影响酶活力的因素
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2.开始时的反应物浓度、酶浓度均不变。 时间——产物浓度;时间——反应物浓度。 每图再增加:①酶浓度增加一倍;②反应物浓度增加一倍。
产物 浓度 ③ 改变纵坐标含义
反应物 浓度
③ ①
●比较 ①与 ② ●比较 ①与 ③
②
① ②
时间
时间
●描述曲线 ①的特征(分段、准确); 解释曲线变化的原因(底物浓度降低,产物浓度增加,可能pH 或温度发生变化等) ●在①的基础上,酶浓度增加一倍的曲线【 ② 】 ●在①的基础上,反应物浓度增加一倍的曲线【 ③】 7 ☆4条竖线提示:斜率、拐点的变化。
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抑制剂——能与酶结合并降低酶活性的分子
▲某些抑制剂能可逆地与酶 结合 和分离。可逆抑制剂可分为 竞争性抑制剂 竞争性抑制剂 和 非竞争性抑制剂。
①竞争性抑制剂与底物结构相似,都结合在
酶活性部位上,从而阻止酶与底物的结合。
★可通过增加底物浓度而解除抑制。
V
无抑制剂
●使v下降的原因: Vmax 酶(E)与抑制剂(I)结合,使部分酶 被抑制剂占据而不能再同时与底物结合, 加竞争性抑制剂 但EI不能生成产物。 ●增加底物浓度,使反应液中的底物分 子%增大,进而使v接近vmax。 底物浓度 竞争性抑制剂的效应取决于 【E总】=【E游离】+【ES】+【EI】 抑制剂与底物的相对浓度。 ●例如:喝酒能治疗甲醇中毒。因为 12 甲醇与乙醇竞争性结合酶的活性部位。 改变S/I的比值可证明之。
思考:
①限制OA段的因素 是底物浓度; 限制BC段的因素是 酶浓度。
反 应 速 率
B · · A
· C
O
底物浓度
②酶浓度增加1倍,曲线发生怎样的变化? 如图的红色曲线。
【理解走势、斜率、拐点等特征性变化】
相同底物浓度下,酶浓度越高,形成的酶—底物复 合物越多,v越大;酶浓度越高,使酶饱和需要的底 物浓度越大。说出曲线几段的限制因素。 ③请举出两种能够影响这一曲线形状的因素。 酶浓度、温度和pH等
●竞争性抑制剂与底物竞争性地与 酶的活性部位结合。它既与酶结合, 又与酶分离,即酶与竞争性抑制剂 的结合是可逆的。竞争性抑制剂的 效应取决于抑制剂与底物的相对浓 度。增加底物浓度,使反应液中的 底物分子%增大,进而使v不断接近 vmax,即竞争性抑制剂可以通过增加 底物浓度来降低抑制剂与酶结合的 概率,以缓解抑制。因此②表示竞 争性抑制剂加入后的情形,随底物 浓度的增加抑制作用逐渐减弱并接 近正常的最大反应速度。
▲测定反应速度时,可以测定 产物增加量 或 底物减少量。 ▲如果底物过量,则测定底物减少量不容易精确, 而产物从无到有,便于测定,只要方法灵敏。
产物 浓度
最 初 阶 段
?
反应 速度
最 初 阶 段
时间
据图分析回答: ▲如何计算反应速度(v)? △浓度 V= =斜率 t ▲描述反应速度变化的特征: v只是在最初一段时间保持恒定, 随着时间延长,v逐渐下降直到0。 ▲反应速度下降的原因是什么? 底物浓度的降低,产物浓度的增加, pH或温度的变化等。
相同点: ①改变反应速度,但本身的质、量不变; 【但是,所有酶都必须参与反应过程!】 ②只能催化热力学允许进行的反应; ③加快v,缩短达到平衡的时间,但不改变平衡点; ④降低活化能,使v加快。 不同点: ①高效性; ②专一性(酶对底物); ③多样性; ④易变性; ⑤反应条件的温和性; ⑥酶活性受到调节、控制; ⑦有些酶的活性需要辅助因子。
1.催化剂加快反应速度的本质原因:降低反应活化能
[活化分子] 过渡态(活化态)
催化后活化能的减少值 非催化过程的活化能
自由能
无机催化剂
酶催化过程的活化能
(酶使活化能更低)
初态 反应物S 平均能量水平较低 终态 产物P 反应过程
反应前后自由能之差
★反应活化能:反应物进入活化状态所需的能量。 (类似于跨栏时栏的高度)(只调节能够反应的反应速度) 催化剂能降低反应活化能,提高活化分子百分数,因此加快了反应速度。 即:在催化反应中,只需较少的能量就可使反应物进入活化态。 ★某反应在不同情况下的反应速度不同,本质原因是反应活化能的不同。 ★酶与无机催化剂相比,活化能水平被降得更低,显示出高效性。 1
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抑制剂【C1P60】
16
