糖尿病肾病_PPT课件

心血管死亡
临床蛋白尿 血肌酐升高
ESRD
出现糖尿病
2
5
10
20
30年
*肾脏血流动力学改变,肾小球滤过 +肾小球基底膜增厚↑,系膜扩张↑ ,微血管改变+/-
ESRD的发病率及其病因
Patients (n/million peoples)
350.0
300.0
250.0
200.0
150.0
100.0
50.0
MMP 活化 纤溶酶的活性 基质的降解
细胞外基质积聚
Cellular and Molecular Biology 45（1），123-135
参与细胞基质降解的四种酶
天门冬氨酸酶 半胱氨酸酶 丝氨酸酶 基质金属蛋白酶(MMPs)
纤维化前状态
基质合成
正常间质基质蛋白 正常小管基底膜蛋白 异常基质蛋白 蛋白多糖/糖蛋白多糖
基质降解 金属蛋白酶抑制剂 纤溶酶原激活剂抑制剂
糖基化作用,氧化作用. 转谷氨酰胺酶交叉联系
基质 稳定
高糖对MMP活性影响简图
高糖
纤溶酶
表达 活化
活性
基质降解
基 质积 聚
Kidney international ,vol.58,suppl.77,pp.s81-87
肾小球系膜细胞MMP的主要类型
MMP类型
阻断疾病的进展(新概念)
ACEI 与 ARB的作用机理
血压依赖 非血压依赖
ACEI 与 ARB作用及疗效
降低血压及肾内灌注压 消除蛋白尿 保护肾功能 防止肾硬化或延缓慢性肾衰进展
血压、蛋白尿与GFR下降速率的关系
ACEI 与 ARB生理作用的区别
ACEI
ARB
作用在ACE水平面
细胞增殖测定
WST-1 法 (波长 450/600nm)
Western blot 分析
抗体1: MMP1,2,3,9 抗体2:羊抗鼠 IgG (辣根过氧化物酶)
结果
高糖对 NHMC 增殖的影响
结果
肝素对 NHMC 增殖的影响 （LG）
结果
肝素对 NHMC 增殖的影响 （HG）
结果
背景
糖尿病的wk.baidu.com要并发症
冠心病 周围神经病变 视网膜病变 糖尿病肾病
背景
糖尿病肾病是糖尿病最严重的并发症之一 最近研究显示，糖尿病肾病的发病率呈明
显增加 糖尿病肾病的发病机制目前并未完全明确
2型糖尿病肾病的自然病程
临床2型糖尿病 功能改变*
血压升高 微量白蛋白尿
结构改变+
间质胶原酶 IV型胶原酶或明胶酶 基质降解素 膜型金属蛋白酶
名称
酶作用底物
MMP-1,MMP-8 , MMP13
II和 III型胶原
MMP-2, MMP-9
IV,V和 VI型胶原、纤连蛋 白、明胶
MMP-3,MMP-7, MMP-10 蛋白多糖，laminin，纤连 蛋白，III,IV,V型胶原
MT1-MMP
PKCζactivation
?
TIMP and MMP
ECM accumulation
DIABETIC NEPHROPATHY
稳态
基质合成
基质降解
糖尿病肾病的机制研究
合成
降解
细胞外基质
糖尿病中促进 ECM 积聚的因素
高糖
？
TGF-β
基质蛋白 MMP s TIMP s 纤溶酶原活化物 TGF-β
MMP-2
Kidney international ,vol.58,suppl.77,pp.s81-87
糖尿病肾病临床病理分期
Ⅰ期
高滤过，肾小球体积 增大
GFR
MAP(-)
BP(-)
肾 小 球 肥 大 ， GBM 和系膜正常
Ⅱ期
正常白蛋白尿
Ⅲ期
微量白蛋白尿
Ⅳ期
大量白蛋白尿
Ⅴ期
ESRD
/(-)
应激后
肝素能影响肾小球系膜细胞MMPs 的表达，从而 提示肝素对糖尿病肾病的肾保护作用是通过非抗 凝作用而实现
ACEI与ARB在肾脏病中的应 用
RAS示意图及其与激肽系统的关系
Angiotensin -Ⅱ (Ang-Ⅱ)分类
血流动力学 非血流动力学
抑制或阻断增加血管紧张素系统(RAS)
• 非病因性治疗 • 非简单的症状性治疗 • 治疗目的—干扰(缓解) 疾病发病机制,
/(-)
大致(-)



200ug/24h


小球荒废面

GBM 增 厚 ， MC 增 殖
GBM增厚，ECM
GBM 增 厚 ， ECM，小球荒废
硬化（广泛）
正常肾小球
糖尿病肾脏KW 结节
局灶性节段性肾小球硬化
终末期肾病（硬化）
高糖环境下正常人类肾小球 系膜细胞中MMP表达及肝
Hyperglycaemia
DAG
(esp. PKCζ)
Diabetologia(2001)44:659~673
Protein Kinase C Isoforms
Atypical aPKCs ζ
widespread
Diabetologia(2001)44:659~673
Hyperglycaemia
MMP1
a b cd
52 kd
MMP2
a b cd
72 kd
MMP3
MMP9
57 kd
a b cd
a b cd
高糖对NHMC中 MMP1,2,3,9 表达的影响
92 kd
结论
高糖环境下肾小球系膜细胞的增殖明显增加，而 肝素能明显抑制肾小球系膜细胞的增殖
高糖环境下肾小球系膜细胞MMPs 的表达异常提 示MMPs参与了细胞外基质的合成与降解的过程
素对其表达的影响
材料与方法
细胞培养
正常人类肾小球系膜细胞 (NHMC) 培养基(5mM DMEM,25mM DMEM) 10%小牛血清(10%FCS) 青霉素 (100u/ml), 链霉素 (100mg/ml) 肝素 培养调节:37℃,5%CO2, 95% 空气
材料与方法
作用在Ang-Ⅱ受体水平
只阻断Ang-Ⅱ增加的经典合成途径 同时阻断经典和非经典的途经
不影响AT-2受体
增加AT-2受体的作用
阻断缓激肽灭活
对缓激肽无作用
副作用 干咳,血管神经性水肿瘤 副作用少
ACEI 与 ARB疗效的比较
ACEI ARB
降低醛固酮
0.0 1991
1992
1993
1994
1995
1996
1997
1998
1999
2000
DM HTN GN CK All
糖尿病发病率（国内）
1980年（14省市30万人口） 1994年（19省市21.35万人口） 1996年（11省市42.75万人口） 预计2025年 全球
0.67％ 2.51％ 3.21％ 3亿