食品微生物 实验指导书

新疆玛纳斯县成职教中心

食品微生物

实验指导书

张银亮

《食品微生物》实验指导书

课程名称：食品微生物学实验

课程类型：必修

总学时/实验学时：16

适用对象：10食科班

课程主要内容

食品微生物学是研究与食品有关的微生物的特性，研究食品中微生物与微生物、微生物与食品、微生物、食品、人体之间的相互关系，研究微生物以及各类食品产品、食品中间体，食品原料、食品生产过程、产品包装、贮藏和运输过程微生物介导的不安全因素及其控制。微生物作为一类资源进行开发和利用潜力很大，前景广阔。学生通过学习和掌握现代微生物理论与技术的基础上，发挥微生物现有和潜在的用途和价值以及推动食品科学的发展。

一、课程的性质与任务

微生物学实验属于食品科学与工程专业基础必修课，是一门实践性课程。通过一系列的实验，使学生掌握微生物学实验的基本操作、基本技能，培养学生的实验设计思路，提高实验操作水平和数据分析能力。并将所学的微生物理论知识有机的结合起来，为微生物的实际应用打下坚实基础。

二、实验教学基本要求

实验操作是本课程的主要教学内容，要求学生课前预习实验内容，写实验预习报告，课堂上教师只对实验原理及注意事项进行简要介绍，以学生动手操作为主。学生课后要写实验报告，并认真分析实验结果，教师认真批改。学生应理解并掌握各实验所涉及的实验技能及其原理。

附：实验计划

《食品微生物》实验（实训）计划

实验一普通光学显微镜的使用

一、目的要求

1、熟悉普通光学显微镜的构造及其使用方法。

2、了解油镜的原理，并掌握其使用方法。

二、实验原理

（一）、普通光学显微镜的构造

普通光学显微镜包括机械部分和光学部分两部分。机械部分包括镜座、

镜臂、镜筒、载物台、物镜转换器、粗调节螺旋、细调节螺旋、标本夹等。光学部分包括接目镜、接物镜、反光镜、光圈（虹采）、聚光镜（集

光器）等（图1-1）。

（二）、油浸系的原理

浸系是在油浸镜与标本之间加1滴香柏油，调整光源检查细菌标本的方法。

油浸镜是一种高倍放大的物镜，一般都刻有放大倍数，如95x、100x等。其镜头标记国产镜多用“油”字表示，国外产品则用“Oil”（Oil Immersion）或HI（homogeneous Immersion）表示。而且油镜的镜身较高倍镜和低倍镜为长，镜片最小，这也是识别的另一种标志。其使用原理是：由于香柏油与玻璃的折光率相似（香柏油为1.515，玻璃为1.52）。镜检时，滴加香柏油的作用是使光源尽可能多的进入物镜中，避免光线通过折光率低的空气（折光率为1.0）而散失，因而能提高物镜的分辨率，使物像明亮清晰（见图1-2）。

三、实验器材

1、菌种金黄色葡萄球菌及大肠杆菌。

2、香柏油、二甲苯、擦镜纸。

四、方法步骤

（一）显微镜油镜的使用

1、用低倍镜对光。

2、低倍镜观察（寻找观察目标）。

3、高倍镜观察（选取理想的观察目标）。

4、油镜观察：高倍镜观察后----上升镜微--油镜转至正下方在载玻片上加一小滴香柏油--小心地下降镜微使镜头浸在油里----用粗螺旋将镜微缓慢上升，寻找目标（物象）----用螺旋调节，使物象清晰----观察记录。

5、观察完毕。上升镜筒转动物镜转换器，使油镜物镜偏位。用干净擦镜纸擦去镜头上的油迹，最后再用擦镜纸擦去残留在镜头上的二甲苯。

6、将显微镜各部分还原，放回箱中。

（二）细菌三态的观察

按照上述步骤用油镜观察标本后绘图。

五、结果与思考

1、绘图记录观察结果。

2、思考题

用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？

实验二培养基的制备与灭菌

一、目的要求

掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。

掌握培养基的配置方法。

掌握干热灭菌和高压蒸汽灭菌的操作方法。

二、基本原理

正确掌握培养基的配制方法是从事微生物学实验工作的重要基础。由于微生物种类及代谢类型的多样性．因而用于培养微生物的培养基的种类也很多，它们的配方及配制方法虽各有差异。但一般培养基的配制程序却大致相同．例如器皿的准备，培养基的配制与分装，棉塞的制作，培养基的灭菌，斜面与平板的制作以及培养基的无菌检查等基本环节大致相同。

三、实验材料

药品：待配各种培养基的组成成分、琼脂、1mol/L的NaOH和HCl溶液。

仪器及玻璃器皿：天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。

其他物品：药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等。

四、操作步骤

（一）玻璃器皿的洗涤和包装

1．玻璃器皿的洗涤

玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中．用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸馏水冲净。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡，再用自来水及蒸馏水冲洗。洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。

2．灭菌前玻璃器皿的包装

培养皿的包扎：培养皿由一盖一底组成一套，可用报纸将几套培养皿包成一包，或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内，加盖灭菌。包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。

移液管的包扎：在移液管的上端

塞入一小段棉花(勿用脱脂棉)，它的

作用是避免外界及口中杂菌进入管

内，并防止菌液等吸入口中。塞入此

小段棉花应距管口约0.5cm左右，

棉花自身长度约1~1.5cm。塞棉花

图8-1 移液管的包扎时．可用一外围拉直的曲别针、将少