教案3植物脱毒技术
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3、优点与局限性
（1）优点：设备要求不高，技术简单，短时间可除去病毒。
（2）局限性：
●热处理不能脱除所有病毒，
●同时同样的处理效果也不一样（具有不确定性）。
●对植株有伤害，只有部分植株成活。
●对寄主植物进行较长时间的高温处理有可能钝化植物组织中的阻抗因子，使寄主植物中抗病毒因子难于活化，从而增加无效植株的发生率。
（4）茎尖培养
用小刀片切下茎尖放入培养基。培养条件为25℃，光照16h，光照强度为2000Lx。在White、Morel、MS培养基的基础上略加修改，尤其是K+与NH4+含量适当提高有利于茎尖的生长。大多数植物的茎尖培养以MS＋NAA 0.1-1.0mg/L＋CM（椰乳）5～10%。也可加0.1-1mg/L的KT和活性炭，进行固体培养或液体滤纸桥培养。微茎尖培养须经历较长的时间，一般要持续2个月以上才能见到茎尖的分化，一般由茎尖直接分化出芽丛。
注：热处理需与其他方法配合应用，才可获得良好的效果。
（二）茎பைடு நூலகம்培养脱毒
1、原理
病毒在感染植株上的分布是不均匀的，即老叶片及成熟的组织和器官中病毒含量较高，而幼嫩的及未成熟的组织和器官中病毒含量较低，生长点（约0.1-1.0mm区域）则几乎不含或含病毒很少。
2、方法
（1）材料的选择和预处理
选择具有原品种典型特征、病毒危害较轻的健壮植株，采集外植体。
提出引导性问题：请大家说说如何能脱除植物体内病毒？
新课讲述：
一、植物脱毒的意义
通过植物组织培养方法生产无病毒种苗可以同时除去真菌、细菌和线虫的寄生，因此产量大幅度增加，最高可增产300％，平均增产也在30％以上。
二、脱毒方法
（一）热处理脱毒
1、原理
利用病毒耐热性差的特点，将植物组织置于高于正常温度的环境中，组织内部的病毒受热以后部分或全部钝化，但寄主植物的组织很少或不会受到伤害。
（2）外植体的表面消毒
选取1.5-2cm的顶芽或侧芽为外植体，先用自来水冲洗半小时，用75%的酒精消毒30s，再用2%次氯酸钠溶液处理15min，取出后用无菌水清洗3次，用无菌滤纸吸去多余水分备用。
（3）茎尖剥离
在超净台下，将茎尖切成1.5cm长，下端约1.0cm长留作夹持部分。先用肉眼剥离外面的幼叶，至0.5cm大小时，再移至双筒解剖镜下，用镊子夹住茎部，用解剖针轻轻剥掉幼叶和叶原基，解剖针可蘸少许酒精，过火灭菌，但要注意解剖针的冷却，当剥到看见一个闪亮半圆球的顶端分生组织点，只剩两枚叶原基时，可用解剖刀将微茎尖切下来，然后接到培养基中，注意随切随接，防止变干变褐。
情感目标：引导学生勤动脑、勤思考，学思结合，挖掘潜能，培养自主学习意识。
教学重点、难点：
重点：茎尖培养脱毒方法和技术。
难点：茎尖培养脱毒方法和技术。
教学方法及师生互动设计：
主要以讲授法、讨论法、演示法为主，结合组培实验室进行讲解。
1、导入新课；新知识讲解；课堂小结，布置思考题；
2、让学员以小组为单位，通过课件、课上亲自动手进行茎尖剥离等手段增加学生兴趣，进行合作学习，培养学员相互协作解决问题的意识。
课堂练习、作业：
1、热处理脱毒的原理是什么？热处理脱毒的方法有哪些？
2、茎尖培养脱毒的原理是什么？茎尖培养脱毒的技术方法如何？
课后小结：
植物脱毒的意义；植物脱毒的方法、热处理脱毒与茎尖培养脱毒的技术（重点）；
教学内容（讲稿）
备注（包括：教学手段、时间分配、临时更改等）