●有些酶必需在有激活剂的条件下才具有活性。下列是有 关某种酶的实验,处理方式及结果如下表及图所示。根据结 果判断,叙述不正确的是
A. 甲物质是该酶的激活剂 B.35分钟后试管Ⅱ中底物已被消耗殆尽 C.该酶在80℃的环境下已经失活 D.该酶在中性环境中的活性比在弱碱性环境中高 ●如图表示某种酶在不同处理条件(a、b、c)下催化某反应时, 反应物的体积和反应时间的关系,解读此图可获得的信息是 A.a、b、c表示温度,则a>b>c B.a、b、c表示酶的浓度,则a>b>c C.a、b、c表示底物的浓度,则a>b>c 17 D.a、b、c表示pH,则a>b>c
Vmax
Vmax 变小
无抑制剂
●
非竞争性抑制剂 “损失”掉的酶
●
加非竞争性抑制剂
底物浓度 14
解读:非竞争性抑制剂.【紫线】
反应 速度
酶浓度限制v
反应 速度 非竞争性抑制剂 “损失”掉的酶
V受【底物】限制
底物浓度
底物浓度
●只要有非竞争性抑制剂存在,总有相应数量的酶被霸占 而不能与底物结合,相当于降低了酶的浓度。 ●损失“无法弥补”,结果与不可逆抑制剂的效果相似。 ●非竞争性抑制剂的效应取决于抑制剂的浓度。 ●增加底物浓度并不能克服抑制。
④温度降低10℃,分子运动速度减慢,与酶结合的底 20 物减少,v减慢。
5.温度——酶活性
温度影响分子运动。温度高,则反应物自由能提高,与酶的接触 机会多。但温度过高,酶变性失活。(超过60℃,大多数失活)
思考:酶的最适温度是个体生长的最适温度吗? 不一定。不同的酶对生长所起的作用可能不同,有的甚至起抑制 或破坏作用。 人体温的相对恒定有何意义? 体温的相对恒定对于维持内环境稳定,保证新陈代谢等生命活动 正常进行的必要条件。 解释①:较低温度范围内,温度 越高,分子运动速度越快,与酶 酶活性 结合的底物越多,v越大。温度 过高,酶逐渐失活。 曲线终点则为0,因为高温使酶变 温度 性失活;但曲线起点不为0,因为 低温下酶活性弱但不变性。
●青霉素为何能够阻止细菌的繁殖?青霉素为何对一般的人无 害?但人又为何不能滥用抗生素? 【阻止细菌繁殖的原因】: 抑制细菌形成细胞壁的酶,即:是细胞壁合成酶的抑制剂。 【无害的原因】: 人没有合成细胞壁的酶。但青霉素对某些人来说是过敏原。 【不能滥用】: ①青霉素会杀死肠道中对人体有益的细菌,降低免疫力和 维生素的供应; ②增加了对病原菌的选择压力,加速了耐药性进化。 ●为何用含青霉素的选择培养基能筛选出酵母菌和霉菌等? 青霉素是细菌细胞壁合成酶的不可逆抑制剂。真菌的细胞壁与 细菌细胞壁的化学成分不同,合成细胞壁有关的酶也不同。青 霉素对酵母菌和霉菌中合成细胞壁的酶不起作用。 ●不可逆抑制剂如很多毒气和有机磷农药能对乙酰胆碱酯酶产 生不可能抑制作用,一旦被抑制,肌肉受到连续刺激将处于永 18 久收缩状态。
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温度或PH改变;【红线, 注意斜率和拐点变化】
反应 速度 反应 速度
酶浓度增加一倍;【红线, 注意斜率和拐点变化】
底物浓度 底物浓度
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3.底物浓度——反应速度(酶浓度不变) 再增加:加入竞争性 / 非竞争性抑制剂
反应速率
① ②
③
O
底物浓度
曲线③属于非竞争性抑 制剂作用情形,类似于 不可逆抑制剂霸占酶。 因此,存在非竞争性抑 制剂相当于降低了酶的 浓度,曲线斜率变小, 很快达到最大。
6.pH——酶活性
●解释唾液淀粉酶活性曲线:过酸、过碱都不可逆破坏酶的空 间结构,使酶变性失活。 胃蛋白酶 唾液淀粉酶
酶活性
●添加胃蛋白酶和肠肽酶(胰 蛋白酶)的相应曲线。
肠肽酶
●胃蛋白酶在小肠腔中能发挥催化 作用吗?不能。因为小肠腔中的碱 性环境使胃蛋白酶变性失活。像其 它蛋白质一样,胃蛋白酶被胰蛋白 2 4 6 8 pH 酶和肠肽酶分解,最终变成氨基酸。 ●为何酸雨能杀死很多水生生物? 酸雨改变了水环境的pH,影响了 水生生物细胞内酶的活性和细胞膜 的稳定性,甚至使包括酶在内的所 有蛋白质变性失活,细胞死亡。 ●使酶变性失活的因素主要有:强酸、强碱、高温、紫外线、 23 金属离子等【注意温度、pH与酶活性关系的异同】
比较:酶与无机催化剂
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影响酶促反应速度的主要因素
