甲基绿一派洛宁法

山东大学实验报告

姓名: 魏永义系年级: 泰山学堂学号:201000140110 同组者: _____

科目: 细胞生物学实验题目:核酸细胞化学—甲基绿-派洛宁法组别:_

【目的要求】

(1) 学会制作血涂片。

(2) 熟悉甲基绿一派洛宁法显示核酸的原理及操作步骤。

(3) 观察DNA、RNA在细胞中的分布。

【实验原理】

甲基绿、派洛宁为两种碱性染料，与带负电荷的磷酸根形成盐键。甲基绿分子有两个正电荷，易与双链DNA分子结合，使DNA显示绿色，派洛宁分子有一个正电荷，易与单链RNA结合使RNA显示红色。也有人认为染色原理与核酸分子的空间构型有关(图5—5)。

【实验用品】

(1) 器材：载玻片、盖玻片、染色缸、显微镜。

(2) 试剂：甲基绿-派罗宁染液

(3) 材料：蟾蜍血涂片。

【方法与步骤】

(1) 蟾蜍血涂片，干燥后入70％乙醇溶液固定10min，取出晾干。

(2) 滴染色液于血膜上，染15min。

(3) 蒸馏水冲洗。

(4) 95％乙醇溶液分色，晾干，封片。

【观察结果】

理论结果:

蟾蜍红细胞的核因含DNA显绿色，细胞质及核仁因含RNA显示红色。

实际结果:

分析:脱色时间把握不准及染液本身的原因可能导致结果与预期相差较大