糖类、脂质、蛋白质的检测

1 糖类、脂肪、蛋白质的鉴定
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检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
实验原理:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产
生特定的颜色反应。
鉴定物质
试剂
实验现象
还原性糖
斐林试剂
砖红色沉淀
脂肪 蛋白质
淀粉
苏丹Ⅲ 苏丹Ⅳ 双缩脲试剂
碘
橘黄色 红色 紫色 蓝色
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一:还原糖的检测和观察
选材 含糖量较高、白色或近于白色的植物组织
④制成临时装片
观察 在低倍显微镜下找到已着色的圆形小颗粒，然后换高倍 显微镜观察
结论 花生种子中含有脂肪
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注意事项：
①切片要薄，如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰， 有的地方模糊。
②酒精的作用是：洗去浮色
③需使用显微镜观察
④ 使用不同的染色剂染色时间不同
颜色变化：橘黄色
红色
脂肪微粒
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四: 淀粉的检测和观察
取材 马铃薯匀浆
待
碘
检测
测
液2
组
滴摇
织
匀
样
蓝
液
色
2mL
结论 马铃薯匀浆样液中含有淀粉
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问题探讨:
1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，
为什么要留出一部分样液
作对照
2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4 滴而不能过量？ 过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖
生成的紫色。
3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？
C 作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合理的是 ( ) A．青苹果汁中有淀粉，不含还原糖 B．熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉 C．苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖 D．苹果转熟时单糖聚合成淀粉
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6、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起世
人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，
肯定不需要用到的化学试剂是(
，Cu(OH)2被还原为Cu2O(砖红色)；检测蛋白质的原理
是肽键在碱性环境中与Cu2+反应产生紫色络合物，所
以先滴加双缩脲试剂A液的目的是制造碱性环境。
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三: 脂质的检测和观察
方法一：花生种子匀浆+3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色 方法二：
取材 制片
花生种子（浸泡过的）将子叶削成薄片 ①取最理想的薄片 ②染色：在薄片上滴2～3滴苏丹Ⅲ染液，染色3min ③去浮色：用体积分数为50%的酒精溶液
)
A.斐林试剂
B. 红墨水
C.双缩脲试剂
D.苏丹Ⅳ染液
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7(2005.广东)生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机
A 物的鉴定实验中，以下操作错误的是(
)
A、可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红
色沉淀
B、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜
C、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热
D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用
要点探究：
斐林试剂 甲液：0.1g/mlNaOH 双缩脲试剂 A液:0.1g/mlNaOH
乙液:0.05g/mlCuSO4
B液:0.01g/mlCuSO4
斐林试剂与双缩脲试剂成分相同，但在使用时，斐林试剂甲液 与乙液必须混合使用，而双缩脲试剂则先加A液，再滴加B液， 请分析原因。
鉴定还原糖的原理是新制Cu(OH)2与还原糖反应
水浴 加热
砖红 色沉
而后立即使用。
淀
0.05g/mL
蛋白质 的鉴定
双缩脲 试剂
NaOH和 CuSO4
在碱性 环境下 的Cu2+
NaOH 浓度为
先加入Na0H
0.1g/mL
CuS04 浓度为
0.01g/mL
1mL，然后 再加CuS04 4滴，摇匀。 (不能过量)
不 需 要
溶液 呈紫
色
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5、青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂
制备组织样液 （制浆→一层纱布过滤→取液）
待测 组织 样液
显色反应 2mL
刚配制的 斐林试剂
1mL
生成 砖红色沉淀
呈现蓝色 50℃～65℃
温水中加热约2min
结论 组织样液中含有可溶性还原糖
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要点探究：
还原糖有：葡萄糖，果糖，麦芽糖
甲乙液必须等量混合均匀后再加入样液中，现 配现用。
用水浴加热
材料的颜色会干扰实验结果的观察，因此不 能选择有颜色的材料，如西瓜、胡萝卜汁、 血液、含还原糖多的绿色叶片等；
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知识结构
浅蓝
棕
色
色
砖红色
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二:蛋白质的检测和观察
选材与制备 百度文库豆组织研磨液或蛋清稀释液
显色反应
待测 组织 样液 2mL
双缩脲试 剂A液 1mL
摇匀
无色
结论 组织样液中含有蛋白质
双缩脲试 剂B液4滴
摇匀后变 成紫色
双缩脲试剂（ A液：0.1g/ml的NaOH B液： 0.01g/ml的CuSO4 ）
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时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与 反应。
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4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？
比较项 目
可溶还 原糖的 鉴定
试剂及 成分
斐林试 剂NaOH 和CuSO4
原理
新配制 的
Cu(OH)2
溶液
溶液浓度
方法
加热 与否
结果
NaOH
浓度为
0.1g/mL
CuS04 浓度为
先把NaOH 溶液和CuSO4 溶液混合，