反应速率: 单位时间内生成物的增加量,或底物的消耗量 = 酶活力 = 酶的催化效率
底物浓度 酶浓度 酶 酶活性
wenku.baidu.com温度
pH 抑制剂或激活剂等 竞争性抑制
可逆 (降低酶活性,但不使酶变性) 抑制剂作用机制 (形成氢键) 非竞争性抑制 不可逆 使酶永久性失活 (抑制剂与酶共价连接)
解读:加入竞争性抑制剂;【蓝线】
酶浓度限制v
反应 速度
竞争性抑制剂
反应 速度
V受底物浓度 限制
底物浓度
底物浓度
●竞争性抑制剂既与酶结合,又与酶分离。 ●竞争性抑制剂的效应取决于抑制剂与底物的相对浓度。 ●增加底物浓度,使反应液中的底物分子%增大,进而使v不 断接近vmax。 13 ●可通过增加底物浓度而解除抑制。
②非竞争性抑制剂与底物结构毫无关系, 其结合的部位不是酶活性部位,酶与非竞 争性抑制剂结合后改变了活性部位的空间
结构,使酶不能与底物结合。只要有非竞
争性抑制剂存在,总有相应数量的酶不能 与底物结合,损失“无法弥补”,结果与 不可逆抑制剂的效果相似。 ★非竞争性抑制剂的效应取决于 抑制剂的浓度。 增加底物浓度并不能克服抑制。
4.酶浓度——反应速度
曲线解读: :在底物足够大
(足以使酶饱和),而又不受其他
反 应 速 率
因素影响下,v与酶浓度成正比。
酶浓度
① 反应 速度
再增加下列曲线:
② ③
①底物浓度增加一倍; ②温度降低10℃; ③反应开始时加入一定量 的不可逆抑制剂。
酶浓度
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②底物浓度增加1倍 解释曲线①: 相同底物浓度下,酶浓 反 应 ①底物浓度低 度与v成正比。因为: 速 度 ③ 开始时加入不可逆抑制剂 酶浓度越高,形成的 “酶—底物”复合物越 ④温度降低10℃ 多 ②底物浓度增加1倍, 酶浓度 相同酶浓度下形成的 “酶—底物”复合物越 多 ③反应开始时加入一定量不可逆抑制剂,使部分酶失 活,当加入的酶量使重金属离子完全与酶结合后,继 续加入的酶开始表现酶活力,此时v与酶浓度变化的 直线关系不变。
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时间
关于酶的常见曲线图【关注坐标轴的含义】
1.催化剂加快反应速度的本质原因:降低反应活化能。 2.开始时的反应物总量、酶浓度均不变。 时间——产物浓度;时间——反应物浓度。 每图再增加:①酶浓度增加一倍;②反应物浓度增加一倍。 3.底物浓度——反应速度。 再增加:①酶浓度增加一倍; ②加入竞争性抑制剂; ③非竞争性抑制剂 4.酶浓度——反应速度。 再增加:①底物浓度增加一倍; ②温度降低10℃; ③反应开始时加入一定量的不可逆抑制剂。 5.温度——酶活性。 再增加:①嗜冷微生物、嗜热微生物的酶 【加酶洗衣粉、TaqDNA聚合酶】 ②人体内呼吸作用酶活性与环境温度; 6.pH——唾液淀粉酶活性。 再增加:①胃蛋白酶; ②肠肽酶。
曲线在最适温度两侧不对称,因为酶对高温很敏感。21
酶活性
●
嗜冷微生物, 如加酶洗衣粉 中的酶
嗜热微生物如: TaqDNA聚合 酶
酶活性
●
●
温度 温度
耗氧量/ 产热量/ 代谢强度
人离体细胞的呼吸作用酶活 性与环境温度的关系 人体内细胞的呼吸作用酶 活性与环境温度的关系
20 30
40 温度(℃) 22
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酶作用曲线
酶活性易受多种因素制约,常用坐标图来表示. 在解读坐标图题型时,要注意以下要点: ●看坐标轴含义——了解两个变量的关系 ●看曲线走势——掌握变量的增减快慢特征与 意义 ●看特殊点——理解特殊点的意义 (起止点、拐点、交叉点) ●看不同曲线的异同——理解曲线之间的内在 联系与区别
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反应速度的测定:
3.底物浓度——反应速度
反 应 速 率
B · · A
· C
底物浓度 描述曲线特征: (当酶浓度、温度和pH恒定时)在底物浓度很低的范围 内,反应速度与底物浓度成正比;继续增加底物浓度, 反应速度增加转慢;达到最大后保持不变。
O
解释:酶数量一定时,底物浓度越大,形成的酶—底物 复合物越多;达到一定程度后,有限的酶全部与底物 结合而达到饱和。 BC段有限的酶被饱和,反应速度达到最大,再增加 底物浓度,底物浓度并不影响酶的活性。 8