均相体系过氧化氢降解壳聚糖

均相体系中过氧化氢降解壳聚糖

材料：壳聚糖（实验室购置），30%过氧化氢

一 测定过氧化氢的分解率：定性分析出过氧化氢完全分解所需要的时间。 1，KMnO 4标准溶液的测定（约0.02mol /L ）

材料：KMnO 4，表面皿，电热炉，玻璃砂芯漏斗，棕色瓶等

称取0.8g KMnO 4溶于250ml 蒸馏水中，盖上表面皿，加热至沸腾并保持微沸状态1小时，冷却后，用玻璃砂芯漏斗过滤，滤液贮于清洁带塞的棕色瓶中备用。

2，双氧水中过氧化氢的滴定

材料：移液管，30%过氧化氢，锥形瓶（4个），已配制的KMnO 4标准溶液，H 2SO 4溶液，MnSO 4溶液等

假设分解情况如图；

0.2

0.4

0.60.81

1.2

0123

456

时间/h h 2o 2含

A,准备标号为1，2，3，4的锥形瓶，里面装入等量的双氧水溶液（约20ml ），用移液管移取10.00ml 溶于250ml 蒸馏水中，加3mol /L H 2SO 42.5ml 以及1mol/LMnSO 4溶液2滴，用KMnO 4标准溶液滴定呈微红色，半分钟内不褪色即为终点。平行测定三次。从而得出最佳分解时间。

过氧化氢分解率用高锰酸钾滴定法测定

1、 高锰酸钾滴定标线

标线要制定两个，高锰酸钾高浓度（0.02mol/L ）和高锰酸钾低浓度（0.002mol/L ） 以下是高浓度高锰酸钾溶液（0.02mol/L ）制定的标线

取1ml30%的过氧化氢置于250ml 容量瓶中，加蒸馏水至刻度，充分摇匀。将单位换算成g/L 过氧化氢，假设为a 。

过氧化氢稀释液

浓度（g/L ） 过氧化氢标液 蒸馏水

1 a 10ml 0

2 2a/

3 10ml 5ml

3 1a/2 10ml 5ml

4 1a/3 10ml 10ml

5 1a/4 10ml 10ml

标线制定

浓度（g/L）用量（ml）高锰酸钾用量ml(3个重复) 平均值（ml）过氧化氢稀

释液

1 a 10

2 2a/

3 10

3 1a/2 10

4 1a/3 10

5 1a/4 10

制定过氧化氢浓度（g/L）和高锰酸钾用量之间的标线，得出标线方程

二、过氧化氢降解壳聚糖的基本工艺

方法：称取壳聚糖3g, 加入烧饼中，用去离子水（去离子水所需量由反应所用双氧水

的量来确定，使反应体系中去离子水和过氧化氢的总体积为60ml），在恒温振荡水浴

锅中加热至预热（这个过程要打开振荡开关）后，一次性加入所需双氧水的量，恒温

振荡反应至预定时间后结束，将反应液在冰水中冷却，抽滤，即得到水溶性低分子量

壳聚糖溶液和水不溶性壳聚糖残渣，然后将残渣在真空干燥箱中干燥，称重，计算壳

寡糖产率。壳聚糖水溶液放入冰箱中待用。

1、65℃，壳聚糖：过氧化氢=1:20ml；180rpm/min振荡

M1M2M3M4M5产率（%）

T= t。S．

M1：加入的壳聚糖的质量（g）

M2：三角瓶的重量

M3：抽滤时滤纸的质量（g）

M4：烘干后三角瓶、滤纸、残余的壳聚糖的总重（g）

M5：被水解的壳聚糖的质量(g)，M5=M1-(M4-M2-M3)

产率=(M5/M1)*100%

根据过氧化氢完全降解所需要的时间t。，测定出65℃，壳聚糖：过氧化氢=1:20ml；

180rpm/min振荡，该时间下的壳聚糖的产率，记为S。

若t。=3h，则同样状态下取3只锥形瓶，分别测定出该温度条件下t=2h,t=2.5h,t=3h

的壳聚糖产率，并记录下来。

M1M2M3M4M5产率（%）

T= 2h S1

T=2.5h S2

T=3.5h S3

T= 2h分析如下：

1，若S1＜S。，则说明壳聚糖偏低，此时过氧化氢还未完全分解，而壳聚糖已经完全消耗，则调节壳聚糖与过氧化氢的比例，如2：20ml

2，若S1＞S。，则说明在此温度条件下壳聚糖其分子结构已经发生变化，其产率降低。

故调节温度或其他试验条件重新实验。

3，若S1＝S0，此时过氧化氢未完全分解，却已经达到最大产率，则说明此时是壳聚糖与过氧化氢的最佳用料比。

T=2.5h的S2的情况分析与S1de 类似。

T=3.5h分析如下：

1，若S3＜S。，则说明此条件下壳聚糖分子结构发生破坏，产率降低。

2，若S3＞S。，此时的过氧化氢已经完全分解，理论上不存在此状态，可能出现其他干扰物质降解了壳聚糖，提高了其产率。

3，若S3＝S0 ，此时过氧化氢已经完全分解，两者产率相同，则取t=3h为宜。

测定出65。C条件下壳聚糖与过氧化氢的最佳用量比之后，建立同等梯度

60.62.63.64.67.68温度条件下壳聚糖与过氧化氢的最佳用量比。

过氧化氢对壳聚糖的降解作用不是很明显，所以具体条件你们当时也没有完成，建议这一部分就不要写了。

壳聚糖酶生产菌的筛选，结果是筛选出一株烟曲酶，酶活好像是不到三个单位，我现在在老家，具体数据没办法查，你可以到知网上查一下我2013年发的关于壳聚糖酶的2篇文章，可以从中获取点信息

一篇是筛选的，另一篇是关于发酵条件优化的，第一作者是韩晓红老师，我是第二作者