药物分析实验：实验六 HPLC测定头孢氨苄胶囊的含量
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• 4．溶剂的变换必须注意溶剂的极性和互溶性。
• 5. 爱护实验器材
实验报告
1、 按要求填好实验报告，下次实验课前班 长统一收上来。
2、实验课成绩主要包括课堂表现和实验报告 两大Βιβλιοθήκη Baidu分。
高效液相色谱流程
外标法
又称校正法或定量进样法。本法要求能准 确地定量进样，配置一系列已知标准液， 在同一操作条件下，按同量注入色谱仪， 测量其峰面积（或峰高），作峰面积与浓 度的标准曲线，然后在相同条件下，注入 同量样品溶液，测量待测组分的峰面积， 根据标准曲线，计算样品中待测组分的浓 度。
三、实验方法
• 色谱仪：岛津高效液相色谱仪 • 色谱柱：ODS柱（4.6250mm，5m） • 柱温：室温 • 流动相：水-甲醇-3.86%醋酸钠溶液-4%
醋酸溶液（742：240：15：3） • 检测波长:254nm。
四、含量测定
精密称取适量（约相当于头孢氨苄0.1g），置 100ml量瓶中，加超纯水溶解，定容，摇匀，滤 纸过滤，取滤液10ml，置50ml量瓶中，用超纯水 定容。摇匀后用滤头过滤1-2ml溶液。取20µl注入 色谱仪，记录色谱图。
实验六 HPLC测定头孢氨苄胶囊的含量
一、实验目的
• 学习高效液相色谱分析的原理 • 学习外标法测定组分含量的方法 • 了解高效液相色谱仪的结构及正确使用方
法
二、实验原理
高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同 极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、 缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱， 经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内， 在柱内依据不同原理分离后，各成分先后 进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪 记录，从而达到分离分析的目的。
另取头孢氨苄对照品适量，同法定容，按外标 法以峰面积计算供试品C14H17N2O4S的含量。
五、注意事项
• 1．将配好的流动相接到流路中，开启泵起动开关，检测 是否漏液
• 2．流动相必须预先脱气，可用超声波、机械真空泵或水 力抽气泵脱气。
• 3．严格防止气泡进入系统，吸液软管必须充满流动相， 吸液管的过滤器始终浸在溶剂中，如变换溶剂，必须先停 泵，再将过滤器移到新的溶剂瓶内，然后才能开泵使用。
• 5. 爱护实验器材
实验报告
1、 按要求填好实验报告，下次实验课前班 长统一收上来。
2、实验课成绩主要包括课堂表现和实验报告 两大Βιβλιοθήκη Baidu分。
高效液相色谱流程
外标法
又称校正法或定量进样法。本法要求能准 确地定量进样，配置一系列已知标准液， 在同一操作条件下，按同量注入色谱仪， 测量其峰面积（或峰高），作峰面积与浓 度的标准曲线，然后在相同条件下，注入 同量样品溶液，测量待测组分的峰面积， 根据标准曲线，计算样品中待测组分的浓 度。
三、实验方法
• 色谱仪：岛津高效液相色谱仪 • 色谱柱：ODS柱（4.6250mm，5m） • 柱温：室温 • 流动相：水-甲醇-3.86%醋酸钠溶液-4%
醋酸溶液（742：240：15：3） • 检测波长:254nm。
四、含量测定
精密称取适量（约相当于头孢氨苄0.1g），置 100ml量瓶中，加超纯水溶解，定容，摇匀，滤 纸过滤，取滤液10ml，置50ml量瓶中，用超纯水 定容。摇匀后用滤头过滤1-2ml溶液。取20µl注入 色谱仪，记录色谱图。
实验六 HPLC测定头孢氨苄胶囊的含量
一、实验目的
• 学习高效液相色谱分析的原理 • 学习外标法测定组分含量的方法 • 了解高效液相色谱仪的结构及正确使用方
法
二、实验原理
高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同 极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、 缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱， 经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内， 在柱内依据不同原理分离后，各成分先后 进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪 记录，从而达到分离分析的目的。
另取头孢氨苄对照品适量，同法定容，按外标 法以峰面积计算供试品C14H17N2O4S的含量。
五、注意事项
• 1．将配好的流动相接到流路中，开启泵起动开关，检测 是否漏液
• 2．流动相必须预先脱气，可用超声波、机械真空泵或水 力抽气泵脱气。
• 3．严格防止气泡进入系统，吸液软管必须充满流动相， 吸液管的过滤器始终浸在溶剂中，如变换溶剂，必须先停 泵，再将过滤器移到新的溶剂瓶内，然后才能开泵使用。