获1993年度诺贝尔化学奖。
26
2. PCR基本原理
利用体内DNA复制的原理和DNA变性与复性的 性质进行目的基因的大量扩增。
在模板、dNTP、Mg2+等条件下，用耐热的 Taq酶代替DNA聚合酶，用合成的DNA引物代替 RNA引物，经过DNA变性、引物与模板结合（复性） 和延伸3个步骤的循环过程，实现对目的DNA的扩 增。
27
3. PCR的基本反应步骤
溶液反应温度 升至中温72℃ ，在 Taq酶作 用下，以 dNTP为原料 ，引物为复制 起点，模板 DNA的一条单 链在解链和退 火之后延伸为 一条双链
延伸
72˚C
变性
95˚C
加热使模板DNA 在高温下90- 95 ℃ 变性，双链解链
退火
Tm-5˚C
降低溶液温 度，使合成 引物在低温 （35－70℃, 一般低于模 板Tm值的 5℃左右）， 与模板DNA 互补退火形 成部分双链
PCR技术原理示意图
Template DNA
5
5
5
Cycle 1
Primer 1 5 Primer 2
5 5
5 5
Cycle 2
5 5
5
5
5
5
5 5
5 5
5 5
Cycle 3
5
5
5
5
5
5
5
5
5 5
5 5
25～30 次循环后，模板DNA的含量可以
扩大100万倍以上。
PCR技术原理示意图
这样经过一个周期的变性—复性—延伸等 三步反应就可以产生倍增的DNA，反复n个周 期后，理论上就能扩增为2n倍，一般经过 30~40周期就能扩增100万倍以上。
32
4. PCR的特点
特异性强 灵敏度高 PCR产物的生成量是以指数方 式增加的，能将pg=10-12级的起始待测模 板扩增到微克(g=10-6)水平 简便、快速 PCR反应一般在2～4 小时 完成扩增反应 对标本的纯度要求低 DNA 粗制品可作为 扩增模板。可直接用临床标本如血液、体 液、毛发、细胞、活组织等扩增检测
33
5. PCR各要素及其作用
模板(DNA/RNA) 耐热DNA聚合酶 特异性引物 缓冲液与Mg2+ dNTP浓度、比例 参数
34
模板： PCR模板可以是DNA或RNA。以线性 DNA模板为佳，起始量一般为102～105个拷 贝；模板量合适可以减少PCR多次循环所致 的碱基错配的发生率。 耐热DNA聚合酶：最重要因素之一，主要有 Taq DNA聚合酶等。是从耐热菌体内提取的 一种DNA聚合酶，可在95℃稳定30 min。
缓冲液与Mg2＋：10～50 mmol/L Tris-HCl （pH 8.3～8.8，20˚C ）；Mg2＋过低，酶活 力明显降低； Mg2＋浓度过高时，使反应特异 性降低。 dNTP：原料。高浓度易产生错误掺入，而浓 度过低，则降低反应产物的产量。常用浓度为 50～200 mol/L
引物：是根据已知序列的模板DNA待扩增区 两端而设计的一对寡核苷酸小片断，长度一般 为1530个碱基。 引物是保证PCR扩增产物的大小和特异性的 关键因素，其设计与合成对PCR的成功至关 重要。
引物设计的基本要求
1. 引物的长度一般为15~30 bp 2. G＋C含量一般为40~60％ 3. 引物的碱基成分应尽量随机分布，避免出现嘌呤或嘧 啶堆积的现象 4. 引物不应有自身互补序列 5. 两个引物之间不应有多于4个的互补 6. 引物的延伸是在3'端开始，3'端不能进行任何修饰 7. 引物5'端可修饰 8. 引物与非特异结合区之间的同源性不要超过70％
PCR反应参数
变性温度与时间 退火温度与时间
退火温度决定PCR的特异性；Tm-5˚C
延伸温度与时间
Taq DNA聚合酶活性最高温度；35-100 bp/min
循环次数
主要取决于模板DNA的浓度；平台期
6. PCR产物分析
凝胶电泳分析法
40
点杂交分析法
（三）生物芯片（biochip）
采用光导原位合成或微量点样等方法，将大量生物大分 子比如核酸片段、多肽分子甚至组织切片、细胞等生物样品 有序地固化于支持物（如玻片、硅片、尼龙膜等载体）的表 面，组成密集的二维分子排列，然后与已标记的待测生物样 品中靶分子杂交，通过特定的仪器（比如激光共聚焦扫描仪） 对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析，从而 判断样品中靶分子的数量。
