浅谈病原生物学检验的实验准备

要求学生能配制常用染色剂 ，配制时要考虑节约试剂 ， 降 低实验成本 ， 以革兰染色液 的结 晶紫染液配制为例 ｔ 称取 ２８ ．ｇ 结晶紫溶于 ９ ％酒精 ２ Ｌ中， ５ ０ｍ 配成饱和液 ， 取此 ２ Ｌ饱 和 ０ｍ 液加 １ ％草酸铵水溶液 ８ Ｌ即成 。这样既培养了学生配制试 ０ｍ 剂的操作能力 ， 又可以为同学提供 足量 的试剂在学习微 生物学
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浅谈病 原 生物 学检 验 的 实验 准 备
刘 众 齐
（ 邵阳医专 ， 湖南 邵阳 ４ ２ ０ ） ２ ０ ０
【 摘要 】病原生物 学检验 ，包括 医学微 生物 学检 验及人体 寄生虫学检验 ，要 求学生能对常见病原生物作 出准确鉴定 ， 为 ，床提供病原学诊 断依据 。是一 门既培养学生综合分析能力 ， 临 又培养 学生专业技 能， 实践操作性极 强的专业课 ， 因此 ， 实验课
病原生物学检验是检 验专业的专业课 ，包括 微生物学检 验、 寄生虫学检验 ， 除要求学生掌握基础微生物学 、 临床微生物 学、 寄生虫学 及检验 的基本理论 、 基本 知识外 ， 本技 能的训 基 练、 镜下形态的辨认尤为重要 ， 往往需反复进行 ， 甚至手把手地 教才能掌握 ， 因此实验课时多 ， 实验准备繁杂 ， 实验标本来源极 其困难 。同时 尚需考虑到实验室 的生物安全 ， 降低实验成本等 诸多因素， 故对病原生物学检验实验准备 的要求是保证生物安
全 ， 约成 本 ， 保 质 保 量 地 成 功 开 出 教 学 大 纲 要 求 的各 个 实 节 及
分生化鉴定和血清学鉴定 ， 后者是用已知抗体去测未知抗 原， 其操 作技能实际上是玻 片凝集试验 ， 出现颗粒状凝集者 以 为 阳性 ， 否则为阴性 。 实验准备时 ， 金黄色葡萄球菌” 以“ 代替沙 门菌或志贺菌作抗原 ， 用血 浆代替其相对应 的抗血 清 ， 按玻片 凝集法操作 ， 亦可得到颗粒 状凝集样 的实验结果 ， 以减少伤寒 沙 门菌或志贺菌的实验生物安全隐患 。
美蓝平板。 枯草杆菌 、 葡萄球菌 ， 取普通平板暴露于空气 中培养 后 即可获得 。 新型隐球菌 ， 取鸽粪接种于沙堡弱培养基。 皮肤丝 状菌 ， 取皮肤癣病 的病损皮肤接种于沙堡弱培养基 ， 即可获得 。 当年用 的常见的低毒或无 毒菌种 ， 转种半 固体培养基保种 备用 。
５ 菌 种 鉴 定
时多， 实验 准备 工 作 极 为 繁 杂 ， 存在 生 物 安全 隐 患 、 且 标本 来 源
则所用琼脂量略高， 以增加琼脂硬度 ， 避免易划破等缺点。
４ 实验 用 菌 种
选用菌种必须符合生物安全 ， 即选用低毒或无毒菌种 。菌 种来源 ， 一方面 自行分离 ， 亦可是购 自国家菌种 中心的标准株 ， 但后者成本高。 为节约成本 ， 我们将购来 的冻干标准株转种 ， 余 下 部分立 即在酒精 喷灯下封闭管 口， 保留备用 ， 一般 一支菌种
质琼脂粉 （ 必须过滤 ） 以降低 实验成本 ， 如为训练接种用平板 ， 来自百度文库
作者简介 ： 刘众 齐， ，８岁 ， 男 ３ 本科 学历 ， 业于南华大学 ， 毕 助理 实
验 师 。Ｅ ｍａｌ ｙ ｚｚ ＠１ ６ｃ ｍ — ｉｓ ｙ ｌｑ ２ ．ｏ ：
及虫卵标本等。只要尽心尽力去做是可以找到教学标本 的。
要求学生 能准确矫正培养基的 Ｄ Ｈ值及成功配制常用基础
培养基 、 营养培养基 （ 血平 板 、 巧克 力平 板 ）肠道选择培养基 ， 、 所 以开设 ２ ３ － 次培养基制备实验课 ， 以反复训练 ｐ Ｈ值 的矫正 及各类培养基 的制作等技术 。 实验准备时 ， 用琼脂条 ， 而不用优
姜片虫 ， 全托 的幼儿 园检获蛲 虫再 制备 卵等各种标本 。购买血 吸虫 阳性钉螺感染家兔可获血吸虫成虫 ， 虫卵及 阳性钉螺所逸 出的尾蚴标本。 从肝吸虫病流行区的野猫或家猫 中可查获到肝 吸虫成虫及虫卵标本 。 从肺吸虫病流行 区的山溪 中获取已感染 了肺 吸虫囊蚴的溪蟹 ， 再用该 溪蟹感染家犬就可获肺 吸虫成虫
检验 过 程 中使 用 。 ３ 培 养 基 的 制 备
７ 寄生虫检验的标本准备 寄生虫检验的实验标本来源越来越困难 ， 其实验 教学 的重 点又是镜下辨认 常见 寄生虫具诊断意义的离体 阶段 ， 极具鉴定
虫种 意 义 的 形 态 特点 ， 此 实 验标 本 的用 量 及 消 耗均 较 大 。寻 因 找 实验 标 本 是 实 验准 备 的重 要 环 节 ，可从 屠 宰 场 检 获 猪 蛔虫 、
（ 稿 日期 ：０ ９ １— ６ 收 ２０—２２ ）
基层医学论坛 ２ １ ００年第 １ ４月上旬刊 ４卷
困难、 实验成本 高、 工作量 大等特点。针对这些特点 ， 寻找合适 的实验准备方法， 是从事本专业人 员的共 同愿望。
可因玻璃管的长短不 同而使用 ２ ３次 ， － 这样可以节约大量实验
经 费。
【 关键词 】实验 准备
验 成 本
病 原生物 学检验 生物安 全 实
自行分离实验菌种 ： 如大肠杆菌 ， 取正常人 大便接种伊 红
２ 常 用染 色 液 配 制
用结核患者的痰 标本做抗酸染色 ，生物安全隐患较大 ， 且 从患者痰 中排出的抗 酸菌有时难 以获得。凶此 ， 实验准备 时可 用正常人 的痰加卡介 菌混合后做抗酸染色 ，除抗酸菌的成束 、 成堆排列现象明显外 ， 其余抗 酸菌的形态 、 染色性等无任何改
变。
６ 抗 酸 染色
验。我们 的做法是 ：
１ 玻 璃器 皿 的 包 装 与准 备
可从学校图书馆捡 获废弃包装纸来进行包装操作训练 ， 同 时要求每个学生制作一定量的试管塞。 购置的硅胶试管塞价格 较贵且透气性能差 ， 灭菌 时往 往容易被冲掉而受污染 ， 另外 海 棉塞较短 ， 在接种操作训练时 ， 不便拔取 ， 影响无菌操作 。