苹果脱毒技术

5.微体嫁接脱毒 受苹果凹茎病毒（ApSGV）侵染的品种用热处理 无法4脱除病毒，可以用微体嫁接的方法来解决。 以金冠品种品种做砧木，种子经低温层积处理 后消毒，剥取种胚接到MS无机盐培养基中，在25℃ 下暗培养15天，去掉上胚轴和子叶。将去顶幼苗移 至液体培养基，培养瓶内放一中有小孔的滤纸桥。 作接穗的茎尖分生组织，可取自试管苗新梢或田间 植株新梢。将茎尖分生组织嫁接于砧木，使二者维 管束部位相接，1周后接触部位产生愈伤组织，6周 后接穗发育成具有4~6片叶的新梢，此时即可试管外 移栽。
电子显微镜法 ELISA法
指示植物法
五、无毒原种苗的保存与应用
1.无毒原种苗的保存
隔离种植保存；离体保存脱毒种苗。 2.无毒原种的推广繁殖
一方面要积极进行无毒苗的推广；另一方面做 好无病毒良种的繁殖。
脱毒苗—首富一号
脱毒苗的组织培养
三、驯化 炼苗室的温度：白天23~27℃，夜间不低 于14℃ 炼苗具体方法：移栽前7d左右，将长有 3~5片叶，高2~3cm的试管苗，在不开瓶 口的状态下，从培养室移至温室排好。 为防止强光、高温灼伤试管苗，在温室 顶上加盖一层黑色遮阳网。
四、脱毒苗的鉴定 抗血清法
天
脱去 ACLSV 病毒
脱去 ASGV 病毒
4.茎尖培养脱毒 取材（摘取2~3cm长的新梢） 材料消毒（先用70％酒精处理30s，再0.1％升汞消10~15min,
然后用无菌水冲洗4~5次）
剥取茎尖（在解剖镜下剥取幼叶和叶原基） 接种（留1或2个进行接种）
茎尖分化培养
茎尖培养：培养基用MS培养基，附加 BA0.5~1.0mg/l、GA30.1~0.5mg/l、IBA0.2 ~0.5mg/l、蔗糖30g/l、琼脂5 ~7.5mg/l，ph值为 5.8左右。培养温度26 ~30 ℃，光照强度1500 ~2000lx，光照10h/d。 培养期间每一个月更换一次新鲜培养基。
园艺植物组织培养 —苹果的脱毒与快繁
班级：2011级园艺 姓名：高丽银 学号：2011139139
一、苹果树的形态特征和生物学特性
苹果树落叶乔木，树高可达15米，栽培条 件下一般高3～5米。树干灰褐色，老皮有不规 则的纵裂或片状剥落，小枝光滑。单叶互生，椭 圆至卵圆形，叶缘有锯齿。伞房花序，花瓣白色 ，含苞时带粉红色。果实为仁果，颜色及大小因 品种而异。 苹果树喜光；喜凉；喜微酸性到中性土壤。 最适于土层深厚，富含有机质，心土通气排水良 好的沙质土壤。
树上的苹果 优质苹果
二、脱毒技术
1.病毒传播方式：苹果以营养繁殖为主，其病毒主要 通过嫁接传播。 2.主要病毒有6种，包括：苹果锈果类病毒（ASSV） 、苹果花叶病毒（ApMV）、苹果绿皱果病毒（AGCV ）、苹果褪绿叶斑病毒（ACLSV）、苹果茎痘病毒（ ASPV）、苹果茎沟槽病毒（ASGV）
3.热处理脱毒：
把2~3cm高的组培苗
分化培养基 先用（32±1.5）℃预 处理1周，再转入（ 37±1.5）℃高温下处理 ，光照强度3000lx，每天 光照 12h 处 35d
理
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采用白天温度（37±1.5 ）℃，晚上（32±1.5） ℃的变温处理
35天
脱去ACLSV病毒 、ASGV 病毒
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6.苹果花粉培养
⑴选材与预处理：选取中心花蕾吐红，周围花蕾明 显增大，但花序尚未分离的花蕾，置于冰箱中 1~3℃预处理。 ⑵消毒：70℅的酒精浸约30s，再在10％升汞中浸 10~15min. ⑶胚状体诱导：接种到MS基本培养基，附加2,4-D ，KT，IAA，3~8﹪蔗糖培养基上，25~30℃下培养 。 ⑷生根。