41
正常样品 Cy3标记
叠加
待测样品 Cy5标记
叠加图：绿色代表下调；红色 代表上调 ；黄色无差异。
石奕武，胡维新等：多发性骨髓瘤的基因表达谱分析， 湖南医科大学学报，2003，28（3）：201－205
1. 芯片的制备
AGC T Oligo probes
or
arrayer
Gene probes （cDNA、DNA）
substrate
Ready-to-use microarray
2. 基因表达谱双色标记
Sample cells
1) 2)
Labeled RNA or DNA (Sample )
3)
1) Extract RNA or DNA 2) RT or PCR amplification 3) Fluorescent labeling
combine
1) 2)
Reference cells
3)
Sample ready
Labeled RNA or DNA (Reference)
3. 分子杂交
Apply sample
1) hybridize 2) rinse
4. 检测分析
芯片的扫描
Laser 1 Laser 2
Detector 1
Detector 2
Scanner
5. 图 像 处 理
Detector 1
Detector 2
False-color differential image
6. 图 像 分 析
（四）基因测序
是最直接、最确切的基因诊断方法。
•Maxam-Gilbert法（化学裂解法）
•Sanger法（双脱氧末端终止法）
•DNA自动测序法
弗雷德里克 桑格
51
化学裂解法(Maxam-Gilbert法)
基本原理
基于某些化学试剂可以使DNA链在1个或2个碱 基处发生专一性断裂的特性，精确地控制反应强度， 使一个断裂点仅存在于少数分子中，不同分子在不同 位点断裂，从而获得一系列大小不同的DNA片段，将 这些片段经电泳分离。
分析前，用同位素标记DNA的5´末端，经放射 自显影即可在X胶片上读出DNA链的序列。
Sanger法（双脱氧末端终止法）
①以待测DNA单链为模板，在DNA聚合酶作用下，加 入4种dNTP和4种ddNTP（双脱氧核糖核酸） ②dNTP和ddNTP竞争参与DNA互补链的合成 ③当ddNTP取代dNTP的位置后，DNA链的合成终止 ④电泳图谱分析，确定碱基顺序 ⑤图谱中读出的顺序是待测链的互补碱基顺序
双脱氧核苷酸结构
5´ CTGACTTCGACAAAGAA 3´未知序列的单链DNA TGTT 放射性标记的引物
Sanger法 （双脱氧末 端终止法）
较大片段
较小片段
Klenow酶 dNTP
ddATP ddCTP ddTTP ddGTP
反应混合物
凝胶电泳
ACT G
ddG ddG ddG ddG
读出模板互 补序列
3´
5´
G A C T G A A G C T G T T
5´
C
T
G
A
C
T
T
C 读出待测 G
序列
A C
A
A
3´
DNA自动测序法
设计原理：Sanger法为基础 荧光标记物：不同颜色的荧光分
别代表A、G、C、T 电泳→电信号→显示
三、基因诊断的应用
➢ 遗传病 产前诊断、优生优育 ➢ 肿瘤 了解恶性肿瘤的分子机制，对肿瘤分类分型
及预后有指导意义。
➢ 感染性疾病 具有快速、灵敏、特异等优点。 ➢ 法医学中个体识别、亲子鉴定
有些具有个体特征的遗传标记可用于个体识别和亲 子鉴定，如DNA指纹分析、短串联重复（STR）多态性 分析等。
58
镰刀状红细胞贫血患者基因组的限制性酶切分析
b-珠蛋白基因第六密码子 GAG(Glu) →GTG(Val)
bA
CCT GAG GAG
MstⅡ酶切位点(CCTNAGG)
5´
1.15kb
bA
CCT GTG GAG
×
3´
正常基因
5´ 1.35kb
3´
突变基因
59
﹣
1.35kb
1.15kb
0.2kb
+
正常人 突变携带者 患者
60
杜氏肌营养不良症(DMD)的基因检测
DMD是一种高发病率、高致残、高致死的X染 色体连锁的遗传性疾病，在2500个活产男婴 中即有一个患者。