新课导入：
植物脱毒的病毒病仅次于真菌类病害，对农业生产造成了巨大的损失，如何通过一些技术手段来达到去除植物体内病毒，恢复种性或进行生产，这就是植物脱毒技术。
教案格式：
职教师资培训教案
课程名称：
植物组织培养技术
授课专业：
农学
主讲教师：
周长艳
培训专业：
设施农业
职 称：
中级农艺师
学员单位：
海拉尔农牧职工中专学校
二Ο一八年九月
课程（章节）
植物脱毒技术
教学目的与要求：
知识目标：能够说出热处理脱毒与茎尖培养脱毒的原理与方法。
能力目标：能够在生产实践中运用茎尖培养脱毒的方法和技术。
3、影响茎尖培养的因素
（1）茎尖大小：茎尖大小与脱除病毒的效果成反相关，一般切取0.2～0.5mm带1～2个叶原基的茎尖为培养材料。
（2）培养条件：光下培养。
（3）外植体的生理状态：最好从活跃生长的芽上切取，一般地培养顶芽茎尖比培养腋芽茎尖效果好。
（三）其他脱毒方法
课堂小结：（3分钟）
作业布置：（3分钟）
剩余分钟：整理笔记，学生讨论，并解答问题。（2分钟）
2分钟
5分钟,
提出问题：请同学们说说所谓“脱毒苗”或“无病毒苗”是怎样定义的？
10分钟，
讨论：请问同学们热处理脱毒的原理是什么？
思考：热处理不能脱除哪些病毒？
15分钟，思考：茎尖培养脱毒与热处理脱毒相比具有哪些优点？
思考：茎尖大小与脱除病毒的效果是否存在某种关系？
2、方法
(1)温汤浸渍处理：
适用于休眠器官、剪下的接穗或种植材料的脱毒处理。方法是将材料放在50～55℃的温水中浸渍数分钟至数小时。此方法简便易行，但易造成材料受伤。
(2)热空气处理：
适用于生长期植物材料的脱毒处理。设备可采用有照明、通风、调温、给水动能的培养箱。方法是将待处理植株先进行盆栽，成活后移入35～40℃的培养箱中处理几十分钟至几个月。
（1）优点：设备要求不高，技术简单，短时间可除去病毒。
（2）局限性：
●热处理不能脱除所有病毒，
●同时同样的处理效果也不一样（具有不确定性）。
●对植株有伤害，只有部分植株成活。
●对寄主植物进行较长时间的高温处理有可能钝化植物组织中的阻抗因子，使寄主植物中抗病毒因子难于活化，从而增加无效植株的发生率。
（4）茎尖培养
用小刀片切下茎尖放入培养基。培养条件为25℃，光照16h，光照强度为2000Lx。在White、Morel、MS培养基的基础上略加修改，尤其是K+与NH4+含量适当提高有利于茎尖的生长。大多数植物的茎尖培养以MS＋NAA 0.1-1.0mg/L＋CM（椰乳）5～10%。也可加0.1-1mg/L的KT和活性炭，进行固体培养或液体滤纸桥培养。微茎尖培养须经历较长的时间，一般要持续2个月以上才能见到茎尖的分化，一般由茎尖直接分化出芽丛。
注：热处理需与其他方法配合应用，才可获得良好的效果。
（二）茎பைடு நூலகம்培养脱毒
1、原理
病毒在感染植株上的分布是不均匀的，即老叶片及成熟的组织和器官中病毒含量较高，而幼嫩的及未成熟的组织和器官中病毒含量较低，生长点（约0.1-1.0mm区域）则几乎不含或含病毒很少。
2、方法
（1）材料的选择和预处理
选择具有原品种典型特征、病毒危害较轻的健壮植株，采集外植体。
提出引导性问题：请大家说说如何能脱除植物体内病毒？
新课讲述：
一、植物脱毒的意义
通过植物组织培养方法生产无病毒种苗可以同时除去真菌、细菌和线虫的寄生，因此产量大幅度增加，最高可增产300％，平均增产也在30％以上。
二、脱毒方法
（一）热处理脱毒
1、原理
