饲料中粗蛋白的测定-凯氏定氮法

测定步骤
2.试样的蒸馏 取2%硼酸溶液 20ml至锥形瓶中作为反应吸收液，并加混合指示剂 2滴， 将半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入该液面下。准确移取试样分解液 10ml注入蒸馏装置的反应腔中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好玻 璃塞，并在入口处加水密封好。再在碱液入口缓慢加入10～20ml 40% 氢氧化钠溶液，亦使之流入反应腔中，并把碱液入口封存好。进行蒸 馏。以锥形瓶中溶液变蓝绿色开始计时3min，然后将冷凝管末端离开 锥形瓶液面，再蒸馏1min，用少量蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液亦流 入吸收液中。
注意事项
每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值 作为结果。 本方法不能区别蛋白氮和非蛋白氮。 每次蒸馏结束后，应用蒸汽将蒸馏装置反应腔中 残液洗净。
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测定步骤
3. 滴定 用硼酸吸收氨后，立即用0.05mol/L的HCl标准溶液进行滴定，溶液 由蓝绿色变为灰红色为终点。 4. 空白测定 称取蔗糖0.01g，以代替试样，按上述测定步骤进行空白测定， 消耗0.05mol/L盐酸标准溶液的体积应不得超过0.3ml。 5.计算 (v1 v0 ) C 87.5 粗蛋白质（%）=
W
凯氏定氮仪测定步骤
1.试样的消化 称取0.5~1g试样，准确至0.0001g，无损地 放入消化管中，加入硫酸铜0.4g，硫酸钾6g， 与试样混合均匀，再加浓硫酸12ml，将消化管 放置在消化炉上加热（此装置需安装在通风 橱内），待样品焦化，泡沫消失，加大火力 至410℃ ，直至溶液呈透明的蓝绿色，此溶液 为试样分解液。 2.试样的蒸馏 将试样分解液消化管安装在凯氏定氮仪上， 在250ml锥形瓶中加入2滴溴甲酚绿-甲基红 混合指示剂。按仪器操作程序蒸馏。 3.滴定 同上。
98%浓硫酸 硫酸钾 硫酸铜 硼酸溶液 标准盐酸溶液 混合指示剂 蔗糖
测定步骤
1.试样的消化 称取0.5~1g试样，准确至0.0001g，无损地放入消化管中， 加入硫酸铜0.4g，硫酸钾6g，与试样混合均匀， 再加浓硫酸12ml，将消化管放置在消化炉上加热（此装置 需安装在通风橱内），待样品焦化，泡沫消失，加大火力 至410℃ ，直至溶液呈透明的蓝绿色。将试样消化液冷却， 无损失地转移至100ml容量瓶中，冷却后用蒸馏水稀释至 刻度，摇匀，则为试样分解液。
饲料中粗蛋白质含量的测定
凯氏定氮法
动物科学学院
Contents
1. 适用范围
2. 测定意义 3. 测定原理
4. 仪器设备及试剂
5. 测定步骤
适用范围
饲料中含氮物质包括真蛋白质和氨化物 （非蛋白氮），两者总称为粗蛋白质。 本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和单一 饲料等粗蛋白质含量的测定。
适用wk.baidu.com围
蛋白氮 （真蛋白质提供氮源 ）
粗蛋白质
非蛋白氮（氨基酸、酰胺、铵盐 ）
测定意义
蛋白质是生命的基础，是细胞组成、酶、 激素免疫抗体等的主要成分，是组织更新、 修补的原料。 饲料中蛋白质的质和量直接关系到动物生 命生长、发育、繁殖和生产，因此，测定 饲料中粗蛋白质含量对动物生活和生产有 重要作用。 测定饲料原料和成品料中粗蛋白质的含量， 为科学配置饲料提供可靠依据。
测定原理
凯氏法测定试样中含氮量，即在催 化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含 氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏 使氨逸出，用硼酸吸收后，在用标准浓 度的酸滴定，测出氮含量，将结果乘以 换算系数6.25，计算出粗蛋白质含量。
仪器设备及试剂
样品粉碎机 40目分析筛 分析天平 消化炉 消化管 凯氏蒸馏装置 滴定管