基因诊断与基因治疗
Gene Diagnosis and Gene Therapy 南方医科大学基因工程研究所 生物化学与分子生物学教研室 周珏宇
zhoujueyu@126.com
1
主要内容
1
基因诊断
2
基因治疗
2
教学要求
【教学课时】 2 学时 【掌握内容】
基因诊断的含义、特点；基因治疗的概念。 【熟悉内容】
基因诊断的各种常用技术方法；基因治疗的载 体系统与导入方法。 【了解内容】 基因诊断、基因治疗在医学中的应用
3
基因变异致病类型
内源基因的变异 基因结构突变 基因表达异常
外源基因的入侵
4
第一节 基因诊断
Gene Diagnosis
5
一、基因诊断的概念和特点
定义 利用现代分子生物学和分子遗传学的技术
和方法，直接检测基因结构及其表达水平是否 正常，从而对疾病作出诊断的方法。
6
一、基因诊断的概念和特点
特点 1. 特异性高，针对性强 2. 灵敏度高: 3. 早期诊断 4. 取样方便 5. 安全高效 6. 适应范围广
7
二、基因诊断常用技术方法
（一）核酸分子杂交技术 （二）聚合酶链反应 (PCR) （三）基因测序 （四）生物芯片
8
（一）核酸分子杂交技术
概念
核酸分子杂交技术是依据DNA双链碱基 互补、变性和复性原理，用已知碱基序列 的单链核酸片段作为探针检测样本中是否 存在与其互补的同源核酸序列。
9
分类
液相杂交：待测的核酸样本与特异性探针同 时溶于杂交液中进行反应。
固相杂交：将待检测核酸样本先行结合到某 种固相支持物上，再与杂交液中的特异性标 记探针进行杂交反应，然后漂洗去除未参加 反应的核酸探针。
11
分子杂交操作程序
制备待测核酸样品
制备核酸探针
分离、变性、转移、固化DNA片段
标记核酸探针
预杂交
加入标记核酸探针
杂交 漂洗除去未参与杂交的标记探针
检测杂交信号
核酸探针是指带有标记的某一特定DNA或 RNA片断，能与待测样本中单链核酸分子互 补配对结合，进而检测同源序列。 探针标记物有放射性核素或非放射性核素（生 物素、地高辛、荧光素等）两大类。
13
常用的固相核酸杂交方法 Southern印迹杂交、Northern印迹杂交、 菌落杂交、斑点杂交（狭缝杂交）、原位杂 交、夹心杂交等。
14
Southern印迹
由 英 国 人 Southern (1975) 发 明 ， 将 琼 脂 糖 中 的 DNA 转 移 到 硝 酸 纤 维素膜或尼龙膜上进行 DNA 分 子 杂 交 分 析 的 方 法。
Northern
印 迹
是经典的RNA分析法，用于组织细胞中总 RNA或 mRNA 的 定 性 和 定 量 分 析 。 过 程 类 似 于 Southern blotting。
放 射 自 显 影 照 片
聚偏二氟乙烯 辣根过氧化物酶
Western印迹 用于蛋白质的分析
三 种 印 迹 技 术 的 比 较
菌落杂交（colony hybridization）
该法可从大量细菌中筛选含特异的DNA序列及基因工程 重组体。
硝酸纤维膜
菌落
硝酸纤维膜
琼脂培养板
复制培养
溶菌、中和
鉴定克隆 （含感兴趣DNA）
蛋白酶处理
漂洗、烘干 1、32P探针 2、放射自显影
菌落杂交
夹心杂交法 (sandwich hybridization)
RE A
RE B
A
B
A
片段A检测探针(标记)
固
片段B捕获探针 相
B
支
持
物
原位杂交（in situ hybridization）
将标记探针与细胞或组织切片中的核酸进行杂 交，进而检测特异的DNA或RNA序列。
细胞原位杂交 组织切片原位杂交
该法优点：
不需提取核酸，故可完整保持组织或细胞的形态， 因而更能准确地反映组织细胞的功能状态。
小鼠大脑皮层mRNA原位杂交
细胞原位杂交
（二）聚合酶链反应技术 1. 发展简史
1988 Saiki 1988 Keohanog 1985 Mullis 1971 Korana
耐热DNA聚合酶 T4 DNA聚合酶 聚合酶链式反应(Klenow片段) 核酸体外扩增设想
25
PCR技术让Mullis荣获1993年度诺贝尔化学奖。
26