利用病毒耐热性差的特点，将植物组织置于高于正常温度的环境中，组织内部的病毒受热以后部分或全部钝化，但寄主植物的组织很少或不会受到伤害。
（2）外植体的表面消毒
选取1.5-2cm的顶芽或侧芽为外植体，先用自来水冲洗半小时，用75%的酒精消毒30s，再用2%次氯酸钠溶液处理15min，取出后用无菌水清洗3次，用无菌滤纸吸去多余水分备用。
（3）茎尖剥离
在超净台下，将茎尖切成1.5cm长，下端约1.0cm长留作夹持部分。先用肉眼剥离外面的幼叶，至0.5cm大小时，再移至双筒解剖镜下，用镊子夹住茎部，用解剖针轻轻剥掉幼叶和叶原基，解剖针可蘸少许酒精，过火灭菌，但要注意解剖针的冷却，当剥到看见一个闪亮半圆球的顶端分生组织点，只剩两枚叶原基时，可用解剖刀将微茎尖切下来，然后接到培养基中，注意随切随接，防止变干变褐。
情感目标：引导学生勤动脑、勤思考，学思结合，挖掘潜能，培养自主学习意识。
教学重点、难点：
重点：茎尖培养脱毒方法和技术。
难点：茎尖培养脱毒方法和技术。
教学方法及师生互动设计：
主要以讲授法、讨论法、演示法为主，结合组培实验室进行讲解。
1、导入新课；新知识讲解；课堂小结，布置思考题；
2、让学员以小组为单位，通过课件、课上亲自动手进行茎尖剥离等手段增加学生兴趣，进行合作学习，培养学员相互协作解决问题的意识。
课堂练习、作业：
1、热处理脱毒的原理是什么？热处理脱毒的方法有哪些？
2、茎尖培养脱毒的原理是什么？茎尖培养脱毒的技术方法如何？
课后小结：
植物脱毒的意义；植物脱毒的方法、热处理脱毒与茎尖培养脱毒的技术（重点）；
教学内容（讲稿）
备注（包括：教学手段、时间分配、临时更改等）
新课导入：
植物脱毒的病毒病仅次于真菌类病害，对农业生产造成了巨大的损失，如何通过一些技术手段来达到去除植物体内病毒，恢复种性或进行生产，这就是植物脱毒技术。
教案格式：
职教师资培训教案
课程名称：
植物组织培养技术
授课专业：
农学
主讲教师：
周长艳
培训专业：
设施农业
职 称：
中级农艺师
学员单位：
海拉尔农牧职工中专学校
二Ο一八年九月
课程（章节）
植物脱毒技术
教学目的与要求：
知识目标：能够说出热处理脱毒与茎尖培养脱毒的原理与方法。
能力目标：能够在生产实践中运用茎尖培养脱毒的方法和技术。
3、影响茎尖培养的因素
（1）茎尖大小：茎尖大小与脱除病毒的效果成反相关，一般切取0.2～0.5mm带1～2个叶原基的茎尖为培养材料。
（2）培养条件：光下培养。
（3）外植体的生理状态：最好从活跃生长的芽上切取，一般地培养顶芽茎尖比培养腋芽茎尖效果好。
（三）其他脱毒方法
课堂小结：（3分钟）
作业布置：（3分钟）
剩余分钟：整理笔记，学生讨论，并解答问题。（2分钟）
2分钟
5分钟,
提出问题：请同学们说说所谓“脱毒苗”或“无病毒苗”是怎样定义的？
10分钟，
讨论：请问同学们热处理脱毒的原理是什么？
思考：热处理不能脱除哪些病毒？
15分钟，思考：茎尖培养脱毒与热处理脱毒相比具有哪些优点？
思考：茎尖大小与脱除病毒的效果是否存在某种关系？
2、方法
(1)温汤浸渍处理：
适用于休眠器官、剪下的接穗或种植材料的脱毒处理。方法是将材料放在50～55℃的温水中浸渍数分钟至数小时。此方法简便易行，但易造成材料受伤。
(2)热空气处理：
适用于生长期植物材料的脱毒处理。设备可采用有照明、通风、调温、给水动能的培养箱。方法是将待处理植株先进行盆栽，成活后移入35～40℃的培养箱中处理几十分钟至几个月。