实验十二邻菲罗啉光度法测定微量铁

➢ （7）溶剂 ➢ （8）标准曲线 ➢ （9）配合物组成等 ➢ （10）共存离子的影响 ➢ （11）方法适用范围
条件试验的简单方法
变动某实验条件，固定其余条件，测定一 系列吸光度值，绘制吸光度—某实验条件的曲 线，根据曲线确定某实验条件的适宜值或适宜 范围。
三 、试剂与仪器
1．仪器： SP-2000型分光光度计
SP-2000分光光度计
四、实验步骤
➢1.吸收曲线 ➢2. 工作曲线 ➢3.铁含量的测定
1.条件试验—(1)吸收曲线的制作和测量波长
的选择
• 用吸量管吸取0.0mL和1.0mL铁标准溶液分别注 入两个50mL容量瓶(或比色管)中，各加入1mL盐酸 羟 胺 溶 液 ， 摇 匀 。 再 加 入 2mLPhen ， 5mLNaAc ， 用水稀释至刻度，摇匀。放置l0min后，用lcm比色 皿，以试剂空白(即0.0mL铁标准溶液)为参比溶液， 在440～560nm之间，每隔l0nm测一次吸光度，在 最大吸收峰附近，每隔5nm测量一次吸光度。在坐 标纸上，以波长A为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘
1. 吸收曲线 2. 工作曲线 3. 铁含量的测定
一个系列
2、工作曲线的绘制
A=bc
→ A—纵坐标 c—横坐标 工作曲线 （标准曲线）
A~c 或 A~
工作曲线
c单位mol/L
单位 g/L 、mg/L、 g/L
A
0.8 0.6 0.4 0.2
01 23 4 5
工作曲线
(mg·L-1) c(mol/L)
3、铁的测定
• 在pH为29的溶液中，Fe2+与邻二氮菲（Phen）
2．试剂
（1） 铁标准溶液（200g·mL-1） （2）邻二氮菲水溶液 （1.5g·L-1）； （3）邻二氮菲水溶液[1.7910-3（组成比用）] 。 （4）盐酸羟胺（100 g·L-1） 用时配制。 （5）乙酸钠溶液 （1mol·L）。 （6）氢氧化钠溶液（1mol·L）。 （7）盐酸溶液（6mol·L）。
生成1:3的桔红色的稳定配合物 ：
2+
2+
Fe + 3
N
N
N
N
3
Fe
该配合物的lg3=21.3，摩尔吸光系数 =1.1104L·mol-
1·cm-1。Fe3+与邻二氮菲生成1:3淡蓝色配合物，其
lg3=14.1。
吸光光度法的条件试验
➢ （1）吸收曲线 ➢ （2）显色酸度 ➢ （3）显色剂用量 ➢ （4）显色时间 ➢ （5）稳定性 ➢ （6）显色温度
制A与关系的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定Fe
的适宜波长，一般选用最大吸收波长max。
一、吸收曲线
λ(nm) 440 450 460 …… 540 550 560
A
二、标准曲线（工作曲线）
编号 0 1
2 3 4 5 7(未知液）
V(mL) Βιβλιοθήκη Baidu.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.0 5.00
显色剂用量的选择
1.条件试验—(4)显色时间
• 在一个50mL容量瓶(或比色管)中，用吸量管加入 1.0mL铁标准溶液，lmL盐酸羟胺溶液，摇匀。再加 入2mLPhen，5mLNaAc溶液，以水稀释至刻度，摇 匀。立刻用lcm比色皿，以蒸馏水为参比溶液，在选 定的波长下测量吸光度。然后依次测量放置5min， l0min，30min，60min，l20min，……后的吸光度。 以时间t为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A与t关 系的显色时间影响曲线。由此得出铁与邻二氮菲显 色反应完全所需要的适宜时间即显色时间及体系的 稳定时间。
显色时间
2 标准曲线的制作
在上面选择的最佳条件下，制作标准曲线。
➢ 用移液管吸取l0mL200g·mL-1铁标准溶液于100mL容量瓶中， 加入2mL6mol·L-1HCl溶液，用水稀释至刻度，摇匀。此溶 液Fe3+ 的浓度为20g·mL-1。