2. PCR基本原理
利用体内DNA复制的原理和DNA变性与复性的 性质进行目的基因的大量扩增。
在模板、dNTP、Mg2+等条件下，用耐热的 Taq酶代替DNA聚合酶，用合成的DNA引物代替 RNA引物，经过DNA变性、引物与模板结合（复性） 和延伸3个步骤的循环过程，实现对目的DNA的扩 增。
27
3. PCR的基本反应步骤
溶液反应温度 升至中温72℃ ，在 Taq酶作 用下，以 dNTP为原料 ，引物为复制 起点，模板 DNA的一条单 链在解链和退 火之后延伸为 一条双链
延伸
72˚C
变性
95˚C
加热使模板DNA 在高温下90- 95 ℃ 变性，双链解链
退火
Tm-5˚C
降低溶液温 度，使合成 引物在低温 （35－70℃, 一般低于模 板Tm值的 5℃左右）， 与模板DNA 互补退火形 成部分双链
PCR技术原理示意图
Template DNA
5
5
5
Cycle 1
Primer 1 5 Primer 2
5 5
5 5
Cycle 2
5 5
5
5
5
5
5 5
5 5
5 5
Cycle 3
5
5
5
5
5
5
5
5
5 5
5 5
25～30 次循环后，模板DNA的含量可以
扩大100万倍以上。
PCR技术原理示意图
这样经过一个周期的变性—复性—延伸等 三步反应就可以产生倍增的DNA，反复n个周 期后，理论上就能扩增为2n倍，一般经过 30~40周期就能扩增100万倍以上。
32
4. PCR的特点
特异性强 灵敏度高 PCR产物的生成量是以指数方 式增加的，能将pg=10-12级的起始待测模 板扩增到微克(g=10-6)水平 简便、快速 PCR反应一般在2～4 小时 完成扩增反应 对标本的纯度要求低 DNA 粗制品可作为 扩增模板。可直接用临床标本如血液、体 液、毛发、细胞、活组织等扩增检测
33
5. PCR各要素及其作用
模板(DNA/RNA) 耐热DNA聚合酶 特异性引物 缓冲液与Mg2+ dNTP浓度、比例 参数
34
模板： PCR模板可以是DNA或RNA。以线性 DNA模板为佳，起始量一般为102～105个拷 贝；模板量合适可以减少PCR多次循环所致 的碱基错配的发生率。 耐热DNA聚合酶：最重要因素之一，主要有 Taq DNA聚合酶等。是从耐热菌体内提取的 一种DNA聚合酶，可在95℃稳定30 min。
缓冲液与Mg2＋：10～50 mmol/L Tris-HCl （pH 8.3～8.8，20˚C ）；Mg2＋过低，酶活 力明显降低； Mg2＋浓度过高时，使反应特异 性降低。 dNTP：原料。高浓度易产生错误掺入，而浓 度过低，则降低反应产物的产量。常用浓度为 50～200 mol/L
引物：是根据已知序列的模板DNA待扩增区 两端而设计的一对寡核苷酸小片断，长度一般 为1530个碱基。 引物是保证PCR扩增产物的大小和特异性的 关键因素，其设计与合成对PCR的成功至关 重要。
引物设计的基本要求
1. 引物的长度一般为15~30 bp 2. G＋C含量一般为40~60％ 3. 引物的碱基成分应尽量随机分布，避免出现嘌呤或嘧 啶堆积的现象 4. 引物不应有自身互补序列 5. 两个引物之间不应有多于4个的互补 6. 引物的延伸是在3'端开始，3'端不能进行任何修饰 7. 引物5'端可修饰 8. 引物与非特异结合区之间的同源性不要超过70％
PCR反应参数
变性温度与时间 退火温度与时间
退火温度决定PCR的特异性；Tm-5˚C
延伸温度与时间
Taq DNA聚合酶活性最高温度；35-100 bp/min
循环次数
主要取决于模板DNA的浓度；平台期
6. PCR产物分析
凝胶电泳分析法
40
点杂交分析法
（三）生物芯片（biochip）
采用光导原位合成或微量点样等方法，将大量生物大分 子比如核酸片段、多肽分子甚至组织切片、细胞等生物样品 有序地固化于支持物（如玻片、硅片、尼龙膜等载体）的表 面，组成密集的二维分子排列，然后与已标记的待测生物样 品中靶分子杂交，通过特定的仪器（比如激光共聚焦扫描仪） 对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析，从而 判断样品中靶分子的数量。
