烟草瞬时表达

烟草瞬时表达
（1）挑起单个农杆菌菌落，接种到3ml LB液体培养基（含抗生素）在200r/min，28℃摇床培养过夜。

（2）将上述过夜培养菌液在常温，4000r下离心2min，收集菌体。

（3）用渗透培养液( 10 mmol MgCl2 )重新悬浮沉淀的农杆菌细胞（一般需要1~1.5mL渗透培养液）。

调节浓度OD600至0.5~1.0 (可大概估计)。

（4）烟草植株无一定大小要求，一般4~5叶期，已经生长一个月左右的本氏烟比较合适，注射前要充分吸水30min使其气孔张开，然后用1mL的无针头的注射器吸取悬浮有农杆菌的渗透培养液从烟叶背面注入叶片内。

（5）将处理过的烟草放回培养室，照常管理。

（6）制片，观察叶背面荧光表达情况。