➢ 在6个50mL容量瓶(或比色管)中，用吸量管分别加入0mL， 2.0mL ， 4.0mL ， 6.0mL ， 8.0mL ， l0.0mL20g·mL-1 铁 标 准 溶液，均加入l.0mL盐酸羟胺，摇匀。再加入2.0mLPhen， 5.0mLNaAc 溶 液 ， 摇 匀 。 用 水 稀 释 至 刻 度 ， 摇 匀 后 放 置 l0min。用lcm比色皿，以试剂空白(即0.0mL铁标准溶液)为参 比溶液，在所选择的波长下，测量各溶液的吸光度。以含铁 量为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。
实验十二 邻二氮菲吸光度法测定铁
一、实验目的
1．学习选择吸光光度分析的试验条件。 2．掌握吸光光度法测定微量铁的原理及方法。 3．掌握吸光光度计和吸量管的使用方法。
二、实验原理
吸光光度法：在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建 立起来的分析方法称为吸光光度法。
A=bc
1、光吸收曲线
用不同波长的单色光分别照射某一溶液，测量在每一
溶液酸度的选择
酸度影响
• Fe2+与邻二氮菲在pH为29范围内均能显色， 且其色泽与pH无关，为了尽量减少其他离子的 影响，通常在微酸性（pH约5）溶液中显色。 本法的选择性很高相当于含铁量40倍的Sn2+、 Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-，20倍的Cr3+、 Mn3+、V(V)、PO43-，5倍的Co2+、Cu2+等不干 扰铁的测定。若共存离子量大时，可采用 EDTA进行配位掩蔽或预先分离。
3. 铁含量的测定
• 试样中铁含量的测定 准确吸取适量试液于
50mL容量瓶(或比色管)中，按标准曲线的制作 步骤，加人各种试剂，测量吸光度。从标准曲线 上查出和计算试液中铁的含量(单位为g·mL-1)。
A
A=bc
A试液
(Fe3+)(g/mL)
工作曲线
计算试液中铁的含量(g/mL)
(g/mL)
五、安排
(µg/mL)
A
17
邻二氮菲-Fe2+配合物
max=510 nm
吸收曲线
1.条件试验—(2)溶液酸度的选择
• 取8个50mL容量瓶(或比色管)，用吸量管分别加入 1.0mL铁标准溶液，lmL盐酸羟胺，摇匀，再加入 2mLPhen，摇匀。用5mL吸量管分别加入0.0mL， 0.2mL，0.5mL，1.0mL，l.5mL，2.0mL，2.5mL和 3.0mL 1mol·L-1的NaOH溶液，用水稀至刻度，摇匀。 放置l0min。用lcm比色皿，以蒸馏水为参比溶液， 在选择的波长下测定各溶液的吸光度。同时，用pH 计测量各溶液的pH。以pH为横坐标，吸光度A为纵 坐标，绘制A与pH关系的酸度影响曲线，得出测定 铁的适宜酸度范围。
1.条件试验—(3)显色剂用量的选择
• 取7个50mL容量瓶(或比色管)，用吸量管各加入 1.0mL铁标准溶液，lmL盐酸羟胺，摇匀。再分别加 入0.lmL，0.3mL，0.5mL，0.8mL，l.0mL，2.0mL， 4.0mLPhen和5mLNaAc溶液，以水稀释至刻度，摇 匀。放置10min。用lcm比色皿，以蒸馏水为参比溶 液，在选择的波长下测定各溶液的吸光度。以所取 Phen溶液体积V为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制 A与V关系的显色剂用量影响曲线。得出测定铁时显 色剂的最适宜用量。
波长下溶液对该波长光的吸收程度，以波长为横坐标，以 吸光度为纵坐标，绘制曲线，描述物质对不同波长光的吸 收能力。
A~ (nm)
吸收曲线
吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。
m邻ax=二5氮10菲n-mFe2+配合物
max=510 nm 吸
收
曲
吸收蓝绿色光
显示橙红色
线
邻二氮菲-Fe2+配合物