41
正常样品 Cy3标记
叠加
待测样品 Cy5标记
叠加图：绿色代表下调；红色 代表上调 ；黄色无差异。
石奕武，胡维新等：多发性骨髓瘤的基因表达谱分析， 湖南医科大学学报，2003，28（3）：201－205
1. 芯片的制备
AGC T Oligo probes
or
arrayer
Gene probes （cDNA、DNA）
substrate
Ready-to-use microarray
2. 基因表达谱双色标记
Sample cells
1) 2)
Labeled RNA or DNA (Sample )
3)
1) Extract RNA or DNA 2) RT or PCR amplification 3) Fluorescent labeling
combine
1) 2)
Reference cells
3)
Sample ready
Labeled RNA or DNA (Reference)
3. 分子杂交
Apply sample
1) hybridize 2) rinse
4. 检测分析
芯片的扫描
Laser 1 Laser 2
Detector 1
Detector 2
Scanner
5. 图 像 处 理
Detector 1
Detector 2
False-color differential image
6. 图 像 分 析
（四）基因测序
是最直接、最确切的基因诊断方法。
•Maxam-Gilbert法（化学裂解法）
•Sanger法（双脱氧末端终止法）
•DNA自动测序法
弗雷德里克 桑格
51
化学裂解法(Maxam-Gilbert法)
基本原理
基于某些化学试剂可以使DNA链在1个或2个碱 基处发生专一性断裂的特性，精确地控制反应强度， 使一个断裂点仅存在于少数分子中，不同分子在不同 位点断裂，从而获得一系列大小不同的DNA片段，将 这些片段经电泳分离。
分析前，用同位素标记DNA的5´末端，经放射 自显影即可在X胶片上读出DNA链的序列。
Sanger法（双脱氧末端终止法）
①以待测DNA单链为模板，在DNA聚合酶作用下，加 入4种dNTP和4种ddNTP（双脱氧核糖核酸） ②dNTP和ddNTP竞争参与DNA互补链的合成 ③当ddNTP取代dNTP的位置后，DNA链的合成终止 ④电泳图谱分析，确定碱基顺序 ⑤图谱中读出的顺序是待测链的互补碱基顺序
双脱氧核苷酸结构
5´ CTGACTTCGACAAAGAA 3´未知序列的单链DNA TGTT 放射性标记的引物
Sanger法 （双脱氧末 端终止法）
较大片段
较小片段
Klenow酶 dNTP
ddATP ddCTP ddTTP ddGTP
反应混合物
凝胶电泳
ACT G
ddG ddG ddG ddG
读出模板互 补序列
3´
5´
G A C T G A A G C T G T T
5´
C
T
G
A
C
T
T
C 读出待测 G
序列
A C
A
A
3´
DNA自动测序法
设计原理：Sanger法为基础 荧光标记物：不同颜色的荧光分
别代表A、G、C、T 电泳→电信号→显示
三、基因诊断的应用
➢ 遗传病 产前诊断、优生优育 ➢ 肿瘤 了解恶性肿瘤的分子机制，对肿瘤分类分型
及预后有指导意义。
➢ 感染性疾病 具有快速、灵敏、特异等优点。 ➢ 法医学中个体识别、亲子鉴定
有些具有个体特征的遗传标记可用于个体识别和亲 子鉴定，如DNA指纹分析、短串联重复（STR）多态性 分析等。
58
镰刀状红细胞贫血患者基因组的限制性酶切分析
b-珠蛋白基因第六密码子 GAG(Glu) →GTG(Val)
bA
CCT GAG GAG
MstⅡ酶切位点(CCTNAGG)
5´
1.15kb
bA
CCT GTG GAG
×
3´
正常基因
5´ 1.35kb
3´
突变基因
59
﹣
1.35kb
1.15kb
0.2kb
+
正常人 突变携带者 患者
60
杜氏肌营养不良症(DMD)的基因检测
DMD是一种高发病率、高致残、高致死的X染 色体连锁的遗传性疾病，在2500个活产男婴 中即有一个患者。