凝胶电泳各试剂配制

凝胶电泳各试剂配制

（1）10000mg/L苄嘧磺隆母液：称取60%的苄嘧磺隆颗粒500mg于灭菌的棕色

试剂瓶，再加入30mL灭菌的蒸馏水，每次使用前混匀再吸取。

（2）10000mg/L乙草胺母液：吸取500ul 89%的乙草胺，再加入49mL分析纯甲醇溶解。

（3）30%丙烯酰胺混合液（50ml）：称取丙烯酰胺14.5g，甲叉双丙烯胺酰胺O 30ml溶解，定容到50ml，于棕色瓶中4℃保存。

0.5g，加ddH

2

（4）1.5mol/L Tris-HCl pH 8.8(100ml):称取Tris18.17g于烧杯中加入ddH2O 80ml溶解，用浓盐酸于25℃下调pH为8.8，定容到100ml，高温灭菌室温保存。（5）1.5mol/L Tris-HCl pH 6.8（50ml）：称取Tris 9.08g于烧杯中加入O 30ml溶解，用浓盐酸于25℃下调pH为6.8，定容到50ml，高温灭菌室温

ddH

2

保存。

（6）10%SDS：称取2gSDS粉末于20ml水中37℃1h水浴。

（7）TEMED（四乙基乙二胺）原液

（8）10%过硫酸铵:称取0.15g过硫酸铵溶于1.5mldH2O中，4℃保存，一星期可用。

（9）2×样品缓冲液（10ml）：2.5ml 1.5mol/L的Tris-HCl(pH6.8),0.5ml 50%甘油，2ml 10%的SDS，0.5ml巯基乙醇，2ml 1%溴酚蓝，2.5ml蒸馏水。配好

后按每管500ul分装好与-20℃保存待用。

（10）Tris-甘氨酸电极缓冲液（5×）：称取Tris 15.1g，甘氨酸94g，SDS 5g，加蒸馏水约800ml，溶解后用蒸馏水定容至1000ml。临用前稀释10倍。

（11）50%甘油：水：甘油=1:1，高温灭菌，4℃保存。

（12）1%BPB（溴酚蓝）：称取100mgBPB加水10ml，4℃保存。

（13）考马斯亮蓝R250染色液：称0.5g考马斯亮蓝R250，溶于125ml异丙醇中，搅拌溶解后加入50ml冰醋酸，加水325ml混匀后过滤，室温保存。

（14）脱色液：按照乙醇：醋酸：水=50:25:425配制脱色液，现配现用。