021延胡索检验标准操作规程2014

万邦德（湖南）天然药物有限公司

目的：制定延胡索的检验标准操作规程，保证检验结果的准确性。

范围：适用于延胡索的检验。

职责：QC主任、QC检验员

QC检验员：负责来样的检验，原始记录的填写完整、清晰准确、对检验结果数据负责；并及时出具检验报告书。

QC主任：合理分配检验工作，对来样检验的及时、结果准确负责；对QC检验员出具的检验记录和检验报告的结果审核负责。

内容：

1. 检验依据：TSD-QS-7-021-00

2. 检验操作程序

2.1性状

延胡索本品呈不规则的扁球形，直径0.5～1.5cm。表面黄色或黄褐色，有不规则网状皱纹。顶端有略凹陷的茎痕，底部常有疙瘩状突起。质硬而脆，断面黄色，角质样，有蜡样光泽。气微，味苦。

延胡索净药材或饮片本品呈不规则的段或片。外表皮黄色或黄褐色，有不规则细皱纹。切面黄色，角质样，具蜡样光泽。气微，味苦。

醋延胡索本品形如延胡索或片，表面和切面黄褐色，质较硬。微具醋香气。

2.2鉴别

（1）显微鉴别

仪器和器皿显微镜、万能粉碎机、载玻片盖玻片目镜测微尺

试剂与试液

水合氯醛试液：取水合氯醛50g，加水15ml与甘油10ml使溶解，即得。

甘油乙醇试液：取甘油、稀乙醇各一份，混合，即得。

稀乙醇：取乙醇529ml，加水稀释至1000ml，即得。

操作步骤本品粉末绿黄色。糊化淀粉粒团块淡黄色或近无色。下皮厚壁细胞绿黄色，细胞多角形、类方形或长条形，壁稍弯曲，木化，有的成连珠状增厚，纹孔细密。螺纹导管直径16～32μm。

标准限度延胡索、延胡索净药材或饮片、醋延胡索应符合以上显微鉴别要求。

（2）薄层鉴别

仪器和器皿电子天平、万能粉碎机、超声仪、烘箱、三用紫外仪、水浴锅

刻度吸管、烧杯、展开缸、微量进样针（5μl）、硅胶G薄层板、玻璃漏斗（60mm）、定性滤纸、碘缸、分液漏斗、量筒、容量瓶、pH试纸、蒸发皿

试剂和试液浓氨试液、甲醇、乙醚、甲苯、丙酮

对照品延胡索对照药材、延胡索乙素对照品

操作步骤取本品粉末lg，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水l0ml使溶解，加浓氨试液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次l0ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索对照药材lg，同法制成对照药材溶液。再取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（WP-Q-8·0-019）试验，吸取上述三种溶液各2～3μl，分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮(9：2)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中约3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

标准限度延胡索、延胡索净药材或饮片、醋延胡索均应符合薄层鉴别要求。

2.3 检查

（1）金胺O

1. 薄层鉴别

仪器和器皿万能粉碎机、电子天平、烘箱、超声仪

移液管（2ml、10ml、20ml）、容量瓶、微量进样针（10μl）、硅胶G薄层板、玻璃漏斗（60mm）、定性滤纸、展开缸、烧杯（25ml）、具塞锥形瓶

试剂和试液70%乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、氨水、甲醇

对照试剂金胺O对照试剂

操作步骤取本品粉末2g，加70%乙醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。取金胺O对照试剂适量，加70%乙醇20ml制成每1ml中含0.1mg的溶液，即得。照薄层色谱法（SOP-QC-8-022）试验，取供试品溶液和对照试剂溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-氨水（4：5 ：1 ：1 ）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，立即在可见光下检视。供试品色谱中，在与对照试剂色谱相应的位置上，不得显相同颜色的斑点。

2. 照高效液相色谱法（SOP-QC-8-020）测定。

仪器和器皿电子天平、高效液相色谱仪、超声仪、万能粉碎机、减压过滤器、水浴锅

棕色量瓶（5ml、50ml）、移液管（25ml、50ml）、滴管、具塞锥形瓶、烧杯（200ml、1000ml）、量筒（250ml、1000ml）、玻璃漏斗（60mm）、定性滤纸、刻度吸管（5ml）、有机系微孔滤膜（0.45μm）、平底烧瓶、量筒

试剂和试液乙腈、磷酸二氢钾、磷酸、三乙胺、甲醇、乙醇

对照试剂金胺O对照试剂

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调pH值为3.0)（35：65）为流动相；检测波长为432nm。理论板数按金胺O对照试剂色谱中的主峰计算，应不低于2000。

对照品溶液的制备取金胺O试剂适量，加70%乙醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。供试品溶液的制备取上述（1）项下的供试品溶液，即得。

测定法取供试品溶液与对照品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。

结果判定供试品色谱中，不得出现与对照试剂色谱主峰保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在320～450波长范围的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。

备注：必要时，可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。建议采用乙腈-0.05mol/L醋酸铵（35：65）流动相系统。

标准限度延胡索、延胡索净药材或饮片、醋延胡索均不得检出金胺O。

（2）水分照水分测定法（SOP-QC-8-015）第一法测定。

仪器与用具电子天平电热恒温鼓风干燥箱扁形称量瓶

操作步骤扁形称量瓶恒重取称量瓶置于烘箱内，将瓶盖取下置称量瓶旁，或将